JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Microbiologia
0 visualizzazioni • 2:59 min. • August 31st, 2026
Prelevare una pianta di patata coltivata in vitro.
Successivamente, utilizzare Agrobacterium ricombinante, un patogeno vegetale contenente un DNA di trasferimento (T-DNA).
Il T-DNA trasporta un genoma completo del virus X della patata, modificato per codificare un RNA non codificante in grado di sequestrare specifici microRNA vegetali.
Infiltrare le foglie con i batteri e graffiare il fusto con un bastoncino di legno ricoperto di batteri.
Nel sito di inoculazione, i batteri escindono il T-DNA e lo trasferiscono come DNA a singolo filamento nelle cellule vegetali.
Utilizzando il macchinario dell'ospite, il T-DNA produce RNA genomico virale, che si replica ed esprime RNA non codificanti e proteine virali.
L'RNA non codificante si lega ai microRNA vegetali bersaglio, impedendo loro di legarsi agli mRNA bersaglio e innescando difetti nello sviluppo.
Nel frattempo, gli RNA genomici virali formano complessi ribonucleoproteici che si diffondono sistemicamente attraverso i plasmodesmi, consentendo il silenziamento dei microRNA in tutta la pianta.
Anomalie fogliari, inclusi accrescimenti ectopici e foglie a forma di tromba, indicano il ruolo nello sviluppo dei microRNA silenziati.
Quando la densità
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