Cellule intere correnti indotte dall'applicazione di Puff di GABA nelle fette del cervello

Yangjian Feng; Binliang Tang; Ming Chen; Li Yang

doi:10.3791/56387

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Articolo metodologico

Cellule intere correnti indotte dall'applicazione di Puff di GABA nelle fette del cervello

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DOI:

10.3791/56387

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12 ottobre 2017

Yangjian Feng^*¹^,² , Binliang Tang^*¹^,² , Ming Chen² , Li Yang¹^,³^,⁴^,⁵

¹School of Psychology, South China Normal University, ²School of Life Sciences, South China Normal University, ³Brain Science Institute, South China Normal University, ⁴Center for Studies of Psychological Application, South China Normal University, ⁵Guangdong Key Laboratory of Mental Health and Cognitive Science, South China Normal University

^* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Descriviamo la tecnica di soffio, da cui reagenti farmacologici possono essere somministrati durante la registrazione di cellule intere patch-clamp ed evidenziano vari aspetti delle caratteristiche che sono cruciali per il suo successo.

Abstract

Amministrazione farmacologica è comunemente usato quando lo svolgimento di cellule intere patch-clamp registrazione nelle fette del cervello. Uno dei migliori metodi di applicazione della droga durante la registrazione elettrofisiologica è la tecnica di soffio, che può essere utilizzata per studiare l'effetto dei reagenti farmacologici sulle attività neuronale nelle fette del cervello. Il grande vantaggio di applicazione puff è che la concentrazione di droga intorno al sito di registrazione aumenta rapidamente, impedendo così la desensibilizzazione dei recettori di membrana. Riuscito uso di applicazione di soffio comporta particolare attenzione ai seguenti elementi: la concentrazione del farmaco, i parametri della micropipetta soffio, la distanza tra la punta di una micropipetta di soffio e il neurone registrati e la durata e pressione guidando il puff (libbre per pollice quadrato, psi). Questo articolo descrive una procedura dettagliata per la registrazione di cellule intere correnti indotte da sbuffando acido gamma - aminobutirrico (GABA) su un neurone di una fetta di corticale prefrontale. In particolare, la stessa procedura può essere applicata con lievi modifiche per altre zone del cervello come l'ippocampo e lo striato e per diverse preparazioni, quali colture cellulari.

Introduzione

La tecnica del patch-clamp, uno strumento primario per lo studio di segnali elettrici nei neuroni, è stata sviluppata in anni 1970¹^,². Dei principali vantaggi di questa tecnica è che esso fornisce conoscenza su come specifici trattamenti (ad es., farmacologico) può alterare funzioni neuronali o canali in tempo reale³. Valutazione farmacologica di funzione di un neurone durante la registrazione in una fetta di cervello cellule intere richiede l'applicazione di farmaci, come gli agonisti o antagonisti dei recettori specifici, i neuroni in fase di registrazione. Questo metodo permette l'id....