Method Article

Leishmaniosi cutanea nella pelle dorsale di criceti: ​​un modello utile per lo screening delle droghe Antileishmanial

DOI:

10.3791/3533

April 21st, 2012

In This Article

Summary

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Ottimizzazione del modello sperimentale per criceto leishmaniosi cutanea da iniezione intradermica di Leishmania Promastigoti la pelle dorsale. Questo approccio è utile durante l 'inoculazione, il follow-up, la caratterizzazione delle lesioni, l'applicazione di trattamenti e di ottenere dei campioni clinici. Locomotion, ricerca di cibo e acqua, attività ludiche e sociali sono conservati.

Abstract

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Tradizionalmente, i criceti sono sperimentalmente inoculati nel muso o la zampa. Tuttavia, in questi siti non si verifica sempre l'ulcera, la misurazione della dimensione della lesione è una procedura difficile e animali mostrano difficoltà a mangiare, respirare e muoversi a causa della lesione. Per ottimizzare il modello criceto per la leishmaniosi cutanea, maschio e femmina adulti giovani criceti dorati (Mesocricetus auratus) sono stati iniettati per via intradermica alla pelle dorsale con da 1 a 1,5 x l0 7 promastigoti di Leishmania e la progressione di lesioni successive sono state valutate sino a 16 settimane post infezione. Il criceto dorato è stato scelto perché è considerato il adeguate bio-modello per valutare i farmaci contro la Leishmania in quanto sono suscettibili alle infezioni da specie diverse. Infezione cutanea dei risultati criceti nelle lesioni croniche ma controllata, e una evoluzione clinica con segni simili a quelli osservati negli esseri umani. Pertanto, l'istituzione of l'estensione dell'infezione misurando la dimensione della lesione in base alla zona di indurimento e ulcere è fattibile. Questo approccio ha dimostrato la sua versatilità e facilità di gestione durante l 'inoculazione, follow-up e caratterizzazione delle lesioni tipiche (ulcere), l'applicazione di trattamenti in diversi modi e di ottenere dei campioni clinici dopo diversi trattamenti. Utilizzando questo metodo la qualità della vita animale per quanto riguarda la locomozione, la ricerca di cibo e acqua, il gioco e le attività sociali isalso conservati.

Protocol

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1. Infezione di criceti

1. Animali

Inbred criceti maschi e femmine d'oro (Mesocricetus auratus), 6-8 settimane, di peso 140-160 g vengono utilizzati. Essi sono ospitati presso la struttura degli animali, a temperatura controllata alloggi, alimentato con cibo secco e roditori di serie fornito con acqua ad libitum. Tutte le procedure che coinvolgono animali sono approvati dal Comitato Etico per uso animale sperimentale. Prima di infezione sperimentale con dermotropic parassiti Leishmania animali sono sessuato, ha segnato e ponderati secondo procedure standardizzate. Per sexing, gli animali ....

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Discussion

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Leishmaniosi cutanea è endemica nelle regioni tropicali ed neotropicale. E 'spesso definito come un gruppo di malattie a causa del variegato spettro di manifestazioni cliniche, che vanno da piccoli noduli cutanei lordo distruzione dei tessuti della mucosa. Maggior parte dei farmaci disponibili sono costose, richiedono regimi di trattamento a lungo e stanno diventando sempre più inefficace, rendendo necessaria la scoperta di nuovi farmaci.

Il modello di topo è ampiamente utilizzato, ma pr.......

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Disclosures

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Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.

Acknowledgements

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Questo studio è stato sostenuto dalle concessioni dal Comitato per la Ricerca presso l'Università di Antioquia (CODI), l'Istituto Colombiano per lo sviluppo di Scienza e Tecnologia - COLCIENCIAS e il Centro per lo sviluppo dei prodotti contro le malattie tropicali - CIDEPRO.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Nome del reattivo Tipo Azienda Numero di catalogo
Ketamina Reagente Holliday-Scott SA
Xilacine Reagente Sintesi
PBS Reagente GIBCO 14190-136
Calibro digitale Attrezzatura Pescatore 15-077-958
Giemsa Reagente SIGMA GS1L-1L
Formalina Reagente Nova lab 11273
Paraffina Reagente Pechiney Plastic Packaging PM-996
Haemotoxilin Reagente Nova lab 10870103
Eosina Nova lab 10870203
Kodak Ektachem chimica a secco Attrezzatura Kodak Ektachem DT-60
meglumina antimoniato Reagente Aventis
Microscopia Attrezzatura Nikon YS2-T

References

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  1. WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
  2. Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice.

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Cutaneous LeishmaniasisHamster ModelIntradermal InoculationLesion MeasurementDrug ScreeningParasite DetectionHistopathological AnalysisAnimal ImmobilizationSubdermal InjectionClinical Monitoring

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