Articolo metodologico

Indurre miointimale Iperplasia Versus aterosclerosi nei topi: Introduzione di due modelli validi

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DOI:

10.3791/51459

14 maggio 2014

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Questo video mostra due modelli di intimale sviluppo placca nelle arterie murini e sottolinea le differenze di iperplasia miointimale e aterosclerosi.

Abstract

Vari vivo modelli di roditori di laboratorio in per l'induzione di stenosi sono state stabilite per simulare malattie che comprendono la formazione di placca arteriosa e stenosi, come osservato ad esempio cardiopatia ischemica. Due modelli del mouse altamente riproducibili - sia conseguente stenosi ma ognuno alla base di un diverso percorso di sviluppo - vengono introdotti qui. I modelli rappresentano le due più comuni cause di stenosi dell'arteria; cioè sono mostrati uno per ogni modello di topo iperplasia miointimale e aterosclerosi. Causare iperplasia miointimale, viene eseguita una lesione catetere a palloncino dell'aorta addominale. Per lo sviluppo della placca aterosclerotica, l'ApoE - è utilizzata modello del mouse in combinazione con dieta grassa occidentale - /. Diverse opzioni di modelli adattati per la misurazione e la valutazione dei risultati sono nominati e descritti in questo manoscritto. L'introduzione e il confronto di questi due modelli fornisce information per gli scienziati di scegliere il modello di stenosi dell'arteria adeguato in conformità alla questione scientifica posta.

Introduzione

Nei paesi industrializzati la cardiopatia ischemica rimane una delle principali cause di mortalità ad 1. Le cause di stenosi dell'arteria coronaria sono molteplici e includono iperplasia miointimale così come aterosclerosi, con rivascolarizzazione rimanendo la strategia di trattamento più comune 2. Modelli di ricerca che distinguono chiaramente tra le vie meccanicistiche di iperplasia intimale e aterosclerosi sono essenziali per indagare il patobiologico e processi fisiopatologici in arterioso sviluppo della placca. In questo video vengono introdotti due modelli murini diversi utilizzati per studiare sia lo sviluppo di iperplasia miointimale....

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Protocollo

Tutti i lavori degli animali deve essere effettuata secondo le pertinenti linee guida per la cura degli animali. Ottenere l'approvazione istituzionale per il lavoro animale prima dell'inizio del protocollo.

1. Miointimale Iperplasia Model (A)

Per il modello iperplasia intimale, acquistare C57BL/6J (numero Archivio 000.664, C57BL/6J) topi all'età di otto settimane del peso di circa 25 g. Topi Casa in questi esperimenti in condizioni convenzionali; nutrire topi chow mouse standard e fornire acqua ad libitum.

  1. Preparazione Mouse: Introdurre il mouse per uno s....

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Risultati

La figura 1 mostra diverse opzioni di analisi e lo stato di malattia indotta per entrambi i modelli. Per il modello iperplasia intimale, viene mostrata l'analisi di sezioni rappresentative trasversali in colorazione tricromica. Da queste sezioni trasversali, risultati come rapporti I / M, spessore massimo placca, spessore intimale massimo nel lume, obliterazione del lume in percentuale, così come l'area della placca possono essere misurate e calcolate.

Per valutare i.......

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Discussione

Sebbene entrambe le malattie provocano sintomi simili nel paziente, i meccanismi alla base dello sviluppo della placca e quindi i metodi di trattamento sono molto diversi 2. In diverse forme di stenosi arteriosa risultati clinici nei pazienti nonché i tempi di sviluppo placca dipendono dal meccanismo sottostante.

A seconda dei risultati clinici nel paziente, diversi metodi di analisi dei campioni devono essere eseguite 5,15. È necessario adattare l'analisi ai riliev.......

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Dichiarazioni

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Ringraziamenti

Gli autori ringraziano Christiane Pahrmann per l'assistenza tecnica. SS ha ricevuto finanziamenti dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992/3-2 e SCHR992/4-2).

....

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Brodo di tioglicolato 3%Fluka70157polvere
PFA 4%Microscopia elettronica Scienze#157135S20%
Sudan III soluzione coloranteSigmaAldrich S4131
polvere di topo C57BL/6JJackson LaboratoriesStock # 0006664
mouse ApoE -/-Jackson LaboratoriesStock #002052
Western DietHarlan LaboratoriesTD.88137
tagliacapelliWAHL8786-451A ARCO SE
ForeneAbbottisoflurano
Fine Science Tools18055-04Micro-Serrefine -
Applicatore a morsettoCatetere
Sutura 10-0 in proleneEthicon788G
Sutura in prolene 6-0Ethicon8709H
Sutura in prolene 5-0EthiconEH7229H
RimadylPfizerCarprofene
Metacam 1,5 mg/mlBoehringer IngelheimMetamizol
Morsetto microchirurgico per da 4 mm Fine Science Tools 18056-14

Riferimenti

  1. Manuel, D. G., Leung, M., Nguyen, K., Tanuseputro, P., Johansen, H. Burden of cardiovascular disease in Canada. Can J Cardiol. 19, 997-1004 (2003).
  2. ER, O. B., Ma, X., Simard, T., Pourdjabbar, A., Hibbert, B. Pathogenesis of neointima formation following vascular injury. Cardiova....

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Modello di aterosclerosiCateterismo con palloncinoTopi knockout per ApoEAlimentazione con dieta occidentaleChirurgia per lesione aorticaAnalisi istologicaColorazione con Sudan RedMorfometria computerizzataMisurazione del restringimento luminale

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