Questo documento presenta un protocollo di trapianto di lembi osteomiocutaneo eterotopico parziale nei ratti e i suoi potenziali risultati nel follow-up a medio termine.
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Articolo metodologico
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Questo documento presenta un protocollo di trapianto di lembi osteomiocutaneo eterotopico parziale nei ratti e i suoi potenziali risultati nel follow-up a medio termine.
Gli allotrapianti compositi vascolarizzati (VCA) rappresentano l'opzione di ricostruzione più avanzata per i pazienti senza possibilità chirurgiche autologhe dopo un difetto tissutale complesso. I trapianti di viso e mano hanno cambiato la vita dei pazienti sfigurati, dando loro un nuovo organo sociale estetico e funzionale. Nonostante i risultati promettenti, la VCA è ancora sottoperformata a causa delle comorbidità di immunosoppressione per tutta la vita e delle complicanze infettive. Il ratto è un modello animale ideale per studi in vivo che studiano le vie immunologiche e i meccanismi di rigetto dell'innesto. I ratti sono anche ampiamente utilizzati in nuove tecniche di conservazione dell'innesto di tessuto composito, compresi gli studi di perfusione e crioconservazione. I modelli utilizzati per la VCA nei ratti devono essere riproducibili, affidabili ed efficienti con bassa morbilità e mortalità postoperatoria. Le procedure di trapianto di arti eterotopici soddisfano questi criteri e sono più facili da eseguire rispetto ai trapianti di arti ortotopici. Padroneggiare i modelli microchirurgici dei roditori richiede una solida esperienza nella microchirurgia e nella cura degli animali. Qui è riportato un modello affidabile e riproducibile di trapianto parziale eterotopico di lembi osteomiocutanei nei ratti, gli esiti postoperatori e i mezzi di prevenzione di potenziali complicanze.
Negli ultimi due decenni, VCA si è evoluto come un trattamento rivoluzionario per i pazienti che soffrono di grave deturpazione tra cui viso1, amputazioni degli arti superiori2, pene3e altri difetti tissutali complessi4,5. Tuttavia, le conseguenze dell'immunosoppressione per tutta la vita ostacolano ancora un'applicazione più ampia di questi complessi interventi chirurgici ricostruttivi. La ricerca di base è fondamentale per migliorare le strategie anti-rigetto. Aumentare il tempo di conservazione del VCA è anche essenziale per migliorare ....
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Tutti gli animali hanno ricevuto cure umane in conformità con la Guida NIH per la cura e l'uso degli animali da laboratorio. L'Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC-protocollo 2017N000184) e l'Animal Care and Use Review Office (ACURO) hanno approvato tutti i protocolli sugli animali. Ratti Lewis maschi consanguinei (250-400 g) sono stati utilizzati per tutti gli esperimenti.
1. Chirurgia
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In questo studio a operatore singolo, sono stati eseguiti 30 trapianti di arti parziali eterotopici singenici. Il successo è stato definito al giorno 21 postoperatorio come l'assenza di fallimento del VCA o complicazioni che richiedono l'eutanasia. La normale evoluzione dell'innesto è rappresentata in Figura 3. La durata media per l'approvvigionamento parziale dell'arto e l'innesto nel ricevente sono stati rispettivamente di 35 e 105 minuti; il tempo medio di ischemia è stato di 105 min. Dur.......
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Modelli di trapianto ortotopico di arti nei roditori sono stati descritti in letteratura15,16,17; tuttavia, richiedono una riparazione nervosa, un riattaccamento muscolare e una perfetta osteosintesi del femore, che può essere un passaggio molto difficile. Questi modelli sono anche associati a un più alto tasso di morbilità e mortalità neiroditori 14, specialmente nel follow-up a breve termine in quanto i.......
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Gli autori non hanno divulgazioni.
Questo lavoro è stato sostenuto dall'Ufficio dell'Assistente Segretario alla Difesa per gli Affari Sanitari attraverso il Programma di Ricerca Medica Diretto dal Congresso sotto il Premio No. W81XWH-17-1-0680. Opinioni, interpretazioni, conclusioni e raccomandazioni sono quelle degli autori e non sono necessariamente approvate dal Dipartimento della Difesa.
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| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 24 GA angiocatheter | BD Insyte Autoguard | 381412 | |
| sutura 4-0 sutura nera monofilamento non assorbibile | Ethicon | 1667 | Utilizzato per suturare il collare E alla parte posteriore del collo |
| sutura 4-0 Vicryl Plus Antibatterico | Ethicon | VCP496 | |
| Pinza per tessuti Adson, 11 cm, 1 x 2 denti con piattaforma di legatura | ASSI | ASSI. | |
| Corde bipolari | ASSI | 228000C | |
| Monofilamento di poliammide nero USP 10-0, 4 mm 3/8c | AROSurgical | T04A10N07-13 | Utilizzato per eseguire le anastomosi microvascolari |
| Buprenorfina HCl | Pharmaceutical, Inc | 42023-179-01 | |
| Pinze dilatatrici | Strumenti per la scienza fine (FST) | 18131-12 | |
| Forbici da dissezione 15 cm, manico rotondo diametro 8 mm, lama conica sottile e diritta 7 mm, modello Lipshultz | ASSI | ASSI. | |
| Doppi Micro Morsetti 5,5 x 1,5 mm | Strumenti per la scienza fine (FST) | 18040-22 | |
| Collare elisabettiano | Braintree Scientific | EC-R1 | |
| Pinze lunghe 13,5 cm, manico piatto, larghe 9 mm Punte dritte diametro 0,1 mm (x2) | ASSI | ASSI. JFL31 | |
| Halsey Micro Needle Holder | Strumenti per la scienza fine (FST) | 12500-12 | |
| Soluzione di lavaggio con blocco dell'eparina, USP, 100 unità/mL | BD PosiFlush | 306424 | |
| Isoflurano | Patterson Veterinario | 14043-704-06 | |
| Pinze bipolari per gioiellieri antiaderente 11 cm, punta dritta, diametro della punta di 0,25 mm | ASSI | ASSI. | |
| Lone Star Elastic Stays | CooperSurgical | 3314-8G | Utilizzato per ritrarre il legamento inguinale per la dissezione dei vasi femorali |
| Divaricatori autobloccanti Lone Star | CooperSurgical | 3301G | |
| Emostatici Micro-Mosquito | Strumenti scientifici (FST) | 13010-12 | Utilizzato per ritrarre distalmente |
| il cuscinetto adiposo inguinalePorta aghi, manico rotondo da 15 cm, diametro 8 mm, ganascia curva superfine diametro punta 0,2 mm, senza blocco | ASSI | ASSI. B1582 | |
| Sutura in nylon Monofilamento nero 8-0, 6,5 mm 3/8c | Ethilon | 2808G | Utilizzato per legare i rami collaterali sui vasi femorali |
| Tronchesi ossee offset | Strumenti per la scienza fine (FST) | 16101-10 | |
| S& Morsetti vascolari a T 5,5 x 1,5 mm | Strumenti per le scienze fini (FST) | 00398-02 | |
| Forbici Walton | Strumenti per le scienze fini (FST) | 14077-09 |
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