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La costrizione cronica del nervo sciatico e Ipersensibilità Testing Pain in Rats

DOI:

10.3791/3393

March 13th, 2012

In This Article

Summary

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Grazie alla semplicità di intervento e l'esito robusto comportamentale, costrizione cronica del nervo sciatico è uno dei preminenti modelli animali di dolore neuropatico. Entro 24 ore dopo l'intervento, ipersensibilità al dolore è stabilito e può essere misurato quantitativamente usando un von Frey aesthesiometer (test meccanici) e metro analgesia plantare (prova termica).

Abstract

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Dolore neuropatico cronico, derivante da danni al sistema nervoso centrale o periferico, è una condizione diffusa e invalidante, che colpisce il 7-18% della popolazione di 1,2. I sintomi includono spontanea (formicolio, bruciore, scosse elettriche-like) dolore, disestesia, parestesia, allodinia (dolore derivante dalla normalmente non dolorosi stimoli) e di iperalgesia (un aumento della risposta agli stimoli dolorosi). I sintomi sensoriali sono co-morbidità con disabilità comportamentali, come l'insonnia e la depressione. Per studiare il dolore neuropatico cronico diversi modelli animali che mimano lesione del nervo periferico sono stati sviluppati, uno dei più largamente usato è Bennett e Xie (1988) unilaterale nervo sciatico lesione cronica costrizione (CCI) 3 (Figura 1). Qui vi presentiamo un metodo per l'esecuzione di CCI e ipersensibilità al dolore test.

CCI viene eseguito in anestesia, con il nervo sciatico da un lato esposto da fare comeincisione parenti, e tagliando il tessuto connettivo tra le superficiale dei muscoli glutei e bicipiti femorale. Quattro legature gut cromico sono legati liberamente intorno al nervo sciatico a intervalli di 1 mm, per occludere solo, ma non arrestare il flusso di sangue epineurale. La ferita viene chiusa con suture nel muscolo e graffe nella pelle. L'animale viene poi lasciato riprendersi dalla chirurgia per 24 ore prima del test ipersensibilità dolore comincia.

Per la prova comportamentale, i ratti vengono inseriti nella apparecchiatura di prova e possono abituare la procedura di prova. L'area di prova è la metà della superficie plantare della zampa posteriore (figura 2), che rientra nel distribuzione del nervo sciatico. Soglia di ritiro meccanica viene valutata stimolando meccanicamente sia hindpaws feriti e uno illeso utilizzando elettronica dinamica plantare von Frey aesthesiometer o manuale von Frey capelli 4. La soglia di ritiro meccanica è la pressione massima esercitata(In grammi) che fa scattare il ritiro zampa. Per la misurazione di latenza ritiro termico, descritto inizialmente da Hargreaves et al (1988), la zampa posteriore è esposto ad un fascio di calore radiante attraverso una superficie di vetro trasparente usando un misuratore plantare analgesia 5,6. La latenza ritiro allo stimolo di calore viene registrato come il tempo per il ritiro zampa in entrambi i hindpaws feriti e illeso. Dopo CCI, soglia di ritiro meccanica, nonché latenza ritiro termico nella zampa feriti sono entrambi significativamente ridotto rispetto alla misurazioni e la zampa indenne (Figura 3). Il modello CCI di lesione dei nervi periferici in combinazione con il test del dolore ipersensibilità fornisce un sistema modello per studiare l'efficacia di potenziali agenti terapeutici per modificare il dolore cronico neuropatico. Nel nostro laboratorio, ci avvaliamo di CCI fianco sensibilità termica e meccanica delle hindpaws per indagare il ruolo delle interazioni neuro-immunitario nella patogenesie trattamento del dolore neuropatico.

Protocol

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1. Costrizione nervo sciatico cronica

Tecniche asettiche deve essere utilizzato per la procedura chirurgica. Disinfettare la superficie chirurgica di lavoro con il 70% di etanolo e preparare in anticipo gli strumenti sterili (ad esempio, forbici, pinze sottili e riavvolgitore), garze, graffette e tamponi in autoclave. Per interventi chirurgici multipli, pulire e strumenti risterilizzare con il 70% di etanolo o uno sterilizzatore a secco perla tra ratti. Una maschera chirurgica, cofano capelli e guanti sterili devono essere indossati.

Per costrizione del nervo, preparare la sutura intestinale cromico tagliandolo ....

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Discussion

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CCI è un diffuso modello di lesione del nervo periferico del dolore cronico neuropatico. E 'relativamente semplice da eseguire, e produce ipersensibilità al dolore robusto e stabile per almeno un mese dopo l'infortunio. A seguito di CCI, i ratti mostrano postura anomala della zampa posteriore feriti (dita tenute insieme e plantare-flesso e della zampa rovesciato), così come agitando ripetutamente, guardia e di leccare il ferito zampa posteriore suggerendo la presenza di dolore spontaneo 9. Oltre alla .......

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Disclosures

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Gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dalla cura degli animali e comitato etico della University of New South Wales, Australia, e seguite le linee guida emesse dalla Associazione Internazionale per lo Studio del Dolore.

Acknowledgements

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Gli autori desiderano ringraziare la descrizione originale del modello CCI da Bennett e Xie (1988).

Questo lavoro è stato sostenuto in parte dalle concessioni dal National Health and Medical Research Council of Australia (ID # 568637) e l'Ufficio NSW per la Scienza e la ricerca medica GMT.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Nome del reagente / apparecchiatura Azienda Numero di catalogo Comments
Gut cromico Ethicon G-211 Spessore 4-0
Isoflurano Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW n / a
Mersilk Ethicon W-580 5-0 spessore
Autoclip Becton Dickinson 427631 9 mm in acciaio inossidabile
Riodine Orion R1000802F 1% w / v iodio
Thermal strumento analgesia plantare Ugo Basile 37370
Dinamica aesthesiometer plantare Ugo Basile 37400

References

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  1. Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
  2. Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of ....

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Sciatic Nerve InjuryChronic Constriction InjuryPain Hypersensitivity TestingMechanical Withdrawal ThresholdThermal Withdrawal LatencyVon Frey HairsPlantar Analgesia MeterChromic Gut LigaturesHind Paw StimulationNeuropathic Pain Model

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