Name: Congelamento, lo scongelamento, e celle di imballaggio per il trasporto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-07-02T15:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Impara le tecniche essenziali per congelare, conservare e scongelare cellule mammifere in coltura. Questo metodo preserva le linee cellulari per ricerche future evitando senescenza e contaminazione.

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Il protocollo testo completo di questo approccio sperimentale è disponibile in <a class="jove_content" href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract">protocolli di corrente in Biologia Cellulare.</a>

Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

congelamento, lo scongelamento, e celle di imballaggio per il trasporto

Freezing, Thawing, and Packaging Cells for Transport

Coltura di cellule di mammifero sono ampiamente utilizzati negli studi di biologia cellulare. Si richiede un numero di abilità speciali al fine di essere in grado di preservare la struttura, la funzione, il comportamento e la biologia delle cellule in coltura. Questo video descrive le competenze di base necessarie per congelare e conservare cellule e come recuperare scorte congelate.

Coltura di cellule di mammifero sono ampiamente utilizzati negli studi di biologia cellulare. Questo video descrive le competenze di base necessarie per congelare e conservare cellule e come recuperare scorte congelate.

Congelamento, lo scongelamento, e celle di imballaggio per il trasporto

Le cellule di mammifero in coltura sono utilizzate ampiamente negli studi di biologia cellulare. Per essere in grado di preservare la...

Le colture cellulari sono utilizzate in una vasta gamma di applicazioni di ricerca e diagnostica. A volte è utile conservare linee cellulari per lavori futuri, al fine di preservare le cellule, evitare la senescenza, ridurre il rischio di contaminazione e minimizzare gli effetti alla deriva genetica. Le linee cellulari possono essere congelate per la conservazione a lungo termine.In questo video, ti mostriamo come congelare cellule coltivate sia in monostrato che in sospensione, e come scongelarle per farle crescere nuovamente. Ciao, sono Ricky, del laboratorio del Dr. LAN presso la Molecular Pathology Laboratories Network nell'East Tennessee. Oggi ti mostrerò come congelare le cellule per la conservazione a lungo termine e come scongelarle dall'azoto liquido.Per congelare cellule aderenti umane, iniziare sollevandole dalla piastra come si farebbe in caso di confezionamento. Tenere presente che è preferibile utilizzare cellule in fase logaritmica di crescita per la criopreservazione. Una volta che le cellule si sono staccate e la reazione della tripsina è stata arrestata aggiungendo siero o mezzo contenente siero, trasferire la sospensione cellulare in un tubo da centrifuga sterile

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Biologia

Qui mostriamo come il nostro laboratorio si blocca RIFLESSI embrionali umane linee di cellule staminali.

Congelamento cellule staminali embrionali umane

Dal momento che James Thomson et al sviluppato una tecnica nel 1998 per isolare e far crescere hES in coltura, le cellule per un uso successivo congelamento e scongelamento ed espandere cellule da uno stock congelati sono diventati importanti procedure di routine effettuato in colture cellulari hES. Dato che le cellule hES sono molto sensibili alle sollecitazioni di gelo e disgelo, particolare cura deve intraprendere. Qui mostriamo la tecnica adeguata per il rapido scongelamento cellule hES...

Congelamento e scongelamento cellule staminali embrionali umane

Illustriamo qui come utilizzare elettroni cryotomography (ECT) per studiare l'ultrastruttura delle cellule batteriche in quasi native stati, a "macromolecolari" (~ 4 nm) risoluzione.

Cryotomography elettrone di cellule batteriche

Un glicole etilenico metodo basato vetrificazione per embrioni di topo è descritto. E 'vantaggioso per altri metodi nella sua semplicità e bassa tossicità embrionale, e quindi può essere ampiamente applicabile a molti ceppi di topi, compresi topi inbred e geni modificati.

Crioconservazione di embrioni di topo da glicole etilenico-Based Vetrificazione

Liofilizzazione è spesso un modo semplice e conveniente per ottenere prodotti a secco di cellule batteriche vitali. Un problema del processo è la sopravvivenza delle cellule. Abbiamo dettaglio qui una procedura per indagare come sopravvivenza cellulare durante la liofilizzazione è influenzata dalle proprietà della formulazione utilizzata.

Formulazioni per la liofilizzazione di batteri e la loro influenza sulla sopravvivenza cellulare

Questo manoscritto descrive un metodo facile da usare e cryofixation basso costo per la visualizzazione cellule in sospensione mediante microscopia elettronica a trasmissione.

Plunge congelamento: uno strumento per l&#39;ultrastrutturali e Immunolocalizzazione Studi di cellule in sospensione in microscopia elettronica a trasmissione

Linee di cellule di Drosophila sono importanti reagenti per la ricerca biomedica sia fondamentale. Questo articolo fornisce i protocolli per lo scongelamento, subcoltura e la crioconservazione delle varietà di cellula di Drosophila comunemente usati per aiutare i ricercatori a che prevedano l'impiego di questi reagenti nella loro ricerca.

Scongelamento, coltura e Cryopreserving linee di cellule di Drosophila

Qui viene presentato un protocollo che descrive le fasi di preparazione del campione e di raccolta dei dati richieste nella tomografia a raggi X criomoscido morbido (SXT) per visualizzare l'ultrastruttura di intere cellule crioconservate con una risoluzione di 25 nm a mezzo passo.

Una descrizione cartografica 3D della cellula mediante tomografia a raggi X Cryo Soft

Qui mostriamo come utilizzare il dispositivo di congelamento a sandwich per il congelamento rapido di campioni biologici, inclusi batteri, lieviti, cellule coltivate, cellule isolate, tessuti animali e umani e virus. Mostriamo anche come preparare i campioni per il sezionamento ultrasottile dopo un rapido congelamento.

Congelamento rapido con dispositivo di congelamento a sandwich per una buona conservazione ultrastrutturale di campioni biologici in microscopia elettronica

Questo protocollo video illustra come eseguire la tomografia al microscopio elettronico a scansione a trasmissione di campioni virologici. Per ottenere risultati ottimali, i campioni vengono preparati mediante congelamento ad alta pressione e successiva sostituzione con congelamento.

Tomografia al microscopio elettronico a scansione a trasmissione in virologia: imaging 3D di campioni congelati ad alta pressione, liofilizzati

Impara le tecniche essenziali per congelare, conservare e scongelare cellule mammifere in coltura. Questo metodo preserva le linee cellulari per ricerche future evitando senescenza e contaminazione.

Congelamento, lo scongelamento, e celle di imballaggio per il trasporto

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