Name: עכברי Ileocolic מעי כריתה עם השקה ראשונית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: למד כיצד לבצע כריתה אילאוקולית בעכברים עם השקה ראשונית. שיטה זו מאפשרת חקר השפעות כריתת מעיים במודלים של מחלות כירורגיות ומספקת כלי יקר ערך למחקר רפואי מתקדם.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ברצוננו להכיר בתרומות המימון של קרן המחקר הכירורגי הקנדית, קרן הסיוע למחקר של עובדי אדמונטון וקונסורציום IBD של אלברטה באמצעות מענק מ-Alberta Innovates.

פרוטוקולי שימוש בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה למדעי בריאות טיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטת אלברטה. 1. הכנת מכשירים, בעלי חיים והגדרה אופרטיבית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את החיות לנעדרו חדש, נקי כלוב של כל שעה המוצקה מזון 24 לפני ההליך. אולי יש להם גישה חופשית למים, וכופתות דיאטת נוזלים עד למועד ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החיטוי כל המכשירים דרושים להליך. משטח נקי הפעלה וחרטומו הרדמה עם 70% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את משטח ההפעלה עם מיקרוסקופ, מכונה הרדמה וציוד באופן שנוח לי מנתח ההפעלה. מרפקיו של המנתח צריכים להיות מותר לנוח בנוחות על שולחן הניתוחים, עם ידיים והזרועות בלא הפרעה על ידי ציוד. מכשירים, תפרים, צמר גפן, ומזרק 10 מיליליטר צריכים להיות ממוקמים במיקום המאפשר גישה נוחה במהלך ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר אתמנורות חימום מעליו כדי לספק חום לבעלי החיים במהלך ההליך והאור למשטח ההפעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא שפופרת 50 מיליליטר חרוטי עם מי מלח 0.9%, וצינור 1.5 מיליליטר עם וזלין ומקום קרוב לפני השטח התפעולי. הערה: לעקר את כל המכשירים וציוד ניתוחי. בגלל המעי transected, ההליך עצמו הוא לא סטרילי. זה נחשב מזוהם נקי. לנקוט בצעדים כדי למנוע את כניסתה של מקורות אקסוגני של זיהום. </li></ol> 2. Ileocolic כריתה עם ההשקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגרום להרדמה על ידי מתן isoflurane 4% עם קצב זרימת חמצן של 2 ליטר / דקה באמצעות חרטומו מאידוי isoflurane עד קצב הנשימה בעלי החיים מאט לכ 30-40 נשימות / דקה. הפעל לחץ מתון לרגלו האחורית של העכבר כדי להבטיח שאין תגובת כאב לפני שתזם את ההליך. בשלב זה, לדחות את isoflurane עד 2% וזרימת חמצן 0.5 ליטר / דקה. לסירוגיןלבדוק את תגובת כאב במהלך ההליך ולהתאים קצב זרימת isoflurane בהתאם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל זלין על העיניים כדי למנוע התייבשות במהלך ניתוח, ולשתק את העכבר במצב שכיבה עם גפיים מאובטחים באמצעות סרט שקוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנקות את הבטן עם פתרון povodine / יוד, ולשנות לכפפות סטריליות חדשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעשות חתך בעור 1.5 סנטימטרים בקו האמצע העליון של הבטן באמצעות נקודה חדה לנתח מספריים כדי לחשוף את fascia והצפק. פתח את שכבת fascial / הצפק באופן דומה באמצעות alba linea לחשוף את התוכן של הצפק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בניגוד לבני אדם, cecum העכבר הוא נמצאה בדרך כלל ברבע העליון השמאלי של הבטן. ברגע שזיהה, בעדינות לתפוס את cecum עם מלקחיים ויעביר אותו דרך החתך. השתמש בצמר גפן טבולה להתפרש כ 3 סנטימטר של מעי מסוף המשתרע מcecum על גזה סטרילית שנפרשה על פני הבטן (איור 1 א).ודא המעי החשוף הוא כל הזמן לח עם מי מלח 0.9% במהלך המכלול של ההליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את עורק ileocecal מתפצלים עורק mesenteric מעולה לאורך המעי הגס (איור 1 א) באמצעות מיקרוסקופ. לנתח את רקמות avascular הסמוכות לעורק ileocecal, להקיף ולקשור את העורק עם עניבת משי 5-0. בשלב הבא, לאתר את אספקת הדם האזורית למעי סופני ולבחור הפרוקסימלי סנטימטר 1.5-2 נקודת חיתוך רוחב לצומת ileocecal. ולקשור את הענפים לחלק זה של מעי כאמור לעיל. מחלקים את העורקים עם מיקרו לנתח מספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את מנות איסכמי של מעי ומעי גס הבטחה יש אספקת דם מספקת לקצות transected (איור 1). זה בדרך כלל מועיל למרית המעי על ידי חלוקתו בזווית של 30 מעלות כדי להגדיל את הקוטר של לומן כך שיתאים למעי גס באופן הדוק יותר. לאחר חלק ileocecal של מעי הוסר, ליישרקצות transected של מעי ובמעי גס בגזה, הבטחת גבולות mesenteric של כל מיושרים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבנות את ההשקה על ידי קירוב סוף transected של מעי עד סוף transected של מעי גס באמצעות נקטע 8-0 תפרי פוליפרופילן (איור 1 ג &#39;). התפר הראשון ממוקם בגבול mesenteric, עם תפרים שלאחר מכן הוצבו למ&quot;מ 0.5 עד ההשקה Ileocolic היא אטומה למים. כאשר עוברים את מחט התפר דרך המעי והמעי הגס, לוודא שהקצה לחתוך לא התגלגל, ועקיצות מחט 0.5 מ&quot;מ מקצות החתך של המעי. השקה טיפוסית תדרוש 14-16 תפרים נקטעו. בדוק את השלמות וpatency של ההשקה עם השלמה על ידי גלגול הפרוקסימלי מקלון צמר גפן לדיסטלי על המעי לכפות תכנים באמצעות ההשקה. תוכן מעי דק צריך לעבור בחופשיות לתוך המעי הגס ללא דליפה בהשקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יש לשטוף את המעי החשוף עם 3-4 מיליליטר של תמיסת מלח 0.9% מהמזרק 10 מיליליטרכדי לשטוף את הצואה מפני שטח של המעי, ולספק מעי בחזרה לתוך חלל הצפק. באמצעות 2 מיליליטר של תמיסת מלח 0.9% לשטוף את חלל הצפק, ולאחר מכן ניקוז נוזל זה על ידי הפעלת לחץ עדין על דופן הבטן רוחבית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגירת החתך עם תפר ריצת 3-0 משי, ולהפסיק את זרימת isoflurane. נהל 0.1 מ&quot;ג / קילוגרם של האופיום הארוך טווח -buprenorphine- תת-עורית לשליטה בכאב שלאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב לבעלי החיים תחת מנורת החום עד שהם ניידים ולאחר מכן להעביר אותם לכלוב חימם ללא הרף. </li></ol> טיפול וניטור 3. לאחר ניתוח <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צג חיות בכלוב מחומם ללא הרף לסימני מצוקה לשארית היום. העבר את החיות בחזרה למתקן הטיפול בבעלי החיים בכלוב סטרילי חדש גישה לדיאטה נוזלית וכופתות מים. בעלי חיים עשויים להיות מאוחסנים בקבוצות של 3-4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע בדיקה על בעלי החיים שלאחר הניתוח למחרת בבוקר,להבטיח את בעלי החיים אינם מופיעים במצוקה. להאכיל את דיאטת נוזלים בלבד. אם הם מופיעים (, יציבה כלומר כפוף או פעילות מינימאלית) שלא בנוח לנהל מנה נוספת של עצירות תת עורי. בדוק על בעלי החיים פעם נוספים בשעתי אחר הצהריים ביום שלאחר ניתוח 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בבוקרו של יום שלאחר ניתוח 2 בעלי החיים אמורים להופיע התאוששו לחלוטין. עדות לצריכת מזון וstooling סימנים חיוביים של התאוששות. עכשיו, לחדש את דיאטת אוכל מוצקה לבעלי החיים. הערה: סימנים של מצוקה כוללים יציבה כפופה, הזנחה עצמית, ופעילות מינימאלית. אם סימני המצוקה בולטים צריכים להיות מורדמים בעלי החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את בעלי החיים על ידי גרימת הרדמה עמוקה עם isoflurane 4% בקצב זרימת O 2 של 2 ליטר / דקה עד בעלי חיים אינם מגיב ללחץ ברגל. בצע נקע בצוואר הרחם, ולבחון סימנים של euthanization הנכון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנחיות משתנות, כך מתייחסות להמלצות גופים המוסדיות בדבר אינדיקציותולשיטות של euthanization בעכברים. </li></ol>

<ol><li>Hallet, J., Zih, F. S., Lemke, M., Milot, L., Smith, A. J., Wong, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neo-adjuvant+chemoradiotherapy+and+multivisceral+resection+to+optimize+R0+resection+of+locally+recurrent+adherent+colon+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Neo-adjuvant chemoradiotherapy and multivisceral resection to optimize R0 resection of locally recurrent adherent colon cancer.</a> European Journal of Surgical Oncology. 40 (6), (2014).</li>
<li>Rutgeerts, P., Geboes, K., Vantrappen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+history+of+recurrent+Crohn%27s+disease+at+the+ileocolonic+anastomosis+after+curative+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Natural history of recurrent Crohn's disease at the ileocolonic anastomosis after curative surgery.</a> Gut. 25 (6), 665-672 (1984).</li>
<li>Davis, D., Rivadeneira, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complications+of+colorectal+anastomoses%3A+leaks%2C+strictures%2C+and+bleeding%5BTitle%5D)+AND+%22The+Surgical+clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Complications of colorectal anastomoses: leaks, strictures, and bleeding.</a> The Surgical clinics of North America. 93 (1), 61-87 (2013).</li>
<li>Helmrath, M. A., VanderKolk, W. E., Can, G., Erwin, C. R., Warner, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+adaptation+following+massive+small+bowel+resection+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Intestinal adaptation following massive small bowel resection in the mouse.</a> Journal of the American College of Surgeons. 183 (5), 441-449 (1996).</li>
<li>Dekaney, C. M., Fong, J. J., Rigby, R. J., Lund, P. K., Henning, S. J., Helmrath, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+of+intestinal+stem+cells+associated+with+long-term+adaptation+following+ileocecal+resection+in+mice.+American+journal+of+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+and+liver+physiology%22%5BJournal%5D)">Expansion of intestinal stem cells associated with long-term adaptation following ileocecal resection in mice. American journal of physiology.</a> Gastrointestinal and liver physiology. 293 (5), (2007).</li>
<li>Speck, K. E., De Cruz, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+enhances+resection-induced+intestinal+adaptive+growth+in+IL-10+null+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+surgical+research%22%5BJournal%5D)">Inflammation enhances resection-induced intestinal adaptive growth in IL-10 null mice.</a> The Journal of surgical research. 168 (1), 62-69 (2011).</li>
<li>Rigby, R. J., Hunt, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+animal+model+of+postsurgical+bowel+inflammation+and+fibrosis%3A+the+effect+of+commensal+microflora%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">A new animal model of postsurgical bowel inflammation and fibrosis: the effect of commensal microflora.</a> Gut. 58 (8), 1104-1112 (2009).</li>
<li>Kostic, A. D., Xavier, R. J., Gevers, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Microbiome+in+Inflammatory+Bowel+Disease%3A+Current+Status+and+the+Future+Ahead%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">The Microbiome in Inflammatory Bowel Disease: Current Status and the Future Ahead.</a> Gastroenterology. , 1-11 (2014).</li>
<li>Gevers, D., Kugathasan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Treatment-Naive+Microbiome+in+New-Onset+Crohn%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+host+%26+microbe%22%5BJournal%5D)">The Treatment-Naive Microbiome in New-Onset Crohn's Disease.</a> Cell host & microbe. 15 (3), 382-392 (2014).</li>
<li>Ahmed, T., Rieder, F., Fiocchi, C., Achkar, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+postoperative+recurrence+in+Crohn%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of postoperative recurrence in Crohn's disease.</a> Gut. 60 (4), 553-562 (2011).</li>
<li>Borowiec, A., Sydora, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+bowel+fibrosis+and+systemic+inflammatory+response+after+ileocolonic+anastomosis+in+IL-10+null+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Small bowel fibrosis and systemic inflammatory response after ileocolonic anastomosis in IL-10 null mice.</a> Journal of Surgical Research. 178 (1), 147-154 (2012).</li>
<li>Devine, A. A., Gonzalez, A., et al. Impact of Ileocecal Resection and Concomitant Antibiotics on the Microbiome of the Murine Jejunum and Colon. 8 (8), (2013).</li>
<li>Bij, G. J., Oosterling, S. J., Beelen, R. H. J., Meijer, S., Coffey, J. C., van Egmond, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+perioperative+period+is+an+underutilized+window+of+therapeutic+opportunity+in+patients+with+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+surgery%22%5BJournal%5D)">The perioperative period is an underutilized window of therapeutic opportunity in patients with colorectal cancer.</a> Annals of surgery. 249 (5), (2009).</li>
<li>Scott, A. D., Uff, C., Phillips, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+macrophage+function+by+suture+materials+and+anastomotic+recurrence+of+Crohn%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+journal+of+surgery%22%5BJournal%5D)">Suppression of macrophage function by suture materials and anastomotic recurrence of Crohn's disease.</a> The British journal of surgery. 80 (3), (1993).</li>
<li>Kiernan, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+anastomosis+in+the+rat+facilitated+by+a+rapidly+digested+internal+splint+and+indigestible+but+absorbable+sutures%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Intestinal anastomosis in the rat facilitated by a rapidly digested internal splint and indigestible but absorbable sutures.</a> Journal of Surgical Research. 45, 427-431 (1988).</li>
<li>Andersen, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+matrix+metalloproteinases+at+restricted+sites+in+colon+anastomosis+repair%3A+an+immunohistochemical+and+biochemical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Action of matrix metalloproteinases at restricted sites in colon anastomosis repair: an immunohistochemical and biochemical study.</a> Surgery. 140 (1), 72-82 (2006).</li>
<li>Thompson, S. K., Chang, E. Y., Jobe, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+review%3A+Healing+in+gastrointestinal+anastomoses%2C+Part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Clinical review: Healing in gastrointestinal anastomoses, Part I.</a> Microsurgery. 26 (3), 131-136 (2006).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף

ICR העכברי הוא מודל רב עוצמה שיכול לשמש כדי לחקור את ההשפעות של ניתוח במחלות מעי. מאמר זה מתאר שיטה לביצוע ICR בעכברים עם שיעור הצלחה של 95% ואין בעיות עם כישלון בשגשוג כפי שמשתקף במשקל יציב עד 28 ימים לאחר הליך. האתגרים המשמעותיים ביותר לICR המוצלח כוללים הימנעות ממכשולי מעי בהשקה ודליפות בהשקה. אלמנטים טכניים לניתוח למניעת חסימה נועדו למקסם את קוטר לומן בהשקה. Spatulation של המעי בנקודת חיתוך רוחב מגדיל את קוטר...

כריתה אילאוקולית (ICR) היא הליך נפוץ המבוצע הן במצבים דחופים והן במצבים אלקטיביים למגוון מחלות. מחלת קרוהן וסרטן המעי הגס הן שתי ההתוויות השכיחות ביותר ל-ICR. בשתי המחלות, הישנות במעי במקום הניתוח מהווה בעיה קלינית גדולה. שיעורי הישנות מקומיים של סרטן המעי הגס נותרו בעיה אפילו עם הכריתות האגרסיביות ביותר1. בעקבות ICR במחלת קרוהן, המחלה חוזרת בשכיחות הגבוהה ביותר (עד 80%) באילאום הניאו-טרמינלי שנה לאחר הניתוח2. בהתחשב בהשפעה של שתי המחלות הללו והישנותן לאחר הניתוח, חשוב להבין את גורמי המעי המקומיים לאחר ICR, שעשויים להיות בעלי השפעות מהותיות על ההיסטוריה הטבעית של מחלות אלה. יתר על כן, חשוב גם לשקול ריפוי אנסטומוטי לאחר ICR. בתקופה המוקדמת שלאחר הניתוח, לדליפות אנטומוטיות עלולות להיות השלכות הרסניות על המטופלים וכתוצאה מכך ניתוחים חוזרים, יצירת סטומה, תחלואה משמעותית ואפילו תמותה3. למרות חשיבותו של נושא זה, ההבנה הנוכחית שלנו לגבי ריפוי אנסטומוטי נותרה בחיתוליה, כנושא למחקר. מודלים של בעלי חיים של ICR, במיוחד עכברים, הם פלטפורמה מצוינת לחקר ריפוי המעיים והאנטומוטי לאחר ניתוח.
מודל עכבר של ICR פותח בתחילה על ידי Helmrath et al. כדי לשמש כמודל של תסמונת המעי הקצר4. המחברים ערכו ניסויים עם גדודי תזונה שונים וגדלי תפרים כדי לייעל את הישרדות בעלי החיים לאחר ICR. הם הגיעו למסקנה כי האכלה בתזונה נוזלית בתקופה הפרי-ניתוחית ושימוש בתפרי מונופילמנט 9-0 הביאו להישרדות אופטימלית לאחר הניתוח של 88%. מאז פרסום ראשוני זה, נעשה שימוש ב-ICR בעכברים שהסירו 50% מהמעי הדק במספר מחקרים כדי לחקור את הדינמיקה של כריתת מעי דק מסיבית ואת תגובת הגדילה האדפטיבית בניסיון לפתח טיפולים חדשים לתסמונת המעי הקצר5,6.
היישום הראשון של מודל העכברים ICR למחלת קרוהן השתמש במודל העכבר IL-10-/-, שמפתח באופן ספונטני קוליטיס7. המחברים מצאו כי לאחר ICR בעלי חיים אלה פיתחו דלקת באילאום הניאו-טרמינלי הדומה לזו שנצפתה בחולי מחלת קרוהן לאחר ניתוח, וכי דלקת זו הייתה תלויה בנוכחות חיידקים7. לאחרונה, מודל זה שימש לחקר שינויים חיידקיים הנגרמים על ידי ICR. במחלת קרוהן יש דיסביוזה קשורה עם ירידה יחסית בחיידקים הידועים כבעלי תכונות אנטי דלקתיות ועלייה במינים פולשים של חיידקים8,9. הקשר נכון במקרים של הישנות לאחר ניתוח10. שני מחקרים ביקשו לזהות שינויים מיקרוביאליים הנובעים מ-ICR. הראשון השתמש בעכברי IL-10 null, וביצע אלקטרופורזה של ג'ל דנטור כדי להשוות דמיון חיידקי בין המעי הדק למעי הגס לאחר ICR11. מחקר זה הדגים כי אוכלוסיות החיידקים הפכו דומות במעי הדק ובמעי הגס לאחר ICR. מחקר עוקב השתמש בעכברים מסוג בר ובריצוף פירוסקוונס של 16 שניות לסיווג פילוגנטי של מיני חיידקים לאחר הניתוח. מחקר זה הראה שינוי ניכר במיני החיידקים כתוצאה מניתוח בלבד עם זני קלוסטרידיום שהפכו לדומיננטיים כמו גם עלייה ב-Υ-proteobacteria. התוצאות גם אישרו את ממצאי המחקר הקודם עם אוכלוסיות דומות שנמצאו במעי הדק ובמעי הגס לאחר ICR12. 
ICR הוא הליך נפוץ לחולים עם סרטן המעי הגס הכולל את הצקום והמעי הגס העולה, ויותר ויותר מוכר כי תגובת המארח לניתוח תורמת ככל הנראה להישנות הגידול המקומי והמרוחק13. למרות תצפית זו, מודלים של ICR לא שימשו לחקר סרטן המעי הגס והישנות לאחר הניתוח. הבנת השינויים האימונולוגיים המערכתיים והמקומיים הנובעים מ-ICR תהיה חשובה בחקירת טיפולים עתידיים. מסלולים פוטנציאליים המעורבים בהישנות סרטן לאחר ICR כוללים ויסות מוגבר של גורמי גדילה, שעשויים להציל תאים מאפופטוזיס ולעורר התפשטות, שיבוש מכני של גידול עם נשירת תאים, ואובדן מעקב חיסוני באמצעות דיכוי חיסוני לאחר ניתוח13,14. 
למודלים של עכברים של ICR יש פוטנציאל להיות כלי רב עוצמה לחקר תסמונת המעי הקצר, מחלת קרוהן וסרטן המעי הגס. הם עשויים גם לספק שיעורים כיצד למנוע סיבוכים אנסטומוטיים מוקדמים לאחר הניתוח על ידי הגדרה נוספת של המסלולים התאיים והביוכימיים המעורבים בריפוי האנסטומוזיס החדש שנבנה. מחסום מרכזי בשימוש במודל ICR של עכברים הוא הקושי הטכני. האנסטומוזה של המעי דורשת שימוש ב-8-0 או תפר 9-0, מיקרוסקופ ניתוחי והכשרה בטכניקות מיקרוכירורגיות. מטרת מאמר זה היא לספק הוראות ברורות כיצד לבצע ICR בעכברים במטרה להשתמש בהליך זה במודלים של מחלה.

<table><tbody><tr><td>דיאטת מכרסמים נוזלית LD101</td><td>testdiet.com</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0.9% NaCl</td><td>בקסטר</td><td>FKE1324</td><td>איכות הזרקה מלח</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ הפעלה</td><td>Ziess</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane הרדמה</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>34-0483</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott&nbsp;</td><td>05260-05</td><td></td></tr><tr><td>צלחת</td><td></td><td></td> זכוכית <td>למשטח הפעלה</td></tr><tr><td>צמר</td><td></td><td></td><td></td>גפן</tr><tr><td>מיקרו Castroviejo מחזיק מחט, מכשירי דיוק עולמיים מעוקלים</td><td></td><td>503377</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo מספריים ישרים</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>555530S</td><td></td></tr><tr><td>מספריים חיתוך</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>15922</td><td></td></tr><tr><td>חבישת מלקחיים x 2</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>500363</td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפרים חתוכים מראש משי</td><td>Ethicon</td><td>A182H</td><td>לקשירת כלי דם</td></tr><tr><td>8-0 פרולן על מחט BV130-5</td><td>Ethicon</td><td>8732H</td><td>לאנסטומוזיס</td></tr><tr><td>3-0 משי על מחטי FS-2</td><td>Ethicon</td><td>8665G</td><td>לסגירת דופן הבטן</td></tr><tr><td>וזלין</td><td></td> <td>ג'לי נפט</td><td></td></tr><tr><td>מזרק 10 מ"ל</td><td>BD biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Povidone-iodine 7.5% כירורגי Scrub</td><td><a href="http://betadine.com">betadine.com</a></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מנורות</td><td></td><td></td><td></td>חום</tr><tr><td>בופרנורפין 0.3 מ"ג/מ"ל</td><td>רקיט בנקיזר הלת'קר בע"מ&nbsp;</td><td>PL36699/0006</td><td></td></tr></tbody></table>

עכברי ileocolic מעי כריתה עם השקה ראשונית

Murine Ileocolic Bowel Resection with Primary Anastomosis

כריתת מעיים נדרשת לעתים קרובות לטיפול במחלות המערבות את מערכת העיכול, כאשר מחלת קרוהן וסרטן המעי הגס הן שתי דוגמאות נפוצות. למרות תדירות ההליכים הללו, נותר פער ידע משמעותי בתיאור ההשפעות האינהרנטיות של כריתת מעיים על הפיזיולוגיה של המארח ופתופיזיולוגיה של המחלה. מאמר זה מספק הוראות מפורטות לכריתה אילאוקולית עם אנסטומוזה ראשונית מקצה לקצה בעכברים, כמו גם היבטים חיוניים של טיפול פרי-ניתוחי כדי למקסם את ההצלחה לאחר הניתוח. כאשר עוקבים אחריו מקרוב, הליך זה מניב שיעור הישרדות ארוך טווח של 95%, ללא כישלון בשגשוג, וממזער סיבוכים לאחר הניתוח של חסימת מעיים ודליפה אנסטומוטית. האתגרים הטכניים של ביצוע ההליך בעכברים מהווים מחסום לשימוש נרחב בו במחקר. ניתן לרכוש את הכישורים המתוארים במאמר זה ללא ניסיון כירורגי קודם. לאחר השליטה, הליך הכריתה האילאוקולית של העכברים יספק כלי הניתן לשחזור לחקר ההשפעות של כריתת מעיים במודלים של מחלות אנושיות.

שיעורי תמותה ושינוי במשקל לאחר ניתוח. שיעורי תמותה לאחר ICR בעכברים מסוג בר 129S1 הם בדרך כלל ~ 5%. הסיבה השכיחה ביותר למוסר היא חסימת מעי בהשקה. סיבות נוספות של תמותה כוללות דליפה בהשקה ובקע פנימי המוביל למעי חסימה. ירידה במשקל שניתן לראות עד 14 ימים לאחר ניתוח, אבל הוא בדרך כלל לא משמעותי. עכברים נוטים להחזיר את משקל טרום ניתוחי לחלוטין ביום 28 שבלאחר הניתוח (איור 2). <p class...

כריתה אילאוקולית מבוצעת בדרך כלל במספר מחלות אנושיות; עם זאת, מעט ידוע על השפעת כריתת המעי על מחלות כירורגיות. מאמר זה מספק הדרכה לביצוע ההליך בעכברים בהצלחה גבוהה, ומספק אמצעי לחקר ההשפעות של כריתה אילאוקולית במודלים של מחלות.

עכברי Ileocolic מעי כריתה עם השקה ראשונית

Intestinal resections are frequently required for treatment of diseases involving the gastrointestinal tract, with Crohn&#8217;s disease and colon cancer ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לכרות את האילאום הטרמינלי והצקום ולבצע אנסטומוזיס קוליק IOC. זה מושג על ידי קשירה ראשונה, אספקת הדם האילוצקלית. השלב השני הוא הסרת החלק האיסכמי של המעי.לאחר מכן, נבנית אנסטומוזה של קוליק IOC. השלב האחרון הוא בדיקת האנסטומוזה לאיושרה וסבלנות. בסופו של דבר, ההשפעות של קוליק.כריתה עשויה להיקבע במודלים שונים של מחלה. לכן הדגמה ויזואלית של שיטה זו היא קריטית מכיוון שהכריתה והאנסטומוזה דורשות רמה גבוהה של פירוט אנטומי. כדי להתחיל להעביר בעלי חיים לכלוב נקי חדש, ללא כל מזון מוצק למשך 24 שעות, אפשר גישה חופשית למים ולתזונה נוזלית עד למועד ההליך.חיטוי כל המכשירים הנדרשים להליך מבעוד מועד ונקה את משטח ההפעלה ואת חרוט האף ההרדמה עם 70% אתנול. לאחר מכן, סדרו מכונת הרדמה במיקרוסקופ ניתוח, וציוד כירורגי בנוחות בתוך אזור העבודה. יש למקם מכשירים, תפרים, צמר גפן ומזרק של 10 מיליליטר במקום המאפשר גישה נוחה בזמן העבודה.הגדר מנורת חום תקורה כדי לספק חום במהלך ההליך ואור למשטח ההפעלה. לבסוף, מלאו צינור חרוטי של 50 מיליליטר עם 0.9% מלח וצינור של 1.5 מיליליטר בג'לי נפט והניחו ליד משטח ההפעלה. כאשר מוכן להתחיל, אשר את עומק ההרגעה בעכבר מורדם.לאחר הרדמה מלאה, יש להנמיך את קצב זרימת הפלואור והחמצן. בדוק מעת לעת את תגובת הכאב במהלך ההליך והתאם את קצב זרימת הפלואור בהתאם. לאחר מריחת ג'לי נפט על העיניים, יש לשתק את העכבר במצב שכיבה עם גפה מאובטחת באמצעות סרט שקוף.לאחר מכן, נקו את הבטן עם תמיסת יוד פובידון. לאחר מכן, החלף לכפפות סטריליות חדשות. בצע חתך של 1.5 סנטימטר בקו האמצע העליון של הבטן כדי לחשוף את הפאשיה והצפק לאחר החשיפה, חתוך את האלבה הליניארית כדי לחשוף את תוכן הצפק.בניגוד לבני אדם, סאום העכבר נמצא בדרך כלל ברבע העליון השמאלי של הבטן. לאחר הזיהוי, אחזו בעדינות בצקום בעזרת מלקחיים והעבירו אותו דרך החתך. הניחו גזה סטרילית על פני הבטן והשתמשו בצמר גפן לח כדי לאוורר כשלושה סנטימטרים של אילאום טרמינלי המשתרע מהקקום.ודא שהמעי החשוף נשמר לח עם 0.9% מלח במהלך כל ההליך. בעזרת מיקרוסקופ הפעלה, זהה את העורק האילאוצקלי המסתעף מהעורק המזנטרי העליון לאורך המעי הגס. נתח את רקמות כלי הדם הסמוכות לעורק האילאוצקלי.לאחר הבידוד, הקף וקשר את העורק עם עניבת משי 5.0. לאחר מכן, אתר את אספקת הדם האזורית לאילאום הסופי ובחר חתך 0.1 0.5 עד שני סנטימטרים פרוקסימלי לצומת האילוצקלי. קשר את הענפים לקטע זה של אילאום כפי שהוצג קודם לכן, חלק את העורקים במספריים מיקרו מנתחיםהסר את החלקים האיסכמיים של האילאום והמעי הגס וודא שיש אספקת דם מספקת לקצוות המועברים. לעתים קרובות מועיל לשפוך את האילאום על ידי חלוקתו בזווית של 30 מעלות כדי להגדיל את קוטר הלומן כך שיתאים יותר למעי הגס. לאחר מכן, יישר את הקצוות הרוחביים של אילאום ומעי הגס על הגזה, וודא שהגבולות המזנטרים של כל אחד מהם מיושרים.בנה את האנסטומוזיס על ידי קירוב הקצה הטרנסקט של האילאום לקצה המעי הגס. באמצעות שמונה תפרי פוליפרופילן שנקטעו, יש למקם את התפר הראשון בגבול המזנטרי עם תפרים עוקבים המונחים כל 0.5 מילימטר עד לקוליק. אנסטומוזה אטומה למים.כאשר מעבירים את מחט התפר דרך האילאום והמעי הגס, וודאו כי הקצה החתוך אינו מגולגל, וכי עקיצות המחט נמצאות במרחק של 0.5 מילימטרים מהקצוות החתוכים של המעי. אנסטומוזה טיפוסית תדרוש 14 עד 16 תפרים קטועים. בדוק את השלמות והסבלנות של האנסטומוזיס עם השלמתו על ידי גלגול צמר גפן פרוקסימלי לדיסטלי מעל האילאום.כדי לאלץ את התוכן לעבור דרך המעי הדק, התוכן צריך לעבור בחופשיות למעי הגס ללא דליפה אנסטומוטית. שטפו את המעי החשוף בשלושה עד ארבעה מיליליטר של 0.9% מלח ממזרק 10 מיליליטר כדי לשטוף את הצואה מפני השטח של המעי לפני החזרת המעי לחלל הצפק. שימוש בשני מיליליטר של 0.9% מלח.יש לשטוף את חלל הצפק. מסננים את הנוזל הזה על ידי הפעלת לחץ עדין על דופן הבטן לרוחב. סגור את החתך עם תפר ריצה משי 3.0.הפסק את זרימת האיזופלורן ומתן משכך כאבים לשליטה בכאב לאחר הניתוח. התבוננו בבעלי החיים מתחת למנורת החום עד שהם ניידים, ואז העבירו אותם לכלוב שמתחמם ללא הרף. עקוב אחר בעלי חיים בכלוב שמתחמם ללא הרף לאיתור סימני מצוקה.למשך שארית היום, העבירו את בעלי החיים בחזרה למתקן לטיפול בבעלי חיים בכלוב סטרילי חדש עם גישה לתזונה נוזלית ומים, הוסיפו חשק מיני. בדוק את בעלי החיים בבוקר היום הראשון שלאחר הניתוח. אם הם נראים לא נוחים, יש לתת מנה נוספת של בופרנורפין עד היום השני לאחר הניתוח.הם אמורים להיראות מחלימים לחלוטין. צואה וצריכת מזון הם סימנים חיוביים להתאוששות. אם זה נצפה, הם יכולים לחדש דיאטת צ'או מוצקה.שוב, משקל הגוף לא היה שונה באופן משמעותי בין הקבוצות כאשר השוו את נקודת ההתחלה ליום ה-14 וה-28 שלאחר הניתוח. החלקים ההיסטולוגיים המוכתמים h ו-d של אילאום והמעי הגס מסודרים כדי להדגים את מסלול מחט התפר דרך הרקמות החל מנקודה A ועד לנקודה B.יש לקשור את הקשר בנקודה C, כך שלאחר שליטה, ניתן לבצע טכניקה זו תוך כ-45 דקות אם היא מתבצעת כראוי.

murine-ileocolic-bowel-resection-with-primary-anastomosis

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מתאר את הפרוטוקול המפורט לכריתת מעיים במודל מורין. טכניקה זו מספקת תובנות לגבי ספיגת מרה הנגרמת על ידי כריתת איליקטומיה, הצטברות יתר ורעילות במעי העכבר.

מודל כריתת אילים מורין: חקר מטבוליזם מרה המושרה על ידי איליקטומיה במודל מורין

חומצות מרה תלויי-המעי הדק התחדשות וניגוד משוב של סינתזה של חומצות מרה הכבד חשוב הומאוסטזיס מערכתית ובריאות. במחקר זה, נתאר מודל העכבר עבור כריתה ileal להעריך malabsorption מרה הנוצרות על-ידי ileectomy, overaccumulation, ורעילות במעי העכבר.

Ileectomy-induced מרה Overaccumulation במעי העכבר

חסימות מעיים הם סתימה חלקית או מלאה של המעי העלולה לגרום כאבי בטן, בחילות, הקאות, מניעת המעבר של צואה. ההליך ליצירת obsructions חלקי המעי בעכברים זה אמין בלימוד המנגנונים צמיחת תאים פתולוגיים ומוות במעי.

דגם העכבר של חסימת מעיים חלקית

מאתר למעי הגס דיסטלי מספק מודל מאתר הסחה האנושי קוליטיס, קוליטיס בעיקר לימפוציטית קטע המעי הגס נכללו הנחל צואה.

מאתר למעי הגס הדיסטלי, מודל הרומן של הסחה קוליטיס בעכברים C57BL/6

דליפה anastomotic או התמוטטות לאחר הניתוח היא הגורם העיקרי לזיהום לאחר הניתוח. הניתוח ליצירת השקה של המעי הגס הוא שיטה לשחזור ואמין ללמוד את מנגנוני הריפוי של חיבור.

יצירה של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים

הטכניקה הרובוטית המתוארת כאן נועדה לפרט גישה צעדית לניתוק מוחלט של רובוטים וסיוע בלוטות לימפה לרוחב באגן לסרטן פי הטבעת המתקדם המקומי (T3/T4) הממוקם מתחת להשתקפות הצפקית.

כריתה מזורצית בסיוע רובוט וריצוף בלוטות לימפה לרוחב האגן לסרטן רקטלי בינוני-נמוך מתקדם מקומי

מעקף יחיד anastomosis duodeno-ileal (SADI-S) הוא הליך בריאטרי מתפתח עם השפעות מטבוליות חשובות. במאמר זה, אנו מציגים מודל אמין וניתן לשחזור של SADI-S בעכברים.

מעקף Duodeno-Ileal יחיד Anastomosis עם שרוול Gastrectomy דגם בעכברים

אנו מתארים מודל מורין של אילאוס לאחר הניתוח שנוצר באמצעות מניפולציה במעיים. תפקוד המעבר במערכת העיכול, שינויים פתולוגיים והפעלת תאי מערכת החיסון הוערכו 24 שעות לאחר הניתוח.

מודל Ileus Murine לאחר הניתוח

פרוטוקול זה מתאר את השיטה להקמת מודל חולדה של pouchitis. מודל השקית האיליאלית נוצר על ידי ביצוע ניתוח אנסטומוזה אנאלי (IPAA) באמצעות טכניקות מיקרוכירורגיות. לאחר הניתוח, החולדה טופלה ב-4% דקסטרן סולפט נתרן (DSS) במשך 4 ימים.

מודל חולדה של פאוצ'יטיס לאחר כריתת פרוקטוקולקטומיה ואנסטומוזה אנאלי של כיס איליאלי באמצעות דקסטרן סולפט נתרן

ניתוח לפרוסקופי נמצא בשימוש נרחב בטיפול בסרטן המעי הגס בצד ימין ומציע יתרונות רבים. מאמר זה מתאר את הגישה הכירורגית מהזנב לגולגולת בשילוב עם כריתה מזוקולית מלאה (CME) וכריתת בלוטות הלימפה D3, מה שעשוי להפחית את הקושי הטכני ולהיראות כגישה בטוחה.

גישה קאודלית-לגולגולתית בהמיקולקטומיה ימנית לפרוסקופית עם כריתת מזקולון מלאה וכריתת בלוטת הלימפה D3

למד כיצד לבצע כריתה אילאוקולית בעכברים עם השקה ראשונית. שיטה זו מאפשרת חקר השפעות כריתת מעיים במודלים של מחלות כירורגיות ומספקת כלי יקר ערך למחקר רפואי מתקדם.

עכברי Ileocolic מעי כריתה עם השקה ראשונית

גלה סרטונים נוספים