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Studying DNA and RNA
Southern Blot for DNA Detection
Description
Southern blotting is a DNA detection method used after agarose gel electrophoresis separates DNA fragments by size. A DNA ladder with fragments of known length is run beside the sample so the fragment size can be estimated. The blot adds another step when scientists need to confirm the sequence identity of the DNA.
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Transcript
サザンブロッティングは、標識DNAプローブが標的DNAとハイブリダイズして、ゲノム内の特定の配列を検出する技術です。
この技術は、最初に開発した英国の生物学者、エドウィン・サザンにちなんで名付けられました。
この手順は、電気泳動、変性、膜転写、ハイブリダイゼーション、および視覚化の5つの主要なステップに従います。
まず、ゲノムDNAを制限酵素で消化し、得られたDNA断片をアガロースゲルにロードし、ゲル電気泳動を用いて分離します。
二本鎖DNAを変性または2本鎖DNAまたはssDNAに分離するために、ゲルを水酸化ナトリウム溶液に浸します。
次に、ゲルを塩化ナトリウムとトリス緩衝液を含むDNA中和溶液のスポンジに置き、p...
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