Name: פוליקולטורה שיטת Rotifer השלמה ומעודכנת לדג הזברה האכלת לתי-פוסקת הראשונה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-01-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: למדו את שיטת הפוליקולטורה של רוטיפרים לגידול זיגוגי דג הזברה בגיל ההאכלה הראשונית. שיטה זו מגבירה את שיעורי ההישרדות והצמיחה תוך הפחתת משאבי הזמן והמקום הנדרשים למחקר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

הטיפול והשימוש בדגים שנוצרו לתוצאות נציג המתוארות בפרוטוקול זה נערך בהתאם מלא להנחיות שנקבעו על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים בבית החולים לילדים בבוסטון, # פרוטוקול 14-05-2673R.

1. Rotifer תרבות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רכיבים בסיסיים של מערכת תרבות באמצעות כלי 100 L תרבות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסוף את כל הרכיבים להתקנת תרבות rotifer. התקנת תרבות rotifer מורכבת מכלי תרבות (CV) לגדול rotifers; כלי דומה כדי לשמור על rotifers feedout (כלי תרבות feedout, FCV); צנצנת בקיעה עגולה תחתית (Feed מאגר, FR) לאחסון של התערובת להאכיל אצות (AFM); אספקת אוויר (AS) ללאוורר את קורות החיים, וFCV FR; משאבת peristaltic עם טיימר מדידה (PMT) לשלוט משלוח של מזון אצות לקורות החיים וFCV; ומסנן חלקיקי חוט (FPF) שיושב בתוך קורות החיים. הערה: רשימה של ציוד ורכיבים מלא מסופקת ברשימת חומרים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תְצוּרָה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעלות את קורות החיים וFCV על דוכן או שולחן, כך שהתרבויות יכולות להיות שנקטפו בקלות באמצעות ניקוז ההולם להמשך אוסףainer (איור 1). השתמש בצינורות אספקת האוויר גמישים להתחבר AS לאורכו של צינור קשיח בכל כלי תרבות. ודא שהצינור הוא מספיק זמן כדי לספק אוויר לתחתית קורות החיים או FCV. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש בקו אוויר קטן-יכולת להתחבר AS לאורכו של צינור קשיח המשתרע עד לתחתית של FR המכיל את AFM. התקן שסתום לכל שורת אוויר להסדיר את זרימת אוויר. חבר את FR לPMT עם צינורות אספקת מזון, ומפעיל את הצינור מPMT לתוך חור שנקדח בצד של קורות החיים / FCV, בחלקו העליון. איור 1. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לִקְפּוֹץ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא את כלי התרבות עד 90% מההיקף הזמינים במי אוסמוזה ההפוך (RO). אם RO אינו זמין, להשתמש במים נקיים, dechlorinated עירוניים; עם זאת, הערכת סיכוני ביטחון ביולוגי צריכה להתבצע כדי לוודא ששום אורגניזמים שעלולים להיות פתוגניים נמצאים במי המקור. הערה: ניתוח כזה יכול להתבצעבכל מעבדת בדיקה מוסמכת מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מינון המים כלי התרבות במלח אקווריום להגיע מליחות של 15 גר &#39;/ ל&#39;. הגדר את זרימת האוויר לתוך הכלי, כך שהוא שומר על &quot;רתיחה מתגלגלת&quot;, ולאחר מכן להוסיף לאט כמות המדודה של מלח לכלי התרבות עד שהוא נמס לגמרי על ידי האוורור. המשך aerating מים ל&gt; 1 שעה כדי לוודא שהוא הוא מחומצן באופן מלא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך את התערובת להאכיל אצות. עד 3 ליטר נקי, dechlorinated מים מתוקים (0 ppm) להוסיף של NaHCO 3 100 גרם ושל מנטרל אמוניה (hydroxymethylsulfonate נתרן) 100 גרם. מגיב אחרון זה מספק את היתרון נוסף של נטרול כל כלור שיורי משאריות מים ברז או אקונומיקה מהחיטוי של ציוד התרבות. זה קריטי כדי להבטיח כי תרכובות אלה להמסה מלאה. ואז להוסיף 1 ליטר של תרכיז אצות (משקל יבש ביומסה ~ 15%). מוסיף את תערובת המזון לFR ולאחסן ב 4 מעלות צלזיוס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף תרבות המתנע של 5-10,000,000 <eמ &#39;&gt; rotifers plicatilis Brachionus לקורות החיים המכילים מים מליחות סודה 15 גר&#39; / ל &#39;. אם rotifers כבר מקורר במהלך משלוח או אחסון, הם צריכים להיות בהדרגה (במהלך 30 דקות או יותר) התאקלמו לטמפרטורה של המים בכלי התרבות (25 - C ° 27). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל PMT ולהתחיל שאיבה להאכיל אצות לתוך כלי תרבות rotifer. באמצעות תכונת טיימר של PMT, להגדיר את קצב האספקה ​​של תערובת מזון לאצות כדי ש~ 1.6 מיליליטר של תערובת להאכיל אצות מועבר למיליון rotifers בתרבות, בכל יום. להפיץ את ההאכלות במנות קטנות במרווחי זמן קבועים במהלך תקופה של 24 שעות; תכוף יותר ההאכלות, טוב יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כייל את שיעור המסירה של המשאבה ידנית על ידי סיבוב על PMT לתקופה קצובה (למשל, 1 דקות) ולאסוף את האצות שמשאבות בפרק זמן זה לגליל או כוס סיים. לדוגמא, אם במינוני PMT 5 מיליליטר של אצות בדקות 1, ולאחר מכן את שיעור המינון יהיה5 מיליליטר אצות / דקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את שיעור ההאכלה היומי הנדרש על ידי הכפלת מספר rotifers הנוכחי, במיליון, ב- 1.6 מיליליטר. לדוגמא, תרבות rotifer עם גודל אוכלוסייה של 100 מיליון rotifers תדרוש ~ 160 מיליליטר של מזון ליום (100 x 1.6 מיליליטר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את PMT למינון דרישת עדכונים היומי הכוללת במרווחים קבועים לאורך תקופה של 24 שעות. לדוגמא, אספקה ​​של כמות מזון יומית כוללת של 160 מיליליטר יכולה להיות מועברת במנות פעם אחת כל 3 שעות במשך 24 שעות באמצעות סט PMT עם שיעור משאבת מינון של 5 מיליליטר / דקה במשך 4 דקות, 8 פעמים ביום (5 מיליליטר / דקה x 4 דקות = 20 מיליליטר x 8 האכלות = 160 מיליליטר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר לתרבות לגדול עד שהוא מייצר אוכלוסייה הנדרשת, בדרך כלל עבור 48-72 שעות, לפני הקציר. ב 24 שעות שלאחר להתחיל, להוסיף מסנני חלקיקי חוט לכלי התרבות ולהתחיל תחזוקה רגילה. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תַחזוּקָה הערה: התרבות פועלת באופן רציף ודורשת routinתחזוקת דואר שבאופן אידיאלי צריכה להתבצע באותו הזמן בכל יום, ברצף הבא. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מלא את FCV 90% מנפח זמין עם נקי, dechlorinated מים מתוקים, במינון עם מלחי אקווריום L / 10 גרם. ודא שהמים הוא גם מעורבים, וכי כל מלח מתמוסס באופן מלא. הגדר את זרימת האוויר לתוך הכלי, כך שהוא שומר על &quot;רתיחה מתגלגלת&quot;. מדוד את המליחות עם refractometer ולהבטיח שהמליחות היא 10 גר &#39;/ L. זה קריטי כדי לעמוד ביעד זה ושלא יעלה על זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לדוגמא rotifers בקורות החיים: ודא שהתרבות היא מעורבת היטב, לאחר מכן לאסוף 3 דגימות של 2 - 3 מיליליטר כל אחד באמצעות פיפטה העברה או autopipettor, מחלקים שונים של התרבות. לשלב דגימות אלה בצינור או בקבוקון של גודל נוח (למשל, 10 מיליליטר). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת 1 - 2 מיליליטר של המדגם המשולב על צלחת פטרי, כדי שניתן דמיינה אותו תחת מיקרוסקופ לנתח. בדוק את האיכות של התרבות (שחייה התנהגות שלrotifers, נוכחות של ביצים מנותקות, פרוטוזואה זיהום). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשתק את rotifers במדגם בשילוב שנותר על ידי הוספה של 50% תמיסת יוד Lugols 100 μl למדגם. בתוך שניות לאחר תוספת של Lugols, להתבונן rotifers להפסיק חייה. עכשיו, בקלות לספור את rotifers. הערה: אתנול, אקונומיקה מדוללת, או חומץ יכולה לשמש במקום של Lugols. חומץ (2 טיפות / 10 מיליליטר) יש את היתרונות של להיות לא מסוכן, לא לאבד את הכוח באחסון כפתרונות אקונומיקה ויוד יכול, ולא מה שהופך את חוזה rotifers, כך העטרה של cilia ו&quot; הרגל &quot;יישארו מורחבת ו בעלי חיים נראים טבעיים יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא שהמדגם הוא גם מעורב (rotifers המשותק יישב במהירות), ואז לקחת במהירות subsample מיליליטר ~ 2 בpipet פלסטיק ולוותר 1 מיליליטר לשקופית לספור Sedgewick-Rafter (20 x 50 ריבועים 1 מ&quot;מ) (איור 2 ). באמצעות מיקרוסקופ לנתח או תרכובת, לספור את rotifers שלם ולאמספר otal של ביצים המצורפות לrotifers אלה (איור 2). ספירה כמה שיותר משטח השקופית כצורך לספור ~ 100 rotifers. לחשב את מספר rotifers לכל מיליליטר, ולהקליט את זה בגיליון אלקטרוני או יומן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קציר ~ 30% מהיקף rotifers בקורות החיים: הסירו את אספקת האוויר ומסנן חוט, לפתוח לאט את השסתום בחלק התחתון של קורות החיים ולאפשר למים לזרום לאספן פלנקטון עם מסך רשת 53 מיקרומטר. לאסוף את המים זורמים החוצה של החלק התחתון של האספן לאחר הסינון לדלי או ניקוז. השתמש בעדין לזרימה מתונה כדי למנוע נזק לrotifers. אל תאפשר rotifers לייבוש על המסך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מסיבות עקביות, רצוי להקים FCV עם מספר סטנדרטי של rotifers בכל יום. לכן, בהתבסס על הצפיפות הידועה rotifer קורות חיים וקציר הנפח, להתאים כולל FCV הנפח להשיג צפיפות סופית עולה בקנה אחד (למשל., 1500 rotifers מיליליטר /). הוסף את רוטי נקטףfers לFCV: בעדינות להעביר את rotifers מהמסך הגבייה באמצעות בקבוק לשטוף מלאים במים נקיים מלח (10 - L / 15 גר &#39;). הפוך את המסך מעל FCV ולשטוף את rotifers לFCV עם זרם עדין של מים מלוחים. התחל PMT כדי לספק מזון (~ 1.57 מיליליטר למיליון rotifers ליום) לFCV. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשפשף את כל החלק הפנימי של קורות החיים עם, מברשת נקייה רכה ניילון או כרית קרצוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפוך תערובת חדשה של מים / L 15 גרם על ידי הוספת הכמות המתאימה של מלח לכמות מדודה של מי RO נקיים בדלי 5 ליטר להחליף את נפח מים איבד למסוק. מוסיף את המלח למים בדלי ומערבבים נמרצות עד שהוא נמס לגמרי, ולאחר מכן להוסיף לקורות החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בתרסיס בלחץ גבוה בכיור, לשטוף את מסנן החוט עד שהוא נקי מפסולת, ולאחר מכן להחזיר אותו לקורות החיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם שיעורי הזנה של אצות נמסרו לקורות החיים על ידי שינוי משך הזמן של כל אירוע מינון, על פי הספירה היומית של rotifers מיליליטר /.השתמש בחישובים הניתנים בשלב 1.3.8, לעיל כדי לקבוע את הכמות המתאימה של מזון כדי להיות מועברת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כ 24 שעות מאוחר יותר, לחזור על התהליך. התחל על ידי קצירת rotifers שנותר בFCV (שלא היה זקוק ליום הקודם) באותו אופן כפי שתוארו לעיל (שלבים 1.4.2 - 1.4.10). לרכז אותם ב 2 ליטר של מים טריים, נקיים dechlorinated (מלח L / 5 ז). אלה יכולים להיות מאוחסן על 4 מעלות צלזיוס כפי שאספקת גיבוי, או נהגו להאכיל שלבים מאוחר יותר של דגים, מעבר למה שמתואר בפרוטוקול זה. הערה: פרוטוקול זה מאפשר עד 2 - 3 ימים של תחזוקה מופחתת תרבות (עם הזנה אוטומטית רגילה), כי rotifers בקורות החיים יכול לסבול מחדל של יבולים ללא השלכות חמורות. </li></ol></li></ol> 2. פוליקולטורה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להכין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאסוף עוברי דג הזברה מאירוע השרצה על ידי שפיכת עוברים הולידו דרך תה מסננת ולאחר מכן בעדינות שטיפה עם FIS סטריליהמים h (או כל מקור אחר שאינם מזוהם של פתרון מותנה כראוי; למשל, בינוני עובר, E3, וכו &#39;) מבקבוק לשטוף לתוך צלחות פטרי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה עובר ב25 - 28 מעלות צלזיוס בצלחות פטרי בצפיפות של 40 - 50 עובר לכל צלחת במשך 5 ימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תתחיל את שלב פוליקולטורה ביום 5 לאחר הפריה, או כאשר יותר מ -90% מהזחלים שבקעו באופן פעיל בחייה בעמודת המים. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הַרכָּבָה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 500 מיליליטר של תרבות rotifer ישירות מFCV לטנק משתלת 3.5 L; הכללה של מים תרבות rotifer מספקת הזנה של אצות ששומרת על הערך התזונתי של rotifers במהלך פוליקולטורה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות לשפוך את הזחלים מצלחת פטרי אחת לתוך טנק חדר הילדים. ודא שאין זחלים יישארו בצלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 500 מיליליטר של מים נקיים, ממוזגים דגים ממערכת הסירקולציה המחודשת או מקור מים ייעודי לטנק להגיע נפח סופי של 1 ליטר ושל אחרוןalinity של 5 גר &#39;/ ל&#39;. הערה: מליחות זה קריטי כי הישרדות זחלי דג הזברה תושפע לרעה אם המליחות היא&gt; 7 גרם / L והישרדות rotifer יושפע לרעה אם מליחות &lt;2 g / L. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שלב פוליקולטורה הערה: שלב פוליקולטורה צריך להימשך עד 4 ימים לאחר חיסון (כולל של 5 ימים, מתאים לימים 5-9 לאחר הפריה). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים לב למכל פוליקולטורה לפחות פעם ביום בתקופה זו על מנת להבטיח שrotifers ודגים נמצאים וגדל. ודא שrotifers גלוי לאורך כל עמודת המים. ודא שfishs הם גם נראים בתוך עמודת המים, שחיה בין rotifers. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התחל זרימת מים רגילה באמצעות הטנק. הנח מסך או לבלבל מעל נמל הניקוז כדי להבטיח זחלים שאינם סמוקים מהטנק. הערה: בסופו של שלב זה, הדגים יהיו גדולים מספיק כדי לצרוך פריטי טרף גדולים יותר כגון הארטמיהפריטי מזון Nauplii או מעובד בטווח הגודל של 75-125 מיקרומטר. הערה: דינמיקת אוכלוסיית rotifer בתוך טנק פוליקולטורה נציג נמדדה על ידי דגימה / ספירת rotifers מהמכל באותו אופן כפי שתואר בצעדים 1.4.2 - 1.4.5. זה נעשה פעם אחת בכל יום מההתחלה של שלב פוליקולטורה עד שהושלם. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Ribas, L., Piferrer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+%28Danio+rerio%29+as+a+model+organism%2C+with+emphasis+on+applications+for+finfish+aquaculture+research%5BTitle%5D)+AND+%22Reviews+in+Aquaculture%22%5BJournal%5D)">The zebrafish (Danio rerio) as a model organism, with emphasis on applications for finfish aquaculture research.</a> Reviews in Aquaculture. 6, 209-240 (2014).</li>
<li>Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+understanding+tissue+regenerative+capacity+and+mechanisms+in+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+reviews.+Genetics%22%5BJournal%5D)">Advances in understanding tissue regenerative capacity and mechanisms in animals.</a> Nature reviews. Genetics. 11, 710-722 (2010).</li>
<li>Gemberling, M., Bailey, T. J., Hyde, D. R., Poss, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+as+a+model+for+complex+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+genetics+TIG%22%5BJournal%5D)">The zebrafish as a model for complex tissue regeneration.</a> Trends in genetics TIG. 29, 611-620 (2013).</li>
<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hooked%21+modeling+human+disease+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Hooked! modeling human disease in zebrafish.</a> Journal of Clinical Investigation. 122, 2337-2343 (2012).</li>
<li>Selderslaghs, I. W. T., Blust, R., Witters, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feasibility+study+of+the+zebrafish+assay+as+an+alternative+method+to+screen+for+developmental+toxicity+and+embryotoxicity+using+a+training+set+of+27+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Feasibility study of the zebrafish assay as an alternative method to screen for developmental toxicity and embryotoxicity using a training set of 27 compounds.</a> Reproductive Toxicology. 33 (2), 142-154 (2012).</li>
<li>Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+husbandry+of+zebrafish+%28Danio+rerio%29%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Aquaculture%22%5BJournal%5D)">The husbandry of zebrafish (Danio rerio): A review.</a> Aquaculture. 269, 1-20 (2007).</li>
<li>Harper, C., Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHarper%2C+C+%22The+Laboratory+Zebrafish+%28Laboratory+Animal+Pocket+Reference%29%22">The Laboratory Zebrafish (Laboratory Animal Pocket Reference)</a>. , CRC Press. (2010).</li>
<li>Nusslein-Volhard, C., Dahm, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNusslein-Volhard%2C+C+%22Zebrafish%2C+A+Practical+Approach%22">Zebrafish, A Practical Approach</a>. , Oxford University Press. (2002).</li>
<li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWesterfield%2C+M+%22The+Zebrafish+Book.+A+Guide+for+the+Laboratory+Use+of+Zebrafish%22">The Zebrafish Book. A Guide for the Laboratory Use of Zebrafish</a>. , University of Oregon Press. (2007).</li>
<li>Carvalho, P., Arau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rearing+zebrafish+%28Danio+rerio%29+larvae+without+live+food%3A+evaluation+of+a+commercial%2C+a+practical+and+a+purified+starter+diet+on+larval+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Aquaculture+Research%22%5BJournal%5D)">Rearing zebrafish (Danio rerio) larvae without live food: evaluation of a commercial, a practical and a purified starter diet on larval performance.</a> Aquaculture Research. 37, 1107-1111 (2006).</li>
<li>Spence, R., Gerlach, G., Lawrence, C., Smith, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+behaviour+and+ecology+of+the+zebrafish%2C+Danio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Rev+Camb+Philos+Soc%22%5BJournal%5D)">The behaviour and ecology of the zebrafish, Danio rerio.</a> Biol Rev Camb Philos Soc. 83 (1), 13-34 (2008).</li>
<li>Best, J., Adatto, I., Cockington, J., James, A., Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+rearing+first-feeding+larval+zebrafish%3A+polyculture+with+Type+L+saltwater+rotifers+%28Brachionus+plicatilis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">A novel method for rearing first-feeding larval zebrafish: polyculture with Type L saltwater rotifers (Brachionus plicatilis).</a> Zebrafish. 7 (3), 289-295 (2010).</li>
<li>Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+zebrafish+husbandry+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Advances in zebrafish husbandry and management.</a> Methods in Cell Biology. 104, 429-451 (2011).</li>
<li>Lawrence, C., Sanders, E., Henry, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+culturing+saltwater+rotifers+%28Brachionus+plicatilis%29+for+rearing+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">Methods for culturing saltwater rotifers (Brachionus plicatilis) for rearing larval zebrafish.</a> Zebrafish. 9, 140-146 (2012).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Biology+and+Culture+of+Channel+Catfish%22">Biology and Culture of Channel Catfish</a>. Tucker, C. S., Hargreaves, J. A. 34, 634-657 (2004).</li>
</ol>

EC הנרי מועסק על ידי ריד חקלאות ימית, Inc, חברה המספקת rotifers, תרכיזי אצות, ומצרכים אחרים לשווקי תחביבים החקלאות הימית ודגים.

יישום מוצלח של שיטת פוליקולטורה rotifer האכלה דג הזברה זחל מוקדם דורש פרוטוקולים יעילים לשתי משימות: ההקמה ותחזוקה של מערכת תרבות rotifer רציפה כדי להאכיל את הדגים, וculturing הראשון-האכלת זחלי דג הזברה יחד עם rotifers באותו הטנק. ההתקנה למערכת ייצור rotifer המים המלוחים רציפה למעבדות דג הזברה תוארו לראשונה על ידי לורנס ומחברים 14 שונתה ומשופר במספר הדרכים לעשות את זה יותר חזק ואוניברסלי הן ביישום. הפר...

דג הזברה (Danio rerio) היא בחיות מעבדה מראש יחסני מנוצלות במספר הולך וגדל של דיסציפלינות מדעיות, כולל אך לא מוגבל לגנטיקה התפתחותית, טוקסיקולוגיה, התנהגות, חקלאות ימית, ביולוגיה משובי, והמודלים של הפרעות אנושיות רבות 1 - 5. למרות שהמין הוא קל יחסית כדי לשמור על במעבדה, יש מספר אתגרי ניהול המזוהים עם תרבותם 6. הבולט ביותר הוא גידול זחל, במיוחד כאשר הדגים יתחילו ראשון להאכיל לאחר האינפלציה שלפוחית ​​גז 7. בתנאים רגילים, בשליטה, אירוע התפתחותי זה מתרחש ב ~ 5 ימים לאחר הפריה (DPF), עם 3 הבאים - 5 הימים של צמיחה להיות 7 קריטיים במיוחד. הקושי הטכני המרכזי בשלב זה הוא לענות כראוי את הדרישות התזונתיות של זחלי ההאכלה הראשונים - פריטי מזון חייבים להיות בגודל מתאים, digestible, אטרקטיבי, וזמין על בסיס כמעט רציף, ללא יצירת פסולת מוגזמת בטנקי culturing. מבחינה הסטורית זו הושגה בדרך כלל על ידי מתן כמויות קטנות של מזון רבות לדגים בטנקים, יחד עם 8,9 תחלופת מים שיגרתי. בעוד שיטות אלה הן במידה מסוימת מוצלחות, הם לא יעילים, דורשים תשומות עבודה גבוהות, ולחזור רק משתנה ושיעורים מוגבלים של צמיחה והישרדות 10. בטבע, זחלי דג הזברה ככל הנראה להאכיל בהווה זואופלנקטון קטן בשפע בעמודת המים 11. מסיבה זו, פרוטוקולי larviculture שלשלב הזנות חיות כגון הסנדלית, rotifers, והארטמיה הם בדרך כלל יעילים ביותר 7. בשנת 2010, בסט והמחברים הוכיחו שזה אפשרי לגדל דג הזברה זחל במי סטטי, מליחים יחד עם rotifers המים המלוחים במשך 5 הימים הראשונים של האכלת אקסוגני 12. גישה זו, הרותמת אתes הפרודוקטיביות הגבוהה הטבעית של תרבויות rotifer לספק טרף בשפע, ערך תזונתי גבוהה מבלי לזהם את המים, תשואות שיעורים גבוהים מאוד של צמיחת זחל והישרדות עם תשומת עבודה נמוכה 12,13. בשנים האחרונות, מספר גדל והולך של מעבדות ברחבי העולם אימץ וריאציות של פרוטוקול זה, ורבים מהם עכשיו culturing rotifers באופן רציף לתמיכה במערכות משתלת 14. בשנים האחרונות, שיטות לשני rotifer / פוליקולטורה דג הזברה וייצור rotifer כבר מעודנת והשתפרו להיות יותר סטנדרטי וניתן להרחבה בקלות. מאמר זה מספק הוראות צעד-אחר-צעד ל1) ייצור rotifer רציף וחזק ו 2) הקמת rotifer / מערכת פוליקולטורה דג הזברה משמשת לתמיכה בצמיחה חזקה של דגים במשך 5 הימים הראשונים של האכלת אקסוגני.

<table><tbody><tr><td>Rotifer Culture Infrastructure</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>100 L Culture-Vessel</td><td>Aquaneering</td> כלי תרבית <td>פוליקרבונט מותאם אישית</td><td>, תחתית חרוטית, עם שסתום ניקוז</td></tr><tr><td>5 ליטר ערכת דלי תרבות</td><td>Reed Mariculture</td><td>CCS Starter Kit</td> כלי <td>תרבית בנפח קטן למתקנים קטנים</td></tr><tr><td>צינורות שקופים קשיחים 1/2 אינץ' OD, 36 אינץ'</td><td>Pentair Aquatic Ecosystems</td><td>16025</td><td>צינורות שקופים קשיחים לאספקת אוויר</td></tr><tr><td>צינור רשת</td><td>Pentair Aquatic Ecosystems</td><td>RT444X</td><td>תמיכת צינור רשת למסנן חוט</td></tr><tr><td>דנטלי חוט דנטלי</td><td>חוט דנטלי חקלאות ימית</td><td>חוט דנטלי 12 אינץ' x 42 אינץ'</td><td>מלכודת פסולת חלקיקים</td></tr><tr><td>משאבת טיימר מדידה פריסטלטית, 5 GPD</td><td>Grainger</td><td>38M003&nbsp;</td><td>משאבת מדידה עם טיימר למינון הזנה לרוטיפרים</td></tr><tr><td>משאבת טיימר מדידה פריסטלטית, 1-100 מ"ל לשעה (לתרבית בקנה מידה קטן יותר)</td> <td>Coral Vue</td><td>מק"ט: IC-LQD-DSR</td><td>משאבת מדידה עם טיימר למינון הזנה לרוטיפרים</td></tr><tr><td>צינורות סיליקון&nbsp;</td><td>צינורות Cole Parmer</td><td></td><td>לאספקת אצות לכלי הרוטיפר</td></tr><tr><td>צינורות שקופים קשיחים "OD, 36"</td><td>Pentair Aquatic Ecosystems</td><td>16025</td><td>צינורות שקופים קשיחים לאספקת אוויר למשחת אצות</td></tr><tr><td>צינורות שקופים קשיחים OD, 36 אינץ'</td><td>Pentair Aquatic Ecosystems</td><td>16025</td><td>צינורות שקופים קשיחים לאספקת אצות</td></tr><tr><td>Rotifers</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Live Rotifers Brachionus plicatilis Type L</td><td>Reed Mariculture</td><td>Type L 5 מיליון</td><td>תרבית מלאי רוטיפר להפעלה של המערכת</td></tr><tr><td>Rotifer Feed</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>נתרן הידרוקסימתיל-סולפונאט</td><td>חקלאות ימית בקנים</td><td>ClorAm-X&reg; 1lb אמבטיה</td><td>מפחית אמוניה לתערובת הזנת אצות</td></tr><tr><td>נתרן ביקרבונט</td><td>פישר S25533B מדעי</td><td></td><td>pH מאגר לתערובת הזנת אצות</td></tr><tr><td>תרכיז מיקרו אצות</td><td>Reed Mariculture</td><td>Rotigrow Plus&reg; שקית 1 ליטר</td><td>הזנת רוטיפר אופטימלית מבחינה תזונתית</td></tr><tr><td>RG Complete</td><td>Reed Mariculture</td><td>RG בקבוק שלם של 6 אונקיות</td><td>הכל בהזנה אחת מבוססת מיקרו-אצות לתרביות בקנה מידה קטן</td></tr><tr><td>הכנת מים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; גבישי שונית מלח שונית</td><td>שדגים מניחים</td><td>198210</td><td>מלח להכנת מי תרבות (הערה: פריט זה הוא דוגמה בלבד; ניתן להשתמש בכל פורמולציות מלח ללא מזהמים).&nbsp;</td></tr><tr><td>רפרקטומטר</td><td>Pentair Aquatic Ecosystems</td><td>SR6</td><td>מדידת מליחות</td></tr><tr><td>ציוד לתרבית רוטיפר</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>אספני פלנקטון 12 אינץ' קוטר, 53 מיקרון</td><td>Pentair Aquatic Ecosystems</td><td>BBPC20</td><td>מסך רשת לאיסוף רוטיפרים</td></tr><tr><td>רפידות קרצוף</td><td>Pentair Aquatic Ecosystems</td><td>SCR-58</td><td>כרית קרצוף לניקוי פנים של כלי גידול</td></tr><tr><td>מברשת</td><td></td><td></td><td></td>קרצוף</tr><tr><td>דלי</td><td>Grainger Supply&nbsp;</td><td>43Y530</td><td>דלי מדורג לערבוב תרבית מים</td></tr><tr><td>צנצנת בקיעה</td><td>Pentair מערכות אקולוגיות מימיות</td><td>J30</td><td>אחסון תערובת הזנת אצות</td></tr><tr><td>Lugol' s פתרון, דילול</td><td>פישר מדעי</td><td>S99481</td><td>סוכן המשמש לשיתוק רוטיפרים חיים לספירת</td></tr><tr><td>שקופית ספירת פלנקטון Sedgewick-Rafter עם רשת&nbsp;</td><td>Pentair Aquatic Eco-Systems</td><td>M415</td><td>ספירת רוטיפרים</td></tr><tr><td>שונות</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מסננת תה</td><td>Kitchenworks</td><td>971972</td><td>משמש לאיסוף עוברי דג הזברה לאחר ההטלה</td></tr></tbody></table>

&quot;פוליקולטורה שיטת rotifer&quot; השלמה ומעודכנת לדג הזברה האכלת לתי-פוסקת הראשונה

The Complete and Updated "Rotifer Polyculture Method" for Rearing First Feeding Zebrafish

דג הזברה (Danio rerio) הוא אורגניזם מודל בעל חשיבות הולכת וגוברת בתחומי מדע רבים. אחד ההיבטים הטכניים התובעניים ביותר של גידול מין זה במעבדה הוא גידול זחלים הניזונים ראשונים לשלב הצעיר עם שיעורי גדילה והישרדות גבוהים. האתגר הניהולי המרכזי של תקופת התפתחות זו סובב סביב אספקת פריטי מזון מזינים ביותר לדגים על בסיס כמעט רציף מבלי לפגוע באיכות המים. מכיוון שדגי זברה זחלים מותאמים היטב להאכיל זואופלנקטון קטנים בעמוד המים, פריטי טרף חיים כגון רוטיפרים ברכיונידים, ארטמיה ופרמציום מוכרים באופן נרחב כמזון המועדף, לפחות עד שהדגים מגיעים לשלב הצעיר ומסוגלים להאכיל ביעילות מתזונה מעובדת. פרוטוקול זה מתאר שיטה שבה זחלי דג זברה שזה עתה בקעו מגודלים יחד עם רוטיפרים חיים של מים מלוחים (Brachionus plicatilis) באותה מערכת. גישה רב-חקלאית זו מספקת לדגים מקור מזון חי "לפי דרישה" ועשיר בחומרים מזינים מבלי לייצר פסולת כימית ברמות שאחרת היו מגבילות את הביצועים. חשוב לציין, מכיוון שהמערכת רותמת הן את הפרודוקטיביות הגבוהה הטבעית של הרוטיפרים והן את ההעדפות ההתנהגותיות של הדגים, העבודה הכרוכה בתחזוקה נמוכה. הפרוטוקול הבא מפרט נוהל מעודכן, שלב אחר שלב, המשלב ייצור רוטיפרים (ניתן להרחבה לכל רמה רצויה) לשימוש בריבוי תרבות של זחלי דג זברה ורוטיפרים המקדם ביצועים מקסימליים במהלך 5 הימים הראשונים של האכלה אקסוגנית.

מערכת תרבות rotifer רציפה המתוארת כאן היא דינמית, וזה נורמלי למספרי rotifer להשתנות במידה מועטת לאורך זמן אם יש וריאציות בשיעורי האכלה וקציר יומיים. האוכלוסייה של rotifers באחת התרבויות הפעילה במתקני החקלאות הימית בבית החולים לילדים בבוסטון, נשמר באופן מתואר לעיל, היה במעקב במשך 30 ימים (איור 3). הצפיפות הממוצעת התרבות בתקופה זו הייתה 932 rotifers / מ&quot;ל, עם מקסימום של 1,330 מיליליטר / rotifers ומינימום של 510 מיליליטר / rotife...

דגי זברה מותאמים להאכיל זואופלנקטון. אפשר לנצל את התכונה הטבעית הזו במעבדה על ידי גידול דגים האכלה ראשונה יחד באותה מערכת עם רוטיפרים חיים של מים מלוחים. אסטרטגיית "רב-תרבות" זו מקדמת צמיחה והישרדות גבוהות עם מינימום עבודה והפרעה לזחלים.

&quot;פוליקולטורה שיטת Rotifer&quot; השלמה ומעודכנת לדג הזברה האכלת לתי-פוסקת הראשונה

The zebrafish (Danio rerio) is a model organism of increasing importance in many fields of science.  One of the most demanding technical aspects of ...

המטרה הכוללת של שיטת הפוליקולטורה של רוטיפר היא לרתום את הפרודוקטיביות הטבעית והמאפיינים הביולוגיים של רוטיפרים של מים מלוחים כדי ליצור סביבה המקדמת צמיחה מהירה, והישרדות מקסימלית של דג זברה הזחל הראשון. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מפחיתה באופן דרמטי את כמות הזמן והמרחב הנדרשים כדי לגדל בהצלחה מספר גדול של זחלי דג זברה לשימוש בניסויי מחקר. התחל בתחזוקת תרבית הרוטיפר על ידי מילוי כלי התרבות להזנה, או FCV, לקיבולת של 90 אחוז במים מתוקים נקיים ונטולי כלור במינון של 10 גרם לליטר מלחי אקווריום.ודא שהמים מעורבבים היטב ושכל המלח מומס במלואו. לאחר מכן, הגדר את זרימת האוויר לתוך הכלי כך שישמור על רתיחה מתגלגלת. מדוד את מליחות הנוזל בעזרת רפרקטומטר.לאחר מכן, דגמו את הרוטיפרים בכלי התרבות, או CV.וודאו שהתרבות מעורבבת היטב. לאחר מכן, אספו שלוש דגימות של שניים עד שלושה מיליליטר באמצעות פיפטת העברה מחלקים שונים של התרבית ושלבו את הדגימות בשפופרת. מעבירים מיליליטר אחד עד שניים מהדגימה המשולבת לצלחת פטרי.דמיין את הדגימה תחת מיקרוסקופ מנתח, ובדוק את איכות התרבית. הוסף לדגימה 100 מיקרוליטר של 50 אחוז תמיסת יוד של לוגול כדי לשתק את הרוטיפרים ולספור אותם. קח מיד תת-דגימה של שני מיליליטר עם פיפטה מפלסטיק והוציא מיליליטר אחד לשקופית ספירה של Sedgewick Rafter.בעזרת מיקרוסקופ הניתוח, ספרו כמה שיותר משטח ההחלקה הדרוש כדי לספור עד 100 רוטיפרים שלמים ואת המספר הכולל של הביצים המחוברות לרוטיפרים. לאחר מכן, חשב את מספר הרוטיפרים למיליליטר לשימוש מאוחר יותר. התחל את הקציר על ידי הסרת אספקת האוויר ומסנן החוט הדנטלי.פתח לאט את השסתום בתחתית קורות החיים ואפשר למים לזרום בעדינות לתוך אספן פלנקטון עם רשת 53 מיקרון. אוספים את המים הזורמים מתחתית הקולט לאחר סינון לדלי או ניקוז. לאחר מכן, מלאו בקבוק ב -10 עד 15 גרם לליטר מי מלח נקיים.הפוך את המסך מעל ה-FCV ושטוף את הרוטיפרים לתוך ה-FCV בזרם עדין של מי מלח. הפעל את טיימר המדידה הניתן לתכנות או PMT כדי לספק הזנה ל-FCV. לאחר מכן, שפשפו את כל החלק הפנימי של קורות החיים עם כרית קרצוף נקייה.צור תערובת חדשה של 15 גרם לליטר בדלי של חמישה ליטר כדי להחליף את נפח המים שאבד לקציר. מערבבים את התמיסה במרץ עד להמסה מלאה של התערובת. לאחר מכן, הוסף את התמיסה ל-CV.לאחר מכן, שטפו את מסנן החוט הדנטלי בתרסיס בלחץ גבוה.כאשר מסנן החוט הדנטלי נקי מפסולת, החזר אותו ל-CV.התאם את קצב ההזנה של אצות המועברות ל-CV על ידי שינוי משך כל אירוע מינון. לאחר 24 שעות, חזור על התהליך, והחל את קציר הרוטיפרים שנותרו ב- FCV. רכזו את הרוטיפרים בשני ליטר מים טריים, נקיים ונטולי כלור עם חמישה גרם לליטר מלח.ניתן לאחסן אותם בארבע מעלות צלזיוס כאספקת גיבוי, או להשתמש בהם להאכלת דגים בשלבים מאוחרים יותר מעבר למה שמתואר בפרוטוקול זה. אסוף עוברי דג זברה מאירוע הטלה על ידי שפיכת עוברים שהושרצו דרך מסננת תה. ואז, שטיפה עדינה במי דגים סטריליים מבקבוק כביסה לתוך צלחות פטרי.לאחר איסוף כל העוברים, דגרו עליהם. התחל את שלב הפוליקולטורה כאשר יותר מ-90 אחוז מהזחלים שבקעו שוחים באופן פעיל בעמוד המים. הוסף 500 מיליליטר מתרבית הרוטיפר ישירות מה- FCV למיכל משתלה בנפח 3.5 ליטר.לאחר מכן, שפכו בעדינות את הזחלים מצלחת פטרי אחת למיכל המשתלה. ודא שלא יישארו זחלים בכלי. הוסף למיכל 500 מיליליטר מי דגים נקיים וממוזגים ממקור מים ייעודי לנפח סופי של ליטר אחד, ו-5 גרם לליטר מליחות סופית.התבונן במיכל הרב חקלאי לפחות פעם ביום כדי לוודא שהרוטיפרים והדגים נוכחים וגדלים. בדוק שהרוטיפרים נראים בכל עמוד המים. ודא שהדגים נראים גם בתוך עמוד המים ושהם שוחים בין הרוטיפרים.זה קריטי להעריך את המצב של כל מיכל על בסיס יומי כדי לוודא שהם חיים ושוחים עם רוטיפרים זמינים לכל זחלי הדגים. עם הבטחה שהרוטיפרים והדגים גדלים, התחל זרימת מים רגילה דרך המיכל. לבסוף, הנח מסך מעל פתח הניקוז כדי להבטיח שהזחלים לא יישטפו מהמיכל.הביצועים האופייניים של תרבית רוטיפר נוטרו במשך תקופה של 30 יום, והניבו צפיפות תרבית ממוצעת של 932 רוטיפרים למיליליטר. ומקסימום 1,330 רוטיפרים למיליליטר. לאוכלוסיית הרוטיפרים במיכל רב-תרבותי עם דג זברה יש צפיפות רוטיפרית ממוצעת של 589.4 רוטיפרים למיליליטר.הערך המינימלי של 481 רוטיפרים למיליליטר טוב פי 10 מעבודות שפורסמו בעבר. דג הזברה הראה צמיחה מתמדת בכל יום במהלך תקופה של חמשת הימים מאורך כולל ממוצע של 3.9 מילימטרים ל-5.4 מילימטרים. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לגדל רוטיפרים לשימוש במערכת רב-תרבותית שתוכננה כדי לענות על הדרישות התזונתיות של האכלה ראשונה של דג זברה.

the-complete-updated-rotifer-polyculture-method-for-rearing-first

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

פרוטוקול זה מתאר תחזוקה וטיפול קבוע כדי לשמור על תנאים אופטימליים לגידול בעלי דג זברה. הסרטון מדגים את הפרוטוקול לתחזוקת מערכת, דיור רגיל, הזנה, רבייה, וגידול של זחלי דג זברה.

טיפול קבוע ותחזוקה של דג זברה (<em&gt; Danio rerio</em&gt;) מעבדה: מבוא

מתקן דג זברה המתאים לגידול ומחקר in vivo בנוי בצורה קלה ומשתלמת. התחזוקה מינימלית. מתקן זה אידיאלי למעורבות סטודנטים ולמחקר עצמאי.

הקמת מתקן דג הזברה בנייה קלה למשתלם ו

פיברוזיס מתמשך עם שקיעה של חלבוני מטריצה חוץ-תאיים מוגזמים מוביל לשחמת. שימוש לרעה באלכוהול הוא אחד הגורמים העיקריים למחלת כבד קשה. הקמנו מודל כבד פיברוטי המושרה על ידי אתנול כדי לחקור את המנגנונים והאסטרטגיות לקידום התחדשות הפטוציטים בעת פציעה הנגרמת על ידי אלכוהול.

פיתוח מודל כבד אתנול-induced fibrotic דג הזברה ללמוד ובתאים בתיווך תא התחדשות Hepatocyte

דג זברה שימשו לאחרונה מערכת מודל ויוו ללמוד תזמון שכפול ה-DNA במהלך הפיתוח. . זה מפורט הפרוטוקולים עבור שימוש דג זברה העוברים של פרופיל שכפול תזמון. פרוטוקול זה ניתן להתאים בקלות ללמוד שכפול תזמון מוטציות, סוגי תאים בודדים, מודלים המחלה ו מינים אחרים.

פרופיל תזמון שכפול ה-DNA באמצעות דג זברה כמערכת מודל In Vivo

אנו מציגים פרוטוקול יעיל, קל לשימוש עבור הכנת תרביות תאים הראשי של דג זברה העוברים על תרביות תאים, תא חי הדמיה, כמו גם פרוטוקול להכין ראשי תאים מהמוח דג זברה למבוגרים.

תרבות, תרביות תאים תאים ראשי דג זברה

המטרה של פרוטוקול זה היא למדוד את זמן העברה של fluorescently עם תוויות מזון דרך המעי של הזחל דג זברה אופנה תפוקה גבוהה.

מדידת תפוקה גבוהה הבטן מעבר הזמן באמצעות זחל דג זברה

עבודה זו מתארת פרוטוקול למערכת טרנסגנזה מודולרית Tol2, שיטת שיבוט מבוססת שער ליצירה והזרקה של מבנים טרנסגניים לעוברים של דגי זברה.

מערכת Tol2 של דג הזברה: גישת טרנסגנזה מודולרית וגמישה מבוססת שער

פרוטוקול זה מתאר את השלבים העיקריים להשגת עוברי דגים נטולי חיידקים (GF) ושמירה עליהם מהזחלים ועד לשלב הנעורים, כולל דגימה וגילוי מצבם הסטרילי. השימוש במודלים של GF עם זיהום חשוב להבנת תפקיד המיקרובים בבריאות המאכסן.

ייצור, תחזוקה וזיהוי של מודלים של דגי זברה נטולי חיידקים מזחלים ועד שלבים צעירים

כאן אנו מציגים פרוטוקול חדשני, קל לבנייה וזול למעגל מחזור של דגי זברה.

מערכת אחסון דגי זברה מחזורית מותאמת אישית

לומד את האירועים המוקדמים ביותר של התפתחות תא preneoplastic ואינטראקציה תא חיסון מולדת הוא מרכזי להבנה ולטיפול בסרטן. כאן אנו מתארים שיטה לגרום לתנאי תמורות תאי אפיתל והדמית החיה הבאה של אינטראקציה תא חיסון מולדת עם G12V HRAS לבטא בתאי עור בזחלי דג הזברה.

הדמיה חיה של אינטראקציות תא של מערכת חיסון המולדת וPreneoplastic שימוש מערכת ביטוי / כטב&quot;מ העין מתנהלת Gal4 בעור הזחל דג הזברה

למדו את שיטת הפוליקולטורה של רוטיפרים לגידול זיגוגי דג הזברה בגיל ההאכלה הראשונית. שיטה זו מגבירה את שיעורי ההישרדות והצמיחה תוך הפחתת משאבי הזמן והמקום הנדרשים למחקר.

"פוליקולטורה שיטת Rotifer" השלמה ומעודכנת לדג הזברה האכלת לתי-פוסקת הראשונה

גלה סרטונים נוספים