Name: Leishmaniosi cutanea nella pelle dorsale di criceti: un modello utile per lo screening delle droghe Antileishmanial (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 36 s
Description: Impara l'inoculazione intradermica di promastigoti di Leishmania nella pelle dorsale del criceto per studiare la leishmaniosi cutanea. Questo modello ottimizzato migliora la caratterizzazione delle lesioni e lo screening di farmaci antileishmaniali preservando il benessere animale.

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Questo studio è stato sostenuto dalle concessioni dal Comitato per la Ricerca presso l&#39;Università di Antioquia (CODI), l&#39;Istituto Colombiano per lo sviluppo di Scienza e Tecnologia - COLCIENCIAS e il Centro per lo sviluppo dei prodotti contro le malattie tropicali - CIDEPRO.

<ol><li>WHO. Control of the leishmaniasis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Report+of+a+Meeting+of+the+WHO+Expert+Committee+on+the+Control+of+Leishmaniasis+WHO%22">Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO</a>. 949, (2010).</li>
<li>Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+limiting+dilution+assay+for+quantifying+Leishmania+major+in+tissues+of+infected+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice.</a> Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).</li>
<li>Reynolds, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Kodak+Ektachem+dry+layer+technology+for+clinical+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Upsala.+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry.</a> Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).</li>
<li>Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cutaneous+leishmaniasis%3A+disease+patterns+in+intact+and+nude+mice+of+various+genotypes+and+examination+of+some+differences+between+normal+and+infected+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Australian+J.+Exp.+Biol.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages.</a> Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).</li>
<li>Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis+lesions+and+relationship+of+numbers+of+amastigotes+to+lesion+area+antimony-treated+and+untreated+hamsters%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters.</a> J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).</li>
<li>Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+toxicity+of+pentavalentantimonials+%28Glucantime+and+Pentostam%29+in+an+American+cutaneous+leishmaniasis+animal+model%3A+luminometry+application%5BTitle%5D)+AND+%22Biom%C3%A9dica%22%5BJournal%5D)">Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application.</a> Biomédica. 24, 393-402 (2004).</li>
<li>Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimonial+treatment+of+hamsters+infected+with+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis%3A+assessment+of+parasitological+cure+with+different+therapeutic+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Trans.+R.+Soc.+Trop.+Med.+Hyg%22%5BJournal%5D)">Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules.</a> Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).</li>
<li>Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+for+leishmaniasis+and+for+testing+anti-leishmanial+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Trop.+Med.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines.</a> Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inflammatory+response+promotes+cutaneous+metastasis+in+hamsters+infected+with+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis.</a> J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+Albendazole+as+an+alternative+treatment+of+cutaneous+Leishmaniasis+in+the+hamster+model%5BTitle%5D)+AND+%22Memorias+Instituto+Oswaldo%22%5BJournal%5D)">Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model.</a> Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515(1998).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+is+a+major+determinant+of+the+clinical+evolution+and+immune+response+in+hamsters+infected+with+Leishmania+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp.</a> Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).</li>
<li>Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+site+of+cutaneous+infection+influences+the+immunological+response+and+clinical+outcome+of+hamsters+infected+with+Leishmania+panamensis%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis.</a> Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).</li>
<li>Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+enhances+the+innate+immune+response+in+experimental+cutaneous+leishmaniasis+through+hormone-modulated+nitric+oxide+production%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Leukoc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production.</a> J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).</li>
<li>Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duplex+real-time+reverse+transcriptase+PCR+to+determine+cytokine+mRNA+expression+in+a+hamster+model+of+New+World+cutaneous+leishmaniasis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Immunol%22%5BJournal%5D)">Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis.</a> BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).</li>
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Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.

Leishmaniosi cutanea è endemica nelle regioni tropicali ed neotropicale. E &#39;spesso definito come un gruppo di malattie a causa del variegato spettro di manifestazioni cliniche, che vanno da piccoli noduli cutanei lordo distruzione dei tessuti della mucosa. Maggior parte dei farmaci disponibili sono costose, richiedono regimi di trattamento a lungo e stanno diventando sempre più inefficace, rendendo necessaria la scoperta di nuovi farmaci. Il modello di topo è ampiamente utilizzato, ma pr...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reattivo </td><td> Tipo </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td> Ketamina </td><td> Reagente </td><td> Holliday-Scott SA </td><td></td></tr><tr><td> Xilacine </td><td> Reagente </td><td> Sintesi </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td> Reagente </td><td> GIBCO </td><td> 14190-136 </td></tr><tr><td> Calibro digitale </td><td> Attrezzatura </td><td> Pescatore </td><td> 15-077-958 </td></tr><tr><td> Giemsa </td><td> Reagente </td><td> SIGMA </td><td> GS1L-1L </td></tr><tr><td> Formalina </td><td> Reagente </td><td> Nova lab </td><td> 11273 </td></tr><tr><td> Paraffina </td><td> Reagente </td><td> Pechiney Plastic Packaging </td><td> PM-996 </td></tr><tr><td> Haemotoxilin </td><td> Reagente </td><td> Nova lab </td><td&gt; 10870103 </td></tr><tr><td> Eosina </td><td></td><td> Nova lab </td><td> 10870203 </td></tr><tr><td> Kodak Ektachem chimica a secco </td><td> Attrezzatura </td><td> Kodak Ektachem </td><td> DT-60 </td></tr><tr><td> meglumina antimoniato </td><td> Reagente </td><td> Aventis </td><td></td></tr><tr><td> Microscopia </td><td> Attrezzatura </td><td> Nikon </td><td> YS2-T </td></tr></tbody></table>

leishmaniosi cutanea nella pelle dorsale di criceti: ​​un modello utile per lo screening delle droghe antileishmanial

Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs

Tradizionalmente, i criceti sono sperimentalmente inoculati nel muso o la zampa. Tuttavia, in questi siti non si verifica sempre l&#39;ulcera, la misurazione della dimensione della lesione è una procedura difficile e animali mostrano difficoltà a mangiare, respirare e muoversi a causa della lesione. Per ottimizzare il modello criceto per la leishmaniosi cutanea, maschio e femmina adulti giovani criceti dorati (Mesocricetus auratus) sono stati iniettati per via intradermica alla pelle dorsale con da 1 a 1,5 x l0 7 promastigoti di Leishmania e la progressione di lesioni successive sono state valutate sino a 16 settimane post infezione. Il criceto dorato è stato scelto perché è considerato il adeguate bio-modello per valutare i farmaci contro la Leishmania in quanto sono suscettibili alle infezioni da specie diverse. Infezione cutanea dei risultati criceti nelle lesioni croniche ma controllata, e una evoluzione clinica con segni simili a quelli osservati negli esseri umani. Pertanto, l&#39;istituzione of l&#39;estensione dell&#39;infezione misurando la dimensione della lesione in base alla zona di indurimento e ulcere è fattibile. Questo approccio ha dimostrato la sua versatilità e facilità di gestione durante l &#39;inoculazione, follow-up e caratterizzazione delle lesioni tipiche (ulcere), l&#39;applicazione di trattamenti in diversi modi e di ottenere dei campioni clinici dopo diversi trattamenti. Utilizzando questo metodo la qualità della vita animale per quanto riguarda la locomozione, la ricerca di cibo e acqua, il gioco e le attività sociali isalso conservati.

Ottimizzazione del modello sperimentale per criceto leishmaniosi cutanea da iniezione intradermica di<em&gt; Leishmania</em&gt; Promastigoti la pelle dorsale. Questo approccio è utile durante l &#39;inoculazione, il follow-up, la caratterizzazione delle lesioni, l&#39;applicazione di trattamenti e di ottenere dei campioni clinici. Locomotion, ricerca di cibo e acqua, attività ludiche e sociali sono conservati.

Leishmaniosi cutanea nella pelle dorsale di criceti: ​​un modello utile per lo screening delle droghe Antileishmanial

Tradizionalmente, i criceti vengono inoculati sperimentalmente nel muso o nel polpastrello. Tuttavia, in questi siti non si verifica sempre la formazione di un'ulcera; la misurazione di...

Al fine di ottimizzare il modello del criceto per la leishmaniosi cutanea, qui descriviamo un approccio che prevede l'inoculazione intradermica di promastigoti nel dorso della cute. Questo approccio ha dimostrato la propria versatilità e facilità di gestione durante l'inoculazione, il follow-up e la caratterizzazione delle lesioni tipiche, l'applicazione di trattamenti mediante diverse vie, il prelievo di campioni paraclinici, l'acquisizione di dati sui diversi composti promettenti, senza comportare un significativo peggioramento della qualità della vita del modello.Per quanto riguarda la locomozione, la ricerca di cibo e acqua, il gioco e l'attività sociale, si devono eseguire movimenti con attenzione, sicuri e stabili; l'animale deve essere immobilizzato alla base del collo utilizzando le dita, sfruttando la grande quantità di pelle presente nel criceto. Il palmo della mano viene utilizzato per offrire all'animale una superficie di appoggio in cui si senta a proprio agio. Una volta che l'animale si sente rilassato, la pelle del collo e delle guance può essere stirata con l'indice e il pollice, mentre con le restanti dita si tiene saldamente la pelle della sacca contro il palmo, i

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Un test Parasite salvataggio e di trasformazione per screening Antileishmanial contro intracellulare<em&gt; Leishmania donovani</em&gt; Amastigoti in THP1 umana linea cellulare Leucemia acuta Monocytic

Questo articolo riporta un metodo dettagliato per la misurazione dinamica e la quantificazione della velocità del flusso sanguigno all'interno dei singoli vasi sanguigni del sistema vascolare epatico di topo utilizzando l'imaging al microscopio intravitale in combinazione con una metodologia specifica per l'acquisizione e l'analisi delle immagini.

Intravitale Microscopia Imaging del Fegato seguente<em&gt; Leishmania</em&gt; Infezione: Valutazione della epatiche Emodinamica

Qui, presentiamo un protocollo compilato per valutare l'infezione cutanea dei topi con Leishmania amazonensis. Questo è un metodo affidabile per studiare la virulenza dei parassiti, consentendo una visione sistemica della risposta dell'ospite vertebrato all'infezione.

Infezione in vivo con Leishmania amazonensis per valutare la virulenza dei parassiti nei topi

Qui, descriviamo la metodologia utilizzata per generare ceppi di L. panamensis e L . donovani che esprimono il gene per eGFP come transgene integrato stabile utilizzando il sistema pLEXSY. I parassiti trasfettati sono stati clonati limitando la diluizione e i cloni con la più alta intensità di fluorescenza in entrambe le specie sono stati selezionati per un ulteriore utilizzo nei saggi di screening farmacologico.

Sviluppo di ceppi di specie di Leishmania con espressione costitutiva di eGFP

Qui presentiamo una valutazione longitudinale di criceti dorati infettati per via intraperitoneale (IP) o per via intragengivale (IG) con L. infantum-Luc mediante imaging bioluminescente e mediante PCR. I criceti sono stati valutati 1 giorno dopo l'infezione (1 dpi), 1 settimana dopo l'infezione (8 dpi) e 3 settimane dopo l'infezione (22 dpi) e soppressi al 50° dpi e 8 mesi dopo l'infezione.

In vivo Imaging di criceti infetti da Leishmania infantum mediante inoculazione gengivale di amastigoti axenici che esprimono luciferasi

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Impara l'inoculazione intradermica di promastigoti di Leishmania nella pelle dorsale del criceto per studiare la leishmaniosi cutanea. Questo modello ottimizzato migliora la caratterizzazione delle lesioni e lo screening di farmaci antileishmaniali preservando il benessere animale.

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