バランスビームを用いてマウスにおける運動バランスとコーディネーションの評価

細かい運動神経の赤字は、バランスのビーム試験により評価することができます。ビームの性能は、ビームが走査される速度と回数ビーム上のマウスの滑りによって定量化される。

この手順の全体的な目標は、マウスの運動協調とバランスを評価することです。最初のステップは、モーション検出器の位置を持つ平均ビームを組み立てて、ビーム交差の遅延を記録し、バランスビームの始点に配置され、安全なプラットフォームに渡ることを許可したトレーニングマイヤーを開始することです。時には、ビームに沿って動物を終点に向けて励ます必要があります。

10 分間のインタートライアルインターバルの後、maer は感度を高めるために、より狭いビームでトレーニングを行いました。手順の最後のステップは、訓練を受けた動物を異なる幅のビームでテストすることです。最終的には、運動協調とバランスの欠損を示す結果を得ることができます。

こんにちは、私はティム・ルオンで、カリフォルニア工科大学の生物学部の医学博士課程の候補者です。私はホリー・カーライルで、カリフォルニア工科大学の生物学部のポスドクですが、今日は平均台テストを使用してマウスのバランスと運動協調を評価する方法を紹介します。さて、ローターロッドなどの他の方法と比較したこの手法の主な利点は、平均台試験が運動協調の微妙な欠損に対してもより敏感になる傾向があることです。

この方法は、特定の神経疾患モデルで運動協調とバランスが影響を受けるかどうか、特定の治療によって運動障害が軽減されるかどうかなど、行動分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。このテストの目的は、マウスが停止したり失速したりせず、研究者からのプロンプトなしにビームを横切るのにかかる時間を測定することです。テスト当日にクリーンな走行をするために、テストの2日前にトレーニングを行います。

この方法の視覚的なデモンストレーションは、マウスがビームを横切ってどのように扱われ、支援されるかは、行動試験にあまり詳しくない人にとっては難しいかもしれないので、役に立ちます。それでは始めましょう。このプロトコルは、Southwell、etal、Carter etalのプロトコルに基づいています。

この装置は、高さ50センチメートルの2本のポールの間に長さ1メートルのビームを休ませることによって組み立てられます。ビームの幅は6ミリメートルまたは12ミリメートルの平らな表面を持っています。幅の広いビームは、より大きなマウスや狭いサイズを横切ることができないマウスに使用できます。

ビームの端にブラックボックスを配置し、ブラックボックスの内側にネスティングマテリアルを配置して、マウスをフィニッシュポイントに近づけ、スタートポイントをランプで照らして嫌悪刺激として機能します。モーションディテクターは、ビーム交差の遅延を記録するために0センチメートルと80センチメートルに配置され、ビームの下にナイロンハンモックを伸ばし、落下を緩和するためにテーブルトップから約7.5センチメートル上に伸ばします。この手順で使用したマウスは、12時間の明暗サイクルで飼育され、試験前に2週間順応しています。

実験開始の約10分前に動物を試験室に導入し、最良の結果を得るために、試験条件ごとに少なくとも10匹のマウスのコホートを使用しました。トレーニングを開始するには、幅12mmのビームの開始位置にマウスを置きます。タイマーは、マウスの鼻が中央80センチメートルに入ると開始し、動物が80センチメートルの端に達すると停止します。

マウスは、停止または失速を最小限に抑えてビームを横切る必要があります。動物が前進を止めた場合は、後ろから優しく突いて続けるように促します。動物がビームをうまく横切ったら、金庫から取り出し、10分間ホームケージに戻してから、次のトレーニングセッションを開始します。

平均台とボックスは、次のマウスを導入する前に、70%エタノールで洗浄および拭かれます。各マウスは、12ミリメートル幅のビームで3回学習され、続いて6ミリメートル幅のビームで訓練されます。さらに3回のトレーニングを繰り返すと、動物がタスクや装置に慣れてくるにつれて、失速の発生が増加する可能性があります。

一方、マウスが2日間の訓練後にビーム全体を成功裏に横断できなかった場合、追加の訓練が必要になることがあります。動物が治療を受ける前に、必ずベースライン測定値を記録してください。その日のトレーニングが完了したら、マウスを自宅のケージに戻して保管施設に戻します。

実験当日は、前述したように実験開始の10分前に動物を部屋に連れ込み、開始位置にマウスを置き、動物がビームの中心80センチメートルを横切るまでの待ち時間を記録します。データは、マウスが停止せず、研究者による突っ込みもなく、最後まで直接交差した2つの成功した試験の平均として報告されています。ビデオ録画は、スリップやその他の観察可能な運動障害をより詳細に分析するために使用できます。

この例では、9週齢から11週齢のC 57 black sixマウスを、12ミリメートル幅と6ミリメートル幅のビームで試験しました。幅12mmのビームを横切る平均時間は、男性が4.6秒前後0.4秒、女性が3.3秒前後0.3秒、6本ビームで6秒前後が0.7秒、男性が5.9秒前後0.5秒だった。女性用。

平均台性能は、マウスの年齢や系統によって異なる場合があります。この例で使用されたC57ブラック6マウスは、典型的には活動的な動物であり、これらのマウスおよび遺伝的または薬理学的に操作された動物については、いくつかのスリップが観察されなかったが、スリップおよび転倒がより頻繁になり、定量化することができる。障害のあるマウスは、ビームの側面にしがみつく可能性があり、この手順を試みている間、交差する時間が長くなります。

マウスがビームで失速したり気が散ったりした場合に、マウスが前進するように粘り強く一貫して促すことが重要です。このビデオを見れば、マウスが平均台を横切るように訓練する方法と、マウスのバランスと協調性を評価する方法について十分に理解できるはずです。ご覧いただきありがとうございます、そしてこれがお役に立てば幸いです。