Name: Assay ההתנהגות כדי למדוד את התגובה של דג הזברה לשינויים לעוצמות אור (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-10-03T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: למדו את שיטת VMR למדידת התגובה החזותית-מוטורית של דגי זברה לשינויים בעוצמת האור. שיטה זו מאפשרת הערכת יכולות ראייה במוטנטים ותרומה להבנת מנגנוני הראייה בחולייתנים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לבריאות מענקים EY0081 ו 5T32UY07145 ועל ידי קרן האבירים הטמפלרים העין. ג&#39;ייסון Rihel הוא עמית Bristol-Squibb של מדעי החיים Research Foundation.

פרוטוקול זה מתאר את הצעדים כדי לבצע את תגובת חזותי מוטורי זחלים של דג הזברה כדי במרווחים ו decrements אור במעבדה שלך. דג הזברה הם מערכת מודל נהדר עבור מחקרים התנהגותיים. הם קל לשמור, הם גדלים המצמד גדולים, הם מתפתחים מהר. לדוגמה, עיניו של דג הזברה הזחלים מגיבים לאור יום 3 הפיתוח בו בזמן הם מפגינים תגובת בהלה. חלק 1: ציפוי דגים בודדים לתוך צלחת 96 היטב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגדל זחלים WT תחת מחזור אפל / אור 28 ° C עד הפריה ימים לפחות 4 פוסט (DPF). אור אופייני שלנו: כהה מחזור הוא 14 שעות של האורות החל מהשעה 09:00, ו - 10 שעות של האורות, החל בשעה 11:00. לקבלת התוצאות הטובות ביותר התנהגותיים, למנוע צפיפות, אנחנו בדרך כלל לשמור על לא יותר מ 50 זחלים בצלחת פטרי אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר DPF 4, דג הזברה מוכנים יועברו לתוך צלחת 96-היטב. כדי לתת יותר מקום הזחלים שחייה, אנו משתמשים בדרך כלל צלחת 96-היטב עם גודל היטב גדול של 650 μl, עם זאת, תקן 96, גם צלחות עובד בסדר גמור. שימוש pipet העברת פלסטיק, בעדינות העברה חד הזחל לכל טוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר העברת דגים לתוך בארות, למלא בכל טוב עם דגי מים מספיק כך את פני השטח מים לשטוף כמעט לחלק העליון של בארות. או שגדשו או underfilling היטב יכול לגרום לבעיות אופטי למצלמה ההקלטה. כמו כן, לדאוג לא להכניס בועות לתוך בארות. </li></ol> חלק 2: סקר של מנגנון הקלטה עבור חלק זה של הפרוטוקול, עיין הסרט כדי לזהות רכיבים היכרות עם סט שלנו את מנגנון ההקלטה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתוך חדר הקלטה הוא מקום מוגדר היטב למצב צלחת 96-היטב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המצלמה ממוקמת בגב מתמקדת הצלחת באמצעות מראות את הקופסה. הזווית של מראות אלה יכול להיות מותאם על ידי סיבוב הברגים שמחזיקים את המראות במקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החדר הקלטה מואר מלמטה על ידי נוריות אינפרא אדום. זה מאפשר את המצלמה כדי לראות את הדגים אפילו בחושך. הזחלים אינם יכולים לגלות אור אינפרא אדום, אז זה תאורה קבועה IR אינו משפיע על הניסוי. לבן נוריות גם להאיר את תא הקלטת מלמטה. הם נשלטים בנפרד את האורות IR. מאירים את החדר באור לבן מלמעלה או מן הצדדים בהחלט אפשרי, אולם במקרים אלה, יש להקפיד להימנע חזק נועץ את פני המים שעשויים להפריע המצלמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור ניסויים לאחרונה יותר כמה שעות, למלא את התא בעדינות עם מים זורמים כדי לעזור לשמור על טמפרטורה קבועה למשך תקופת הניסוי. אחת הדרכים להשיג זרם קבוע של מים כדי לשאוב מים ממאגר ידי משאבה באקווריום קטן מחוממת ° 28 עם חימום באקווריום טיפוסי מתחת למים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למזער רטט תועה מחדר, יחידת הקלטה כולו צריך לשבת על גבי שולחן איזון כבד. </li></ol> חלק 3: יישור הצלחת 96-היטב עם רשת המחשבים של מעקב וידאו תוכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את צלחת 96-היטב המכיל את הדגים לתוך תא ההקלטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעת השימוש באמבט מים, לאט לאט המקום הצלחת במים, נותן את מפלס המים הזדמנות להתאים מבלי לשפוך לצלחת. לחילופין, לכבות את זרימת המים, להוסיף את הצלחת, ולאחר מכן לחדש את הזרימה. כמו כן, הקפד להשתמש קפיץ או גומייה כדי להחזיק את הצלחת 96-היטב במקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתוכנה Videotrack Viewpoint, לבדוק כי כל הזחלים של הניסוי שלך נראים על מסך המחשב. שימוש בפקדים של התוכנה, ליישר את הרשת של תוכנות מעקב וידאו עם בארות של צלחת כזו דגים בתוך כל ריבוע של הרשת שלך. מחשב מעקב יהיה חישוב תנועה בנפרד לכל אחת הקופסאות האלה, אז אם אתם misalign רשת מחשב כמה תנועות דגים עלולים ללכת לאיבוד. או אפילו יותר גרוע: שני דגים סמוך יתפוס את השטח אותו להיות נחשב דג אחד. שלב זה חשוב מאוד עבור כל הקלטות שלך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר היישור, התוכנית עיתוי כאשר האורות צריך ללכת לסירוגין. אנחנו בדרך כלל מאפשרים 3 שעות של הסתגלות אור או חושך בתיבת הן להשיג רמת הפעילות הבסיסית, אלא גם לתת את הזחלים הזדמנות להירגע בעקבות pipetting והטיפול. אחרי ההתחלה, אנחנו חלופי אז עם 30 דקות של אורות ואחריו 30 דקות של האורות, וחזור מספר פעמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן, לסגור את הדלת של החדר הקלטה להתחיל בהקלטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בפועל, אנחנו מתעדים את הפעילות של כל דג לשנייה, אבל את התוכנה Viewpoint למעשה מתעדת את מסגרת מסגרת על ידי נתונים (עיין הסרטלהפגנה של איסוף הנתונים). קביעת ערך סף של שינוי פיקסל מינימום לכל מסגרת יהיה תלוי במידה מסוימת על המצלמה הספציפית שלך ואת ההתקנה קלה. עבור ההתקנה, אנו משתמשים בדרך כלל סף של 4 פיקסלים, כלומר, אם פחות מ 4 פיקסלים משתנים, זה נחשב רקע. אם יותר מ 4 פיקסלים זזים, זה מצביע על דג נע. אנחנו נקבע באופן אמפירי, כי הפסקת זה מזהה כמעט את כל הזחל לשחות ותנועות לפנות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למרות תיבות הקלטה לבודד את הזחלים די טוב, לכבות את האור בחדר ולטפל כדי למזער הפרעות עם רעש מכני כגון סגירת ופתיחת דלתות בחדר, לאחר מסיבת ריקודים, או עושה לממש שגרות שלך. </li></ol> חלק 4: ניתוח נתונים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר הניסוי הושלם, להעביר את הנתונים שנאספו לתוך גיליון Excel או לתוך הסוויטה ניתוח האהוב עליך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גיליון Excel המצורף הוא דוגמא למה הנתונים עשוי להיראות כך: הוא מכיל את הזמן בשניות מתחילת הניסוי את הפעילות של כל זחל בכל שניות לכל הדגים לאורך הניסוי כולו (ראו קובץ משלים נתונים דוגמה ב קבצים בסעיף של דף זה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איור 1 מציג דוגמה לפעילות של זחל אחד. איור 2 הוא זכר נציג הממוצע של הזחלים WT 40 דג הזברה. בממוצע ON ותגובות OFF בולטים ועקבית. <img src="/files/ftp_upload/old/923_2008_9_26_9/923_Figure-02.png" alt="איור 1" width="569" height="398"> איור 1: פעילות של דג בודד הפעילות של דג WT יחיד DPF 5 בתגובה לסירוגין תקופות של 30 דקות קל לסירוגין.. התגובות ON מסומנים על ידי חצים שחורים התגובות OFF עם החצים האדומים. <img src="/files/ftp_upload/old/923_2008_9_26_11/923_Figure-03.png" alt="איור 2" width="577" height="387"> איור 2: פעילות ממוצע של דגים 40 הפעילות הממוצעת של דג 40 WT ב DPF 5 בתגובה לסירוגין תקופות של 30 דקות קל לסירוגין.. בממוצע ON (חיצים שחורים) ו OFF (חצים אדומים) תגובות בולטים ועקבית. </li></ol> 5. נציג תוצאות איור 3 הוא מתאר סכימטי של המתאר את הניסוי השתמשו בכל הניסויים שלנו. <img src="/files/ftp_upload/old/923_2008_9_26_12/923_Figure-04.png" alt="איור 3" width="530" height="479"> איור 3. עיצוב ניסיוני של בדיקה חזותית תגובה (VMR) מוטור. דג) הפרט ממוקמים צלחת 96-היטב בתא ההקלטה. הפעילות של דגים כל נמדד בשנייה. ב) דגים מקבלים תקופה של הסתגלות כהה או בהיר כדי ליישב אותם כדי להשיג רמת הפעילות הבסיסית. תקופות של 30 דקות על אורות ואורות OFF מוצגים ברצף עבור סכום כולל של 3 שעות. תרשים זה הותאם מ Prober et al. 2006. מה לעשות של Visual-Motor גרפים תגובת נראה? מדדנו את התגובות לסירוגין של דגים WT כדי במרווחים ו decrements אור. כדי לאשר תגובות אלה היו תלויים לפעולת העין, מדדנו את הפעילות של מוטנטים chk, אשר אינם מפתחים כל העיניים. איור 4 מראה את הפעילות הממוצע המתקבל חיות WT כמו גם מוטנטים chk. <img src="/files/ftp_upload/old/923_2008_9_26_13/923_Figure-05.png" alt="איור 4" width="489" height="212"> איור 4: דגים WT יש לנקות ולכבות התגובות הן בתיווך העיניים לרוחב ההתנהגות של תנועה של זחלים דג הזברה ב DPF 5 בתגובה 30 דקות של אור ו 30 דקות של OFF אור נרשם לשנייה.. עקבות מייצגת ממוצע של 480 תגובות מתוך 120 WT הפרט (כחול זכר) או זחלים chk מוטציה (כתום זכר) נרשם על 3 ניסויים. מוטנטים chk לא להגדיל באופן משמעותי את פעילותם או במרווחים או decrements אור יש רמה בסיסית נמוכה של פעילות. נתון זה הותאם מ Emran et al. 2007. חזותית, מנוע התגובות מהדג NRC מוטציה. מוטציה בקמ"ג נחשב עיוור לחלוטין על פי מבחן OKR. ב מוטנטים NRC, מסופי photoreceptor לא יוצרים כראוי על מסלול הראייה נפגעת קשות 1. רשתית תא גנגליון הקלטות דגים מוטנטים אלה עולה כי הם מפגינים בעיקר off-סוג תא גנגליון התגובות, כמה חריגות ב-off, אבל לא טהור ב-type 2 תגובות. באמצעות מבחן VMR הראינו כי מוטציה NRC יש נורמלי OFF-התגובה עיכוב איטית על התגובה (seדואר איור 5). לפיכך, מוטציה NRC אינה עיוורת לחלוטין כפי שסברו קודם לכן 2. <img src="/files/ftp_upload/old/923_2008_9_26_14/923_Figure-06.png" alt="איור 5" width="591" height="244"> איור 5: mutats NRC להגדיל את הפעילות שלהם בתגובה לשינויים בעוצמות אור תגובות התנהגותיות להדליק ולכבות מ WT וזחלים NRC מוטציה ב DPF 5.. עקבות מייצגת ממוצע של 480 תגובות מתוך 120 דגים בודדים גנוטיפ אחד. ההתנהגות של תנועה ממוצעת של מוטנטים NRC (עקבות ורוד) מצטמצם מעט לעומת דגים WT (עקבות כחול) אבל עדיין נמרץ בעקבות האור OFF גירוי. הערה הזמן עלייה איטית בתגובה NRC מוטציה לאור ON לעומת אור על התגובה של הדג WT.

<ol><li>Allwardt, A. B., Lall, B. A., Brockerhoff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synapse+formation+is+arrested+in+retinal+photoreceptors+of+the+zebrafish+nrc+mutant%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Synapse formation is arrested in retinal photoreceptors of the zebrafish nrc mutant.</a> J Neurosci. 21, 2330-2330 (2001).</li>
<li>Emran, F., Rihel, J., Adolph, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OFF+ganglion+cells+cannot+drive+the+optokinetic+reflex+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">OFF ganglion cells cannot drive the optokinetic reflex in zebrafish.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104, 19126-19126 (2007).</li>
<li>Prober, D. A., Rihel, J., Onah, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypocretin%2Forexin+overexpression+induces+an+insomnia-like+phenotype+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hypocretin/orexin overexpression induces an insomnia-like phenotype in zebrafish.</a> J Neurosci. 26, 13400-13400 (2006).</li>
<li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWesterfield%2C+M+%22The+zebrafish+book%3A+a+guide+for+the+laboratory+use+of+zebrafish%22">The zebrafish book: a guide for the laboratory use of zebrafish</a>. , University of Oregon Press. Eugene, OR. (2000).</li>
</ol>

הפרוצדורות אנחנו מראים בסרט הם כל נציג של דגים WT. עם זאת, הניסויים הללו ניתן לעשות זאת באנלוגיה על דגים מוטנטים, כמו גם (ראה סעיף נציג תוצאה). אנו ממליצים על צלחת דגים WT דגים מוטנטים על הצלחת באותו מתווה לוח דמקה למטרות שליטה אופטימלית. בעת שימוש דגים מוטנטים בצלחת כמו דג WT לוודא שאתה כותב איזה סוג של דג היה מצופה היטב כל אחד. הנה הצעה כיצד לעקוב אחר הדג מצופה בכל טוב (הצג הספר פתק עם גיליון נתונים). כמו...

<table><tbody><tr><td>מכשירי מיקרופלטה</td><td>כלי</td><td>Whatman, GE Healthcare</td><td>7701-1651</td><td></td></tr><tr><td>פיפטות העברה</td><td>כלי</td><td>VWR international</td><td>202205</td><td></td></tr><tr><td>מי דגים</td><td>ריאגנט</td><td></td><td></td><td>עיינו במקור מס' 4</td></tr><tr><td>תאי הקלטה (Zebrabox)</td><td>כלי</td><td>Viewpoint Lifesciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תוכנת Videotrack</td><td>כלי</td><td>Viewpoint Lifesciences</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

assay ההתנהגות כדי למדוד את התגובה של דג הזברה לשינויים לעוצמות אור

A Behavioral Assay to Measure Responsiveness of Zebrafish to Changes in Light Intensities 

רפלקס optokinetic (OKR) היא של Visual Basic רפלקס הוצגו על ידי רוב בעלי החוליות ואת ממלא תפקיד חשוב בייצוב עין יחסית למקום חזותית. עם זאת, OKR מחייב חיה לזהות פסים נעים יתכן כי דגים אינם תערוכה OKR לא יכול להיות עיוור לחלוטין. דג הזברה מוטציה אחת, תשובה ג optokinetic (NRC) אין OKR בכל תנאי אור נבדק נמסר להיות עיוור לחלוטין. בעבר הראינו כי OFF-הגנגליון פעילות התא יכול להיות מוקלט מוטנטים אלו. כדי לקבוע אם דגים מוטנטים עם OKR אין כמו מוטציה NRC יכול לזהות במרווחים של אור פשוט decrements פיתחנו את assay חזותי מנוע התנהגותיות (VMR). ב assay זה, זחלים דג הזברה יחיד ממוקמים היטב בכל צלחת 96-היטב המאפשר ניטור סימולטני של הזחלים באמצעות מערכת אוטומטית, מעקב וידאו. התגובות של תנועה של כל זחל עד 30 דקות אור ו -30 דקות את האור הוקלטו לכימות. דגים WT יש עלייה קצרה של פעילות מוטורית על האורות דולקים, המכונה תגובת בהלה, ואחריו לחזור נמוכה מאשר פעילות המחקר, שנקרא להקפיא. דגים WT גם להגביר את הפעילות של תנועה חדה שלהם מיד לאחר כיבוי האורות, ורק בהדרגה (מעל מספר דקות) לחזור לפעילות בסיסית של תנועה. מוטנטים NRC להגיב באופן דומה אור OFF כמו דג WT, אבל התערוכה ירידה קלה בפעילות הממוצעת שלהם לעומת דגים WT. פעילות מוטורית בתגובה אור ב NRC מוטנטים מתעכב ועכור. יש זמן עלייה איטית של התגובה NRC מוטציה לאור ON לעומת אור WT על התגובה. תוצאות המחקר מראות כי דגים NRC אינם עיוורים לגמרי. מכיוון teleosts יכול לזהות אור דרך אי - רשתית רקמות, אנו אישר כי תגובות התנהגותיות מיידית אור עוצמת השינויים דורשים עיניים שלם באמצעות (chk) מוטנטים chokh, אשר לחלוטין חוסר העיניים החל מהשלבים המוקדמים של הפיתוח. ב assay VMR שלנו, מוטנטים chk התערוכה אין תגובת בהלה לאור או כבוי, מראה כי בעיני לרוחב לפשר התנהגות זו. Assay VMR המתואר כאן משלים את assay ומבוססת OKR, אשר אינו לבחון את היכולת של הזחלים דג הזברה להגיב לשינויים בעוצמות אור. בנוסף, אוטומציה של assay VMR ניתנת ההקרנה תפוקה גבוהה עבור פגמים עוצמת אור מונע תגובות חזותית.

פיתחנו את תגובת חזותית-Motor כדי לכמת את הפלט המוטורי של דג הזברה הזחל בתגובה במרווחים ו decrements אור. בחנו גם מוטנטים דג הזברה חזון, כולל לא optokinetic (NRC) מוטנטים בתגובה, אשר נחשבו עיוור לחלוטין, כאשר נבדק על ידי assay אחר חזון, רפלקס optokinetic.

Assay ההתנהגות כדי למדוד את התגובה של דג הזברה לשינויים לעוצמות אור

הרפלקס האופטוקינטי (OKR) הוא רפלקס חזותי בסיסי המופגן על ידי רוב בעלי חוליית השדרה וממלא תפקיד חשוב בייצוב העין ביחס ל...

במעבדת Dowling, אנו חוקרים את הפיזיולוגיה וההתפתחות של הרשתית בדגי זברה כדי לקבוע האם מוטנטים של דגי זברה שאינם מסוגלים לזהות תנועה יכולים לזהות אור ואינם עיוורים. כדי לעשות זאת, אנו בוחנים את התגובה המוטורית הוויזואלית שלהם, ה-VMR. אנו אוספים דגי זברה כארבעה ימים לאחר ההפריה.הניחו אותם בלוחיות 96 בארות, הכינו מערך דימוי מתאים, כיילו את תוכנת מעקב הווידאו עם הלוחית, ולאחר מכן עקבו אחר התגובה המוטורית של הדגים בעקבות מעברים מאור לחושך או מחושך לאור, תהליך שאנו מכנים VMR. היי, אני פרידה עמראן מהמעבדה של ג'ון דאולינג ומחלקת הביולוגיה המולקולרית והתאית באוניברסיטת הרווארד.ואני ג'ייסון ריו. אני מהמעבדה של אלכסנדר שיר, גם היא במחלקה לביולוגיה מולקולרית ותאית באוניברסיטת הרווארד. היום נראה לכם את התגובה המוטורית-חזותית של דגי זברה לעלייה ולירידה בעוצמת האור.אם כן, נתחיל. כדי להתחיל את בדיקת התגובה המוטורית-חזותית, ראשית גדלו זחלי דגי זברה מסוג wild type תחת מחזור אור-חושך בטמפרטורה של 28 °C עד לפחות ארבעה ימים לאחר ההפריה. לצורך השגת התוצאות ההתנהגותיות הטובות ביותר, מחזור האור-חושך הטיפוסי שלנו הוא 14 שעות של אור החל מהשעה 9:00 בבוקר ו-10 שעות של חושך החל מהשעה 11:00 בלילה.הימנעו מצפיפות יתר של הזחלים. בדרך כלל אנו שומרים לא יותר מ-50 זחלים בצלחת פטרי בודדת. חמישה ימים לאחר ההפריה, אנו מ

a-behavioral-assay-to-measure-responsiveness-zebrafish-to-changes

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

סרטון זה מתאר את בדיקת התגובה הפוטומוטורית של דגי זברה וזחלי מיננו שמנים באמצעות תוכנת מעקב אוטומטית. הפרוטוקול מודד את התגובה ההתנהגותית של דגי הזחל בעקבות שינוי פתאומי בתנאי התאורה.

בדיקת תגובה פוטומוטורית: שיטה למדידת התגובה ההתנהגותית של דגי זברה זחלים לשינוי פתאומי במצב התאורה

סרטון זה מתאר את מבחן התגובה מעורר מגע, המודד את התגובה של זחל דג הזברה לגירויי מגע.

מבחן תגובת בריחה: שיטה לחקר התגובה של זחלי דגי זברה לגירויי מגע

הסרטון מתאר את בדיקת ההעדפה לאור-חושך כדי לחקור את ההתנהגות הקשורה לחרדה בדגי זברה בעקבות החשיפה לאתנול.

מבחן העדפה אור-כהה: שיטה לחקר התנהגות הקשורה לחרדה בדגי זברה

סרטון זה מתאר את בדיקת התגובה האופטוקינטית בדגי זברה. הסרטון מודד את תנועות העיניים הרפלקסיביות בהתבסס על הגירוי החזותי הנע וקובע את חדות הראייה בדגי זברה.

בדיקת תגובה אופטוקינטית: שיטה למדידת חדות ראייה בדגי זברה

הסרטון מתאר את ההימנעות ובדיקת thigmotaxis של זחלי דגי זברה. הסרטון בוחן את התנהגותם של זחלי דגי זברה בתגובה לגירוי חזותי מרתיע.

הימנעות מדגי זברה ובדיקת תיגמוטקסיס: שיטה בעלת תפוקה גבוהה לבחינת התנהגות הזחלים בתגובה לגירוי חזותי מרתיע

המעבדה שלנו פיתחה מערכת שהיא שימושית לצורך זיהוי של כמה התנהגויות שונות בזחלי דג הזברה 7 ימים בת הדמיה אוטומטית תפוקה גבוהה רומן. המערכת יכולה לשמש לאיתור שינויים עדינים בהתנהגות לאחר הזחלים שנחשפו לרעלים או תרופות סביבתיים.

ניתוח התנהגות תפוקה גבוהה אוטומטי בזחלי דג הזברה

אנו מציגים שיטה לניתוח אלקטרורטינוגרפי (ERG) של זחלי דג הזברה תוך שימוש בטכניקות מיקרומניפולציה ואלקטרורטינוגרפיה. זוהי שיטה פשוטה ופשוטה לבדיקת תפקוד חזותי של זחלי דג הזברה in vivo.

ניתוח electroretinogram של התגובה החזותית בדג הזברה זחלים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבחון פעילויות זחל דג זברה, פאטהד מינו גינקולוגיות ותגובות photomotor (PMR) באמצעות תוכנת מעקב אוטומטי אנטי. כאשר שולבו במשותף הרעלים bioassays, ניתוחים של התנהגויות אלו מספקים כלי אבחון לבחון אתריים כימי. פרוטוקול זה מתואר באמצעות קפאין, neurostimulant מודל.

נסיוני לבחינת תגובה התנהגותית פרופילים בדגים זחל: ליישום הקפאין נוירו-ממריץ

כתב יד זה מתאר שיטה פשוטה למדוד מתח במהלך הפעולה במהלך בגרות דג מבוגר. הגישה מנצלת את הנטייה הטבועה שדגים מעדיפים את החצי התחתון של הטנק כאשר במצב מלחיץ. כמו כן, אנו מתארים שיטות לזיווג עם פרמקולוגיה.

גישות התנהגותיות לחקר הלחץ הטבוע בדג זברה

פרוטוקול זה קובע פרדיגמת פנוטיפ התנהגותית בזחלים של דגי זברה שטופלו ב-MPTP כדי להעריך ליקויים מוטוריים ולא מוטוריים הדומים למחלת פרקינסון.

פרופיל פנוטיפי של פנוטיפים התנהגותיים דמויי פרקינסון שנגרמו על ידי MPTP בזחלי דגי זברה בהתבסס על ניסוי התנהגותי

למדו את שיטת VMR למדידת התגובה החזותית-מוטורית של דגי זברה לשינויים בעוצמת האור. שיטה זו מאפשרת הערכת יכולות ראייה במוטנטים ותרומה להבנת מנגנוני הראייה בחולייתנים.

Assay ההתנהגות כדי למדוד את התגובה של דג הזברה לשינויים לעוצמות אור

גלה סרטונים נוספים