Questo articolo descrive una procedura per l'induzione di tumori al fegato ortotopico bioluminescenti nei topi, e la successiva analisi di crescita del tumore confinato al fegato utilizzando vivere tutto l'imaging luminescenza corpo.
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Articolo metodologico
Bioluminescent modello murino epatica Tumori
In questo articolo
Sommario
Abstract
Questo video descrive la creazione di metastasi del fegato in un modello murino che può essere successivamente analizzato da immagini bioluminescenti. Le cellule tumorali vengono somministrati appositamente per il fegato per indurre un tumore localizzato al fegato, attraverso la mobilitazione della milza e la divisione in due, lasciando intatto il peduncolo vascolare per ogni metà della milza. Lewis cellule di carcinoma del polmone che esprimono costitutivamente il gene della luciferasi lucciola (luc1) vengono inoculati in un emi-milza che viene poi asportato dopo 10 minuti. L'altro emi-milza viene lasciato integro e restituito all'addome. La crescita del tumore del fegato può essere monitorato l'imaging bioluminescenza utilizzando l'intero IVIS sistema di imaging del corpo. L'imaging quantitativo della crescita tumorale mediante IVIS fornisce quantificazione precisa delle cellule tumorali vitali. La morte delle cellule tumorali e la necrosi a causa di un trattamento farmacologico è indicato all'inizio di una riduzione del segnale bioluminescente. Questo modello del mouse permette di indagare i meccanismi alla base del tumore metastatico delle cellule di sopravvivenza e di crescita e può essere utilizzato per la valutazione delle terapie delle metastasi epatiche.
Protocollo
Introduzione
Il fegato è spesso il primo sito di malattia metastatica e può essere l'unico sito di diffusione in circa il 30 40% dei pazienti con malattia avanzata. Tuttavia le opzioni per il trattamento di tumori epatici metastatici sono pochi con una minoranza di pazienti idonei per la resezione e solo il 23% responder importante per chemioterapici. Ricerca pre-clinica in questo campo è stata limitata dall'assenza di un modello murino adatto per studiare le malattie del fegato isolato. Descriviamo uno split-milza approccio che può essere usato per stabilire in modo sicuro uniforme, metastasi epatiche diffuse. Resezione di questa metà dell....
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Discussione
Lo sviluppo di affidabili modelli in vivo per lo studio delle metastasi al fegato sta diventando sempre più importante con l'avvento di nuove strategie terapeutiche. Per lo studio accurato di nuove strategie, modelli animali dovrebbe essere relativamente facile da eseguire, formare un numero significativo di metastasi, coinvolgere tutte le fasi della cascata metastatica e hanno un sistema giornalista che consente il rilevamento e il conteggio di un numero limitato di cellule metastatiche. Split-milza approc.......
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Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato finanziato attraverso il Cork Sud Infermeria fondo Victoria University Hospital con il seno, il Cancer Society irlandese (CRI07TAN) e il Cancer Centre Cork Research. Linea del polmone Lewis cellule che esprimono stabilmente luciferasi è stato un gentile dono del Dr. Karin Jooss, Cell Genesys, Inc., San Francisco, USA.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | |
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | |
| Chetamina | Vétoquinol | ||
| Xilazina | Vétoquinol | ||
| Carprofene | Vétoquinol | ||
| Videne | Ecolab | ||
| Sutura Vicryl 4-0 | Ethicon Inc. | ||
| Sutura PDS 4-0 | Ethicon Inc. | ||
| Sutura Prolene 4-0 | Ethicon Inc. | ||
| Luciferina Firefly | Biosynth International, Inc |
Riferimenti
- Kasuya, H. Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies. Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).
- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H.
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Ristampe e permessi
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