È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

Articolo metodologico

Modello di trapianto parziale di arti posteriori eterotopiche nei ratti

2.8K visualizzazioni

DOI:

10.3791/62586

9 giugno 2021

* These authors contributed equally

In questo articolo

Sommario

Questo documento presenta un protocollo di trapianto di lembi osteomiocutaneo eterotopico parziale nei ratti e i suoi potenziali risultati nel follow-up a medio termine.

Abstract

Gli allotrapianti compositi vascolarizzati (VCA) rappresentano l'opzione di ricostruzione più avanzata per i pazienti senza possibilità chirurgiche autologhe dopo un difetto tissutale complesso. I trapianti di viso e mano hanno cambiato la vita dei pazienti sfigurati, dando loro un nuovo organo sociale estetico e funzionale. Nonostante i risultati promettenti, la VCA è ancora sottoperformata a causa delle comorbidità di immunosoppressione per tutta la vita e delle complicanze infettive. Il ratto è un modello animale ideale per studi in vivo che studiano le vie immunologiche e i meccanismi di rigetto dell'innesto. I ratti sono anche ampiamente utilizzati in nuove tecniche di conservazione dell'innesto di tessuto composito, compresi gli studi di perfusione e crioconservazione. I modelli utilizzati per la VCA nei ratti devono essere riproducibili, affidabili ed efficienti con bassa morbilità e mortalità postoperatoria. Le procedure di trapianto di arti eterotopici soddisfano questi criteri e sono più facili da eseguire rispetto ai trapianti di arti ortotopici. Padroneggiare i modelli microchirurgici dei roditori richiede una solida esperienza nella microchirurgia e nella cura degli animali. Qui è riportato un modello affidabile e riproducibile di trapianto parziale eterotopico di lembi osteomiocutanei nei ratti, gli esiti postoperatori e i mezzi di prevenzione di potenziali complicanze.

Introduzione

Negli ultimi due decenni, VCA si è evoluto come un trattamento rivoluzionario per i pazienti che soffrono di grave deturpazione tra cui viso1, amputazioni degli arti superiori2, pene3e altri difetti tissutali complessi4,5. Tuttavia, le conseguenze dell'immunosoppressione per tutta la vita ostacolano ancora un'applicazione più ampia di questi complessi interventi chirurgici ricostruttivi. La ricerca di base è fondamentale per migliorare le strategie anti-rigetto. Aumentare il tempo di conservazione del VCA è anche essenziale per migliorare ....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Protocollo

Tutti gli animali hanno ricevuto cure umane in conformità con la Guida NIH per la cura e l'uso degli animali da laboratorio. L'Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC-protocollo 2017N000184) e l'Animal Care and Use Review Office (ACURO) hanno approvato tutti i protocolli sugli animali. Ratti Lewis maschi consanguinei (250-400 g) sono stati utilizzati per tutti gli esperimenti.

1. Chirurgia

  1. Anestetizzare i ratti lewis usando l'inalazione di isoflurano. Indurre l'anestesia con il 5% di isoflurano nella camera di induzione e mantenere l'anestesia con l'inalazione di isoflurano all'1,5-3% attraverso un cono respiratorio.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Risultati

In questo studio a operatore singolo, sono stati eseguiti 30 trapianti di arti parziali eterotopici singenici. Il successo è stato definito al giorno 21 postoperatorio come l'assenza di fallimento del VCA o complicazioni che richiedono l'eutanasia. La normale evoluzione dell'innesto è rappresentata in Figura 3. La durata media per l'approvvigionamento parziale dell'arto e l'innesto nel ricevente sono stati rispettivamente di 35 e 105 minuti; il tempo medio di ischemia è stato di 105 min. Dur.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Discussione

Modelli di trapianto ortotopico di arti nei roditori sono stati descritti in letteratura15,16,17; tuttavia, richiedono una riparazione nervosa, un riattaccamento muscolare e una perfetta osteosintesi del femore, che può essere un passaggio molto difficile. Questi modelli sono anche associati a un più alto tasso di morbilità e mortalità neiroditori 14, specialmente nel follow-up a breve termine in quanto i.......

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Dichiarazioni

Gli autori non hanno divulgazioni.

Ringraziamenti

Questo lavoro è stato sostenuto dall'Ufficio dell'Assistente Segretario alla Difesa per gli Affari Sanitari attraverso il Programma di Ricerca Medica Diretto dal Congresso sotto il Premio No. W81XWH-17-1-0680. Opinioni, interpretazioni, conclusioni e raccomandazioni sono quelle degli autori e non sono necessariamente approvate dal Dipartimento della Difesa.

....

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
24 GA angiocatheterBD Insyte Autoguard381412
sutura 4-0 sutura nera monofilamento non assorbibileEthicon1667Utilizzato per suturare il collare E alla parte posteriore del collo
sutura 4-0 Vicryl Plus AntibattericoEthiconVCP496
Pinza per tessuti Adson, 11 cm, 1 x 2 denti con piattaforma di legaturaASSIASSI.
Corde bipolariASSI228000C
Monofilamento di poliammide nero USP 10-0, 4 mm 3/8cAROSurgicalT04A10N07-13Utilizzato per eseguire le anastomosi microvascolari
Buprenorfina HClPharmaceutical, Inc42023-179-01
Pinze dilatatriciStrumenti per la scienza fine (FST)18131-12
Forbici da dissezione 15 cm, manico rotondo diametro 8 mm, lama conica sottile e diritta 7 mm, modello LipshultzASSIASSI.
Doppi Micro Morsetti 5,5 x 1,5 mmStrumenti per la scienza fine (FST)18040-22
Collare elisabettianoBraintree ScientificEC-R1
Pinze lunghe 13,5 cm, manico piatto, larghe 9 mm Punte dritte diametro 0,1 mm (x2)ASSIASSI. JFL31
Halsey Micro Needle HolderStrumenti per la scienza fine (FST)12500-12
Soluzione di lavaggio con blocco dell'eparina, USP, 100 unità/mLBD PosiFlush306424
IsofluranoPatterson Veterinario14043-704-06
Pinze bipolari per gioiellieri antiaderente 11 cm, punta dritta, diametro della punta di 0,25 mmASSIASSI.
Lone Star Elastic StaysCooperSurgical3314-8GUtilizzato per ritrarre il legamento inguinale per la dissezione dei vasi femorali
Divaricatori autobloccanti Lone StarCooperSurgical3301G
Emostatici Micro-MosquitoStrumenti scientifici (FST)13010-12Utilizzato per ritrarre distalmente
il cuscinetto adiposo inguinalePorta aghi, manico rotondo da 15 cm, diametro 8 mm, ganascia curva superfine diametro punta 0,2 mm, senza bloccoASSIASSI. B1582
Sutura in nylon Monofilamento nero 8-0, 6,5 mm 3/8cEthilon2808GUtilizzato per legare i rami collaterali sui vasi femorali
Tronchesi ossee offsetStrumenti per la scienza fine (FST)16101-10
S& Morsetti vascolari a T 5,5 x 1,5 mmStrumenti per le scienze fini (FST)00398-02
Forbici WaltonStrumenti per le scienze fini (FST)14077-09
ATK26426SAS15RVLBPNS11223

Riferimenti

  1. Lanteiri, L., et al. Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes. American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).
  2. Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T.

Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.

Ristampe e permessi

Tag

Trapianto eterotopicoAllotrapianto di tessuto composto vascolarizzatoModello di trapianto nel rattoTecniche microchirurgichePreservazione dell artoRigetto del graftAnastomosi microvascolareConservazione fredda staticaPerfusione dell arto