Name: Modello Rat di emato-encefalica Turbativa Barriera per consentire mirato Therapeutics neurovascolare (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-30T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 43 s
Description: Impara a disgregare la barriera emato-encefalica nel ratto per migliorare la somministrazione di farmaci al cervello. Questo metodo utilizza mannitolo intra-arterioso e permette di testare terapie con scarsa permeabilità cerebrale.

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Questo lavoro è stato sostenuto dalla Fondazione Marshall JB.

1. Preparare animale e l&#39;attrezzatura per la procedura <ol><li> Prima di iniziare l&#39;intervento chirurgico, preparare l&#39;area chirurgica e l&#39;animale. Rendere il catetere carotide inserendo un ago di calibro 23 smussata in un&#39;estremità 12 &quot;di PE50 tubi. Tagliare uno smusso di circa 45 ° alla estremità opposta del catetere. Sterilizzare le attrezzature prima della procedura. Indossare un cofano capelli, maschera chirurgica e guanti sterili. </li><li> Posizionare una piastra elettrica sulla superficie dove l&#39;intervento verrà eseguito. Attivare e lasciarlo riscaldare. Coprire l&#39;area con un tampone assorbente panca. </li><li> Verificare di avere il 25% di mannitolo in soluzione senza cristalli. Se sono presenti cristalli, scioglierle ponendo la provetta in un bagno di acqua calda a 80 ° C e agitando periodicamente. </li><li> Registrare la massa dell&#39;animale. </li><li> Effettuare una diluizione propofol per la consegna a 0,8 mg / kg / min ad una velocità di 0,1 ml / min. </li><li> Posizionare il topo nella casella induzione per 3 min. Regolazioni: 5% isoflurano, 2 L / minportata sul ventilatore. </li><li> Sulla cima di un asciugamano usa e getta, la barba al collo e due cosce. </li></ol> 2. Intubare il Ratto <ol><li> Posizionare il retro animale nella scatola induzione per 3 min. </li><li> Prepara il tuo tubo endotracheale con un catetere IV. Per queste dimensioni e ceppo di ratti, si usa un 18 ga catetere. Il tubo deve essere sufficientemente grande da consentire un flusso d&#39;aria, ma abbastanza piccolo da entrare nella trachea senza causare danni. Estrarre il ago del catetere di plastica e con attenzione rompere il ca ago. 1 cm dalla punta affilata. L&#39;ago bunted sarà lo stilo. Rimettere il ago nel catetere. </li><li> Appendere il topo dai denti su una superficie angolata. </li><li> Shine a luce direttamente sul collo dell&#39;animale e allineati tra le sue orecchie. </li><li> Inserire un ca piccola spatola. 3 centimetri nel dell&#39;orofaringe. Sollevare verso l&#39;alto, mentre tirando delicatamente la lingua fuori dalla bocca. </li><li> Visualizzare l&#39;apertura della trachea. Potrai seforo ea piccolo aprire e chiudere con ogni respiro. </li><li> Inserire delicatamente catetere nel foro. A volte si può sentire la plastica entra la cartilagine della trachea. La trachea è sensibile. Non forzare il catetere. </li><li> Impostare il ventilatore a 1 L / min e 60 bpm e l&#39;isoflurano al 2%. </li><li> Collegare il catetere al ventilatore e il tubo nastro alla superficie operativa. </li><li> Verificare che l&#39;animale è anestetizzato eseguendo un pizzico punta. </li></ol> 3. Stabilire Propofol Anestesia IV <ol><li> Fissare il topo con nastro adesivo tutti e quattro gli arti e la coda alla superficie operativa. </li><li> Scrub al collo rasato e siti inguine con clorexidina sapone tre volte. Poi strofinare con clorexidina lavare tre volte. </li><li> Collegare una siringa di propofol a un set di prolunga IV. Montare la siringa su una pompa per infusione. </li><li> Utilizzando un bisturi, tagliare la pelle della coscia rasata. Evitare di tagliare muscolare. </li><li> Aprire l&#39;incisione con la forzaps per visualizzare la vena femorale. </li><li> Tirare via il tessuto sopra l&#39;arteria per esporre il vaso. </li><li> Inserire un ga 26 Monoject veterinario IV catetere nella vena. Quando l&#39;ago perfora la parete della vena vi sentirete diventa più facile da spingere. Ritrarre l&#39;ago e spingere il catetere nel vaso. </li><li> Avviare l&#39;infusione di propofol a 0.1 ml / min. </li><li> 3-5 minuti dopo l&#39;inizio dell&#39;infusione propofol, passare il gas anestesia ad una miscela di 50% O 2 e 50% N 2 O e spegnere il isoflurano. </li></ol> 4. Esporre la biforcazione della carotide comune <ol><li> Effettuare una incisione mediana al collo con lama di bisturi. </li><li> Tagliare tra le due grandi ghiandole salivari con le forbici o bisturi. </li><li> Dissect lontano tessuto lateralmente alla linea mediana per esporre l&#39;arteria carotide. Usare pinze per aprire strati di tessuto. È possibile usare le forbici per rimuovere pezzi che si espongono con la pinza e determinare di essere minimally vascolare. Controllare l&#39;emorragia con una garza, tamponi di cotone, e cauterizzazione se necessario. </li><li> Iniettare 3 IP ml di soluzione salina, se non vi è stata da moderata a gravi emorragie. </li><li> Utilizzare divaricatori per estrarre il tessuto dalla carotide. Trova la biforcazione. </li><li> Esporre l&#39;arteria occipitale appena distalmente alla biforcazione. Cauterize esso tra pinza e separarlo con un elettrocauterizzazione. </li><li> Utilizzare pinze per esporre completamente la biforcazione carotidea e quanto più possibile l&#39;ECA. </li><li> Esporre l&#39;arteria tiroidea superiore si dirama la Corte dei conti distale all&#39;arteria occipitale. Cauterize esso tra pinza e separarlo con un elettrocauterizzazione. </li></ol> 5. Cateterismo dell&#39;arteria carotide esterna <ol><li> Mettere 2 lunghezze di 4/0 di seta sotto la Corte dei conti. </li><li> Prendete 1 lunghezza di sutura con la pinza emostatica e ritrarre la Corte dei conti torna caudalmente (verso i piedi del ratto). </li><li> Prendete l&#39;altra sutura e cravatta fino cranialmente (verso la bocca del ratto) possibile wesima di un chirurgo nodo. Questo forma una legatura permanente a sacrificare la Corte dei conti. </li><li> Rimuovere la pinza emostatica primo (quello che è stato l&#39;applicazione di tensione caudale) e afferrare la sutura altro (quello che si annoda intorno alla Corte dei conti) e applicare leggera tensione cranialmente con la pinza emostatica. </li><li> Tie un altro nodo del chirurgo vagamente (non garantiscono - lasciano poco legato) distale alla biforcazione e prossimale alla legatura permanente. </li><li> Irrigare con 1% di lidocaina per rilassarsi l&#39;arteria. </li><li> Riempi il tuo catetere con soluzione fisiologica eparinizzata. </li><li> Posizionare una clip temporanea vaso più vicino possibile alla biforcazione. Posto fermaglio nave ad un angolo di massimizzare lo spazio per la cateterizzazione. Far scorrere il nodo sciolto verso la clip. </li><li> Fai un piccolo arteriotomia (taglio) in ECA appena prossimale alla legatura con microforbici. Non ci dovrebbero essere sanguinamento se la clip e la legatura sono al sicuro. </li><li> Utilizzando pinze per controllare le pareti ECA, alimentare la estremità smussata del catetere nel vaso. </li&gt; <li> Fissare il catetere con il nodo allentato sutura. Legare l&#39;arteria intorno al catetere. </li><li> Rimuovere la clip e pulire la zona con un batuffolo di cotone. </li><li> Avanzare il catetere di circa 1 mm distalmente alla biforcazione. Tenere l&#39;arteria con pinze prossimali al nodo di garantire la nave è immobilizzato. </li></ol> 6. Somministrare mannitolo <ol><li> Riempire un 8 &quot;set di estensione IV e una siringa da 6 ml con il mannitolo senza creare bolle d&#39;aria Conservare questo in incubatore a 37 ° C. Nota: il lavoro rapidamente con mannitolo - sarà facilmente precipitare dalla soluzione a temperatura ambiente.. </li><li> Al fine di visualizzare BBBD, si può somministrare Evans colorante blu e vederlo entrare nelle zone del cervello dove la barriera è stata interrotta. Per fare questo, dare all&#39;animale 2 ml / kg del 2% Blu di Evans attraverso un nuovo sito IV sulla gamba controlaterale alla infusione di propofol. </li><li> Collegare il set di prolunga a un micron 5 Eliminare filtro e riempirlo con il mannitolo per rimuovere le bolle d&#39;ariaBles. Quindi, fissare questo al rubinetto senza creare bolle. </li><li> Somministrare mannitolo a 0,09 ml / sec per 25 sec. Guardare per il mannitolo per raggiungere l&#39;equilibrio con il flusso nella carotide comune in un punto appena prossimale al ICA. Dovrebbe apparire a impulsi con la frequenza cardiaca del ratto. Se il mannitolo scorre semplicemente verso il cuore aver superato la pressione del ratto. Ciò può causare complicanze potenzialmente letali e BBBD poveri. </li></ol>

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<li>Neuwelt, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+CNS+lymphoma+treated+with+osmotic+blood-brain+barrier+disruption%3A+prolonged+survival+and+preservation+of+cognitive+function%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+clinical+oncology%22%5BJournal%5D)">Primary CNS lymphoma treated with osmotic blood-brain barrier disruption: prolonged survival and preservation of cognitive function.</a> Journal of clinical oncology. 9, 1580(1991).</li>
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<li>Neuwelt, E. A., Pagel, M. A., Kraemer, D. F., Peterson, D. R., Muldoon, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow+chemoprotection+without+compromise+of+chemotherapy+efficacy+in+a+rat+brain+tumor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Bone marrow chemoprotection without compromise of chemotherapy efficacy in a rat brain tumor model.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 309, 594-599 (2004).</li>
</ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Ci sono pochi mezzi di massimizzare l&#39;efficacia di BBBD. È importante ridurre al minimo il sanguinamento durante la fase di cut-down. La pressione sanguigna e la frequenza cardiaca può essere influenzata da sanguinamento sostanziale e questi fattori sono noti per influenzare il grado di BBBD 13. Sanguinamento può essere ridotto utilizzando suture per legare vasi grandi, come la tiroide superiore e arterie occipitali, che devono essere divisi. Inoltre, elettrocauterizzazione può essere utilizzato per divid...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del materiale </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Commento </td></tr><tr><td> Lungo Evans ratto </td><td> Harlan Laboratories </td><td></td><td> 210-250 g, di sesso maschile </td></tr><tr><td> PE 50 Tubi </td><td> Beckton-Dickinson </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Calibro 18 x 2.5 &quot;catetere IV </td><td> Terumo </td><td></td><td> Per tubo endotracheale </td></tr><tr><td> 30 &quot;estensione IV imposta </td><td> Abbott </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 26 calibro catetere IV veterinario </td><td> Monoject </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Evans colorante blu </td><td> Sigma </td><td> E2129 </td><td></td></tr><tr><td> Bipolare </td><td> Codman </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Filtro, 5 micron </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

modello rat di emato-encefalica turbativa barriera per consentire mirato therapeutics neurovascolare

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Cellule endoteliali con giunzioni strette insieme con la membrana basale e piedi finali astrociti circondano vasi sanguigni cerebrali per formare la barriera emato-encefalica 1. La barriera esclude selettivamente molecole di attraversare tra il sangue e il cervello in base alla loro dimensione e carica. Questa funzione può impedire l&#39;erogazione di terapie per disturbi neurologici. Un certo numero di farmaci chemioterapici, per esempio, non viene effettivamente attraversare la barriera emato-encefalica per raggiungere le cellule tumorali 2. Quindi, migliorare l&#39;erogazione di farmaci attraverso la barriera sangue-cervello è una zona di interesse. I metodi più diffusi per migliorare la consegna di farmaci al cervello sono diretti infusione cerebrale e barriera emato-encefalica interruzione 3. Diretti garanzie infusione intracerebrale che le terapie arrivano al cervello, tuttavia, questo metodo ha una limitata capacità di disperdere il farmaco 4. Emato-encefalica perturbazione barriera (BBBD) alfarmaci bassi di fluire direttamente dal sistema circolatorio nel cervello e quindi più efficace raggiungere dispersi cellule tumorali. Tre metodi di interruzione barriera includono interruzioni osmotica barriera, barriera interruzione farmacologica, e ultrasuoni focalizzati con microbolle. Interruzione osmotica, introdotta da Neuwelt, utilizza una soluzione ipertonica di 25% mannitolo che disidrata le cellule della barriera sangue-cervello facendoli restringersi e distruggere le loro giunzioni strette. Interruzione barriera può anche essere realizzato con composti farmacologicamente vasoattive quali l&#39;istamina e bradichinina 5 6. Questo metodo, tuttavia, è selettivo principalmente per il cervello-tumorale barriera 7. Inoltre, RMP-7, un analogo del peptide bradichinina, è risultata essere inferiore rispetto testa a testa con BBBD osmotico con 25% di mannitolo 8. Un altro metodo, ultrasuoni focalizzati (FUS) in combinazione con agenti di microbolle di contrasto ad ultrasuoni, è stato anche dimostratoper aprire reversibilmente la barriera emato-encefalica 9. Rispetto al FUS, però, il 25% mannitolo ha una storia più lunga di sicurezza in pazienti umani che lo rende uno strumento collaudato per la ricerca traslazionale 10-12. Al fine di realizzare BBBD, mannitolo devono essere consegnati a un tasso elevato direttamente nella circolazione arteriosa del cervello. Negli esseri umani, un catetere endovascolare è guidato al cervello dove rapida, flusso diretto può essere realizzato. Questo protocollo modelli umana BBBD più possibile. A seguito di un cut-down alla biforcazione della carotide comune, un catetere viene inserito retrogrado nella CCE e usati per fornire mannitolo direttamente nell&#39;arteria carotide interna (ICA) circolazione. Propofol e N 2 O anestesia vengono utilizzati per la loro capacità di massimizzare l&#39;efficacia di interruzione barriera 13. Se eseguito correttamente, questa procedura ha la capacità di in modo sicuro, efficace e reversibile aprire la barriera emato-encefalica e improvvisazionee l&#39;erogazione di farmaci che ordinariamente non raggiungono il cervello 8,13,14.

<img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/50019/50019fig1.jpg" /> Figura 1. Visualizzazione ematoencefalica interruzione barriera via stravaso Evans colorante blu. Evans blue colorante è un pigmento che si lega all&#39;albumina e non stravaso nel cervello in condizioni fisiologiche. Perturbazione della barriera ematoencefalica su un lato del cervello Evans blue permette di entrare e macchiare l&#39;azzurro emisfero interrotto mentre l&#39;emisfero non perturba...

Emato-encefalica perturbazione barriera favorisce l&#39;erogazione di alcuni farmaci al cervello. Mannitolo consegnato intra-arteriosa cellule restringe i vasi sanguigni circostanti, al fine di distruggere fisicamente la barriera.

Modello Rat di emato-encefalica Turbativa Barriera per consentire mirato Therapeutics neurovascolare

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di interrompere la barriera emato-encefalica. Ciò si ottiene ponendo prima l'animale in anestesia endotracheale con una via aerea endotracheale. Successivamente, viene esposta la biforcazione dell'arteria carotide comune.Quindi un catetere viene inserito nell'arteria carotide esterna. Infine, viene somministrato il mannitolo. In definitiva, si possono ottenere risultati che mostrano la rottura della barriera emato-encefalica attraverso lo stravaso del colorante blu di Evan.Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti di terapia intra-arteriosa è che consente l'ingresso nel cervello di farmaci che normalmente non attraversano la barriera emato-encefalica in condizioni fisiologiche. Questo ha implicazioni nel campo delle neuroscienze perché ci permette di testare nuove terapie che hanno una scarsa capacità di attraversare la barriera emato-encefalica. Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla neuro-oncologia perché molti agenti chemioterapici non attraversano la barriera emato-encefalica.Bene, sebbene questo metodo ci fornisca informazioni sulla nuova oncologia, può anche fornirci informazioni su altri disturbi neurologici trattati con farmaci con scarsa permeabilità della barriera ematoencefalica. Ci auguriamo che la dimostrazione visiva di questo metodo consenta ai ricercatori e alla familiarità con la chirurgia animale di utilizzare questa tecnica nei loro laboratori. Per iniziare, prepara una soluzione di mannitolo al 25% e verifica che non ci siano cristalli.Se sono presenti cristalli, scioglierli mettendo la fiala in un bagno d'acqua a 80 gradi Celsius e agitare. Registrare periodicamente la massa dell'animale e preparare due siringhe da 12 cc di propofol da erogare a una velocità di 0,1 millilitri al minuto. Dopo aver anestetizzato l'animale in una camera di induzione, posizionarlo su un asciugamano usa e getta e radergli il collo e l'interno coscia.Rimetti l'animale nella camera di induzione per tre minuti. Per prepararsi all'intubazione per intubare il ratto, iniziare preparando un tubo endotracheale con un catetere IV. Il tubo deve essere abbastanza grande da consentire un flusso d'aria adeguato, ma abbastanza piccolo da entrare nella trachea senza causare danni.Per creare uno stilo, estrarre l'ago dal catetere di plastica e rompere con cautela l'ago. A circa un centimetro dalla sua punta affilata, reinserire l'ago nel catetere. Quindi, appendi il topo per i denti su una superficie angolata, accendi una luce direttamente contro il collo dell'animale allineato tra le sue orecchie.Quindi, inserisci una piccola spatola nell'orofaringe. Circa tre centimetri. Sollevare verso l'alto mentre si estrae delicatamente la lingua dalla bocca.Visualizza l'apertura della trachea come un piccolo foro che si apre e si chiude. Ad ogni respiro, inserire delicatamente il catetere nel foro, facendo attenzione a non forzarlo nella cartilagine della trachea sensibile. Impostare il ventilatore a un litro al minuto e 60 BPM e poi il fluoro al 2%, quindi collegare il catetere al ventilatore e fissare il tubo alla superficie operativa.Verificare che l'animale sia anestetizzato eseguendo un pizzicamento delle dita. Fissare il percorso fissando con nastro adesivo tutti e quattro gli arti della coda alla superficie operativa. Strofina tre volte il collo rasato e i siti inguinali con sapone alla clorexidina.Quindi strofinare con clorexidina. Risciacquare tre volte. Collegare una siringa di propofol a un set di prolunga per flebo e montare la siringa sulla pompa di infusione.Successivamente, usando un bisturi, tagliare la pelle della coscia rasata senza tagliare il muscolo. Quindi usa una pinza per aprire l'incisione e localizzare la vena femorale e tirare via il tessuto sopra l'arteria per esporre il vaso. Inserire un catetere endovenoso veterinario mono eiezione da 26 G nella vena.Una volta che l'ago perfora la parete della vena, diventerà più facile spingere. Ritrarre l'ago e spingere il catetere nel vaso da tre a cinque minuti. Dopo aver iniziato l'infusione di propofol, passare il gas anestetico a una miscela di 50% O2 e 50% N due O e spegnere l'isoffluoro.Per esporre la biforcazione dell'arteria carotide comune, inizia usando una lama di bisturi per praticare un'incisione sulla linea mediana sul collo. Tagliare la plancia superficiale lungo la linea mediana per raggiungere il muscolo ioide sternale sopra la trachea. Sposta il tessuto lateralmente per visualizzare un gruppo di tre muscoli, lo ioide sternale, il gastrico e il mastoideo sternale che formavano il triangolo carotideo del ratto con una pinza o una forbice.Separare la fascia tra i muscoli del triangolo carotideo per esporre l'arteria carotide. Usa il cauterismo bipolare per dividere i vasi minori insieme a garze e tamponi di cotone Per controllare l'emorragia, usa i divaricatori per tenere separati i muscoli con una pinza. Sposta il tessuto fuori dalla carotide e trova la biforcazione.Esporre l'arteria occipitale appena distale alla biforcazione. Cauterizzarlo tra una pinza e l'altra e utilizzare un elettrocauterizzazione per separarlo con una pinza. Esporre completamente la biforcazione carotidea e la maggior parte possibile dell'arteria carotide esterna o ECA.Esporre l'arteria tiroidea superiore che si dirama dall'ECA distalmente all'arteria occipitale. Cauterizzarlo tra una pinza e separarlo per cateterizzare l'ECA. Metti due lunghezze di seta da quattro sotto di essa.Usa un emostatico e afferra un pezzo di sutura e ritrai il coly posteriore ECA con l'altra sutura. Legalo con il nodo del chirurgo il più possibile craniale, distalmente alla biforcazione e prossimalmente alla legatura permanente. Lega senza stringere il nodo di un altro chirurgo per rilassare l'arteria.Irrigarlo con lidocaina all'1%, riempire il catetere con soluzione fisiologica eparinizzata. Quindi, posizionare una clip temporanea per vasi con un angolo il più vicino possibile alla biforcazione. Quindi fai scorrere il nodo sciolto verso la clip usando le micro forbici.Fai un piccolo taglio nell'ECA appena prossimalmente alla legatura. Se la clip e la legatura sono sicure, non dovrebbero esserci sanguinamenti con il forcipe. Per controllare le pareti dell'ECA, inserire l'estremità smussata del catetere nel vaso con il nodo del chirurgo allentato.Fissare il catetere. Legare l'arteria attorno al catetere, quindi rimuovere la clip e utilizzare un batuffolo di cotone per pulire l'area. Far avanzare il catetere di circa un millimetro distalmente alla biforcazione.Usa una pinza per tenere l'arteria prossimale al nodo per assicurarti che il vaso sia immobilizzato. Per somministrare il mannitolo. Riempi un set di prolunga IV da otto pollici e una siringa da sei millilitri con mannitolo senza creare bolle d'aria.Conservarlo a 37 gradi Celsius per visualizzare l'interruzione della barriera emato-encefalica, o BBBD somministrare due milligrammi per chilogrammo di Evans Blue al 2% attraverso un nuovo sito IV sulla gamba controlaterale all'infusione di propofol. Collegare il set di prolunga a un filtro da cinque micron e riempirlo di minol per rimuovere le bolle d'aria. Quindi attaccarlo al rubinetto di arresto senza creare bolle.Somministrare mannitolo a 0,09 millilitri al secondo Per 25 secondi, osservare che il mannitolo raggiunga l'equilibrio con il flusso nella carotide comune in un punto appena prossimale all'arteria carotide interna, dovrebbe sembrare pulsare con la frequenza cardiaca del ratto. Assicurarsi che il mannitolo non fluisca verso il cuore, il che indica che il flusso ha superato la pressione sanguigna del ratto e può causare gravi complicazioni. La rottura della barriera emato-encefalica su un lato del cervello consente al blu di Evan di entrare e colorare di blu l'emisfero distrutto, mentre l'emisfero non distruttivo rimane invariato.Qui è mostrato un esempio di un cervello senza interruzione della barriera emato-encefalica o BBBD, e qui c'è un esempio di un cervello colorato di blu dopo BBBD osmotica, notare che l'emisfero destro è colorato e che un po' di blu è entrato nell'emisfero sinistro vicino alla fessura longitudinale mediale a causa del mescolamento del flusso sanguigno nel cerchio di Willis. Questa tecnica apre la strada ai ricercatori per esplorare terapie che non attraversano la barriera emato-encefalica in un modello di ratto. Dopo aver visto questo video, dovresti essere in grado di interrompere la barriera cerebrale offuscata cateterizzando l'arteria carotide e infondendo una soluzione di manitolo direttamente nel cervello.

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Microbolle-mediata interruzione ultrasuoni focalizzati della barriera ematoencefalica (BBB) ​​è una tecnica promettente per non invasiva somministrazione di farmaci mirati nel...

MRI-guidato Interruzione della barriera emato-encefalica transcranica con ultrasuoni focalizzati in un modello murino

In questo video, descriviamo un protocollo completo per stabilire un modello in vitro che imita la barriera tumorale emato-encefalica. Il modello è promettente per comprendere la somministrazione di agenti terapeutici per il trattamento dei tumori cerebrali.

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Istituzione di modelli umani della barriera emato-encefalica (BBB) ​​può beneficiare la ricerca sulle condizioni del cervello connesse con il fallimento BBB. Descriviamo qui una tecnica migliorata per la preparazione di un modello BBB contatto, che consente coculturing di astrociti e cellule endoteliali cervello sui lati opposti di una membrana porosa.

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Lo scopo di questo studio era di convalidare la riproducibilità di un modello in vitro BBB coinvolge un singenici ratto co-coltura delle cellule endoteliali e astrociti. Il monostrato di cellule endoteliali presentato TEER alta e bassa permeabilità LY. Espressione di proteine ​​TJ specifici, sono state valutate le risposte funzionali ai infiammazione e la funzionalità dei trasportatori e recettori.

Istituzione di un<em&gt; In Vitro</em&gt; Modello di Rat barriera emato-encefalica (BBB): A Focus on BBB impermeabilità e Trasporti recettore-mediata

Qui presentiamo un'analisi di permeabilità vascolare del cervello del mouse usando iniezione intraperitoneale di traccianti fluorescenti seguita da aspersione che è applicabile ai modelli animali di disfunzione della barriera emato - encefalica. Un hemi-cervello è usato per valutare quantitativamente permeabilità e l'altro per la visualizzazione dell'elemento tracciante/immunostaining. La procedura richiede 5-6 h per 10 topi.

In Vivo barriera emato - encefalica permeabilità saggio nei topi utilizzando fluorescente etichettati traccianti

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di fornire una tecnica altamente riproducibile per la valutazione in vivo della perturbazione barriera emato - encefalica nei modelli del ratto del colpo ischemico.

Una valutazione In Vivo di rottura della barriera emato - encefalica in un modello del ratto del colpo ischemico

Qui presentiamo un protocollo che descrive l'impostazione di un cellulo in BBB (barriera ematoencefalica)-cultura di poliestere membrana porosa Minibrain inserire il sistema al fine di valutare il trasporto di biomolecole o agenti infettivi attraverso un Bee umano e loro impatto fisiologico sulle cellule cerebrali adiacenti.

Un modello di interfaccia sangue-cervello umano per studiare barriera attraversamenti di agenti patogeni o farmaci e loro interazioni con il cervello

Drug targeting per tumori del sistema nervoso centrale è una sfida importante. Qui descriviamo un protocollo per produrre un mimo in vitro del tumore-barriera emato-encefalica utilizzando cellule murine e/o umane e discutere la loro rilevanza per la prevedibilità del sistema nervoso centrale targeting tumorale in vivo.

Fornitura di payload predicting In Vivo utilizzando una tumore-barriera emato-encefalica in un piatto

La barriera emato-encefalica (BBB) è un'unità neurovascolare multicellulare che regola strettamente l'omeostasi cerebrale. Combinando gli iPSC umani e le tecnologie organ-on-chip, abbiamo generato un chip BBB personalizzato, adatto per la modellazione delle malattie e le previsioni di penetrazione dei farmaci del SNC. Viene descritto un protocollo dettagliato per la generazione e il funzionamento del chip BBB.

Generazione di un chip di barriera emato-encefalica basata sull'iPSC umano

Questo protocollo descrive un metodo per stabilire un modello umano di barriera emato-encefalica (BBB) in vitro . Le cellule endoteliali e i periciti sono seminati su ciascun lato di un filtro inserto (compartimento sanguigno) e gli astrociti sono seminati nel pozzetto inferiore (compartimento cerebrale). Il modello caratterizzato è stato utilizzato per esperimenti di trasporto di nanoparticelle.

Un sistema di cellule a tripla coltura che modella la barriera emato-encefalica umana

La barriera emato-encefalica (BBB) ha un ruolo cruciale nel sostenere un ambiente cerebrale stabile e sano. La disfunzione della BBB è associata a molte malattie neurologiche. Abbiamo sviluppato un modello 3D derivato da cellule staminali della BBB per studiare la patologia cerebrovascolare, l'integrità della BBB e il modo in cui la BBB viene alterata dalla genetica e dalla malattia.

Ricostruzione della barriera emato-encefalica in vitro per modellare e colpire terapeuticamente la malattia neurologica

Impara a disgregare la barriera emato-encefalica nel ratto per migliorare la somministrazione di farmaci al cervello. Questo metodo utilizza mannitolo intra-arterioso e permette di testare terapie con scarsa permeabilità cerebrale.

Modello Rat di emato-encefalica Turbativa Barriera per consentire mirato Therapeutics neurovascolare

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