Abbiamo descritto un protocollo per la quantificazione rapida e sensibile della gravità della malattia in modelli murini di atassia cerebellare. Le misure includono dell'arto posteriore stringendo, sporgenza di prova, andatura e cifosi. Questo protocollo discrimina in modo efficace tra individui affetti e non affetti, e rileva la progressione delle persone colpite nel corso del tempo.
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Articolo metodologico
Un semplice composito Sistema di punteggio per la valutazione Fenotipo modelli murini di atassia cerebellare
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
Abbiamo descritto un protocollo per la quantificazione rapida e sensibile della gravità della malattia in modelli murini di cervello dei atassia. È derivato da valutazioni fenotipo precedentemente pubblicato in modelli di malattie, tra cui atassie spinocerebellari, malattia di Huntington s spinobulbar e atrofia muscolare. Le misure includono dell'arto posteriore stringendo, sporgenza di prova, andatura e cifosi. Ogni misura viene registrato su una scala da 0-3, con un totale combinato di 0-12 per tutte le quattro misure. I risultati effettivamente discriminare tra individui affetti e non affetti, ma anche di quantificare la progressione temporale dei fenotipi malattia neurodegenerativa. Le misure possono essere analizzati singolarmente o combinati in un fenotipo punteggio composito per una maggiore potenza statistica. La combinazione ideale delle quattro misure descritte dipende dalla patologia in questione. Vi presentiamo un esempio di protocollo utilizzato per valutare la gravità della malattia in un modello murino transgenico di atassia spinocerebellare di tipo 7 (SCA7).
Albert R. La Spada e Gwenn A. Giardino contribuito a questo manoscritto allo stesso modo.
Protocollo
Per evitare bias, lo sperimentatore di eseguire le valutazioni non dovrebbe essere a conoscenza del genotipo dell'animale. Le singole misure sono segnati su una scala 0-3, dove 0 rappresenta l'assenza del fenotipo rilevanti e 3 rappresentano la manifestazione più grave. Ogni test viene eseguito più volte ad assicurare che il punteggio è riproducibile. L'obesità si complicare l'interpretazione di tutte le misure descritte. L'investigatore può voler pesare topi seguente punteggio fenotipo per valutare il possibile ruolo di adiposità nei risultati.
Ledge prova
Il test sporgenza è una misura diretta di coordinamento....
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Discussione
Questo protocollo è progettato per essere una valutazione sensibile e facilmente eseguibile della gravità della malattia in modelli murini di atassia cerebellare. Singoli componenti del sistema di punteggio sarà più o meno efficace in modelli murini di neurodegenerazione diversi.
Elementi di questo sistema di punteggio siano stati effettivamente utilizzati per valutare una varietà di modelli murini di malattie umane neurodegenerative, tra cui atassie cerebellari, malattia di Huntington s e s.......
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Dichiarazioni
Questi studi sono stati approvati dalla University of Animal Care Washington e del Comitato Istituzionale Usa.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato da sovvenzioni NIH NS052535 a GAG e EY014061 & EY014997 a ARL, così come un premio UL1DE019583-02 consorzio.
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Riferimenti
- Chou, A. H. Polyglutamine-expanded ataxin-3 causes cerebellar dysfunction of SCA3 transgenic mice by inducing transcriptional dysregulation. Neurobiol Dis. 31 (1), 89-101 (2008).
- Thomas, P. S. Jr
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Ristampe e permessi
