Name: ニューロン相馬と軸索のコンパートメントのためのマイクロ流体デバイスの作製 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-22T00:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 58 s
Description: 学ぶソフトリソグラフィー法によるマイクロ流体デバイスの作製技術。PDMSを用いて神経細胞の細胞体と軸索を分離培養し、神経再生や軸索機能の研究に活用できる画期的なデバイス製造法を解説します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

パート1：マイクロ流体ニューロンデバイスの準備<ol><li> 3&quot;フォトリソグラフィーによるSU - 8で作られたパターンを持つシリコンウェハは、ポリジメチルシロキサン（PDMS）マイクロ金型をキャストするために使用されます。我々は、マスター金型、またはSU - 8のパターニングシリコンウェハを参照して&quot;マスター&quot;。 </li><li> PDMSは10:1 AW / w比で硬化剤と混合され、PDMSの10グラムのために、すなわち、硬化剤の1グラムが追加されます。 </li><li> PDMSは、よく混合し、シリコンウエハ上に注がれています。シリコンウェハは、10cmのポリスチレンペトリ皿内に含まれています。それは約4mmの厚さでマスターをカバーするためにPDMSの約12グラム〜15 gを取ります。 </li><li> PDMSとマスターは、ペトリ皿の蓋付きの真空デシケーターに配置され、真空が適用されます。これは、硬化剤の中で撹拌中に導入されたPDMSから気泡を取り除くために行われている。それは、気泡のため約15分が削除されます。 </li><li> PDMSとマスターは、デシケーターから削除されます。 0.45 UMのフィルター付き空気銃は、残りの気泡を除去するために使用されます。 </li><li>マスターは、治すために1時間80℃のホットプレート上に配置されます。 </li></ol> 注 ：真空デシケーターを使用できない場合は、マスターが数時間室温で放置することができます。気泡は、最終的に自分自身で消費されます。ホットプレートが使用できない場合は、PDMSは、24時間後に室温で硬化されます。 注 ：マスターは、硬化プロセス中レベルであることを確認することも重要です。 パート2：ニューロンマイクロ流体デバイスを切り出す<ol><li> PDMSはマスターに硬化されると、それはクリーンフードに取得されます。 </li><li>外科ブレードを使用して、円はデバイスの周囲にカットされます。するときに一インサートPDMSにブレード、それはシリコンウエハとの接触を行うことがウエハ上にあまりにも多くの圧力をかけることが重要です、他のマスターは、割れの原因となる。 </li><li>円で（各3あたり4デバイス&quot;シリコンマスターが存在する）、PDMSは慎重にマスターリフトオフされデバイスの周りのすべての方法をカット。これは、前のカットに挿入されると優しく外科刃をねじることによって起動することができます。 </li><li>次に、貯水池は、8 mmの組織生検パンチを使用してデバイスにパンチされています。 </li><li>デバイスは、四つと過剰PDMSデバイスがコーニングカバーガラス（1号）24ミリメートル× 40ミリメートルにきちんと収まるように離れてトリミングされます。窒素、空気が余分なゴミを吹き飛ばすために使用されます。頑固な残骸は、3Mスコッチブランド471ビニールテープを使用して削除できます。 </li></ol>パート3：プラズマボンディングガラスカバースリップのデバイス。 <ol><li>プラズマクリーナーは、カバースリップに結合するHarrickニューロンデバイスを使用されています。簡単に言えば、デバイスは、プラズマクリーナーに配置され、真空ポンプは、チャンバから空気を排気するために使用されます。 </li><li>真空圧力は300ミリトルに達した後、電源が電気コイルに電源が入っており、高に設定されています。 </li><li> -電気的なコイルは&quot;電子、イオンと中性原子または分子から成る部分的にイオン化されたガス&quot;、プラズマを作成し<a href="http://www.harrickplasma.com/plasma_physics.php">http://www.harrickplasma.com/plasma_physics.php</a> 、うち残っている空気分子のは、チャンバー内に残された。プラズマはガラスと永続的な結合を形成する一緒に置くとデバイスの表面に反応種を作成します。プラズマはまた、液体の付加を促進する助け親水性の表面を、になります。さらに、プラズマクリーナーは、デバイスを滅菌する。 マイクロ流体デバイスを含むPDMSデバイスの表面はガラスのスライドとともにプラズマクリーナーに表向きに置かれます。 ガラスとマイクロ流体デバイスの表面をプラズマ処理は、滅菌​​60 mmの培養ディッシュに入れ、クリーンベンチで互いに接触して組み立てられています。処理された表面は、タイトな不可逆的な結合を形成する。 </li><li>ガラスにデバイスを接合するプラズマの10分以内、ポリ- L -リジン（PLL）がデバイスに追加されます。 10分後、デバイスの親水性は、それが困難なPLLは、デバイスを入力できるようになっ減少します。 注 ：PLLの添加後、装置内の空気の泡をチェックすることが重要です。彼らは細胞を酸化と同じように、メインチャンネルでの気泡は、好ましくないです。あらゆる既存のAIRの気泡を除去する簡単な方法は、液体の150μlを（この場合は、PLL内）で満たされたP200ピペットを使用する場合、メインチャネルの開口部に直接先端を配置し、強制的にP200を押し下げる。これは繰り返すことが必要になることがありますが、最終的にはピペットからの力が気泡​​を追い出すでしょう。 </li><li> PLLを含むデバイスは、37標準組織培養インキュベーターで一晩インキュベートされている° C、5％のCO 2。 </li><li>翌日、デ悪徳は、オートクレーブdH2Oで二回迅速にすすぎ洗いされています。このプロセスの間に、液体を完全にのみ貯水池から、メインチャンネルから削除されることはありません。メインチャンネルから液体を削除すると、泡をご紹介します。 2クイック洗浄した後、デバイスは、オートクレーブdH2Oを充填し、約3時間のインキュベーターに戻し入れ、または一晩されています。 </li><li>翌日、デバイスが再度オートクレーブdH2Oで素早く2回リンスしています。その後、培養初代ラットの神経細胞のために必要なサプリメントB27とグルタミンを含む神経基本培地は、デバイスに追加されます。デバイスは、将来の使用のためにインキュベーターに戻って配置されます。デバイスは現在、神経細胞の播種のための準備が整いました。 </li></ol>

<ol><li>Park, J. W., Vahidi, B., , A. M., Rhee, S. W., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+culture+platform+for+neuroscience+research.%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Microfluidic culture platform for neuroscience research.</a> Nat Protoc. 1, 2128-2136 (2006).</li>
<li>Taylor, A. M., Blurton-Jones, M., Rhee, S. W., Cribbs, D. H., Cotman, C. W., Jeon, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidic+culture+platform+for+CNS+axonal+injury%2C+regeneration+and+transport%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A microfluidic culture platform for CNS axonal injury, regeneration and transport.</a> Nat Methods. 2, 599-605 (2005).</li>
</ol>

このビデオでは、デバイスは、私たちは細胞体、樹状突起、および軸索のミックスを含むコンパートメントからmicrogroovesで区切られた純粋な軸索の画分を得ることができますインチ我々は文化の神経細胞に使用するPDMSマイクロ流体デバイスを作成し、準備する方法を示している。これらのデバイスは、研究者が様々な治療の効果を研究するだけでなく、軸索上の物理的な傷害を実施し、これらの治療は、神経細胞にどのような効果を観察するためのプラットフォームを提供することができます。デバイスはまた、輸送の研究を促進支援する培養神経細胞にするためのレベルを提供します。さらに、軸索のコンパートメントから細胞培養のコンパートメントを分離microgroovesは、、それが可能な治療法と直接デバイスの反対側に影響を及ぼすことなく、デバイスの一方の側を治療することつの区画の間に流体を分離することができます。このプロパティは、研究者が治療の結果そのシグナル伝達や輸送などの効果を研究することができます。

<table><tbody><tr><td>PDMS</td><td>試薬</td><td>Dow Corning</td><td></td><td>硬化剤を含むSylgard 184。お近くの販売店についてはDow Corningにお問い合わせください</td></tr><tr><td>プラズマクリーナー</td><td>器具</td><td>Harrick Scientific Products, Inc.</td><td></td><td>http://www.harrickplasma.com/</td></tr><tr><td>Neural Basal Media</td><td>試薬</td><td>Invitrogen</td><td>21103-049</td><td>Neural Basal Mediaは、InvitrogenのGibco細胞培養試薬ラインから入手可能です</td></tr><tr><td>B27</td><td>試薬</td><td>Invitrogen</td><td>17504-044</td><td>B27は、InvitrogenのGibco細胞培養試薬ラインから入手可能な独自のサプリメントです</td></tr><tr><td>Glutamax</td><td>試薬</td><td>Invitrogen</td><td>35050-061</td><td>Glutamaxは、InvitrogenのGibco細胞培養試薬ラインから入手可能です</td></tr><tr><td>Corning No. 1 カバーガラス</td><td>カバーガラス</td><td>Corning</td><td>Corning No. X2935 244</td><td>Fisher Scientific（カタログ番号 12-531D）から入手可能です</td></tr><tr><td>60 mm シャーレ</td><td>器具</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-757-13A</td><td>ガラスに結合させたデバイスを収容するために、60 mm ポリスチレン滅菌シャーレを使用します</td></tr><tr><td>BD Falcon 50 ml チューブ</td><td>器具</td><td>BD Biosciences</td><td>Falcon No. 352098</td><td>Fisher Scientific（カタログ番号 14-959-49A）から入手可能です</td></tr><tr><td>BD Falcon 15 ml チューブ</td><td>器具</td><td>BD Biosciences</td><td>Falcon No. 352097</td><td>Fisher Scientific（カタログ番号 14-959-70C）から入手可能です</td></tr><tr><td>Poly-L-Lysine</td><td>試薬</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-1274</td><td></td></tr><tr><td>新規項目</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ニューロン相馬と軸索のコンパートメントのためのマイクロ流体デバイスの作製

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

このビデオでは、私たちは培養神経細胞のためのマイクロ流体デバイスを作製するために使用するポリジメチルシロキサン（PDMS）とソフトリソグラフィーの手法を示しています。以前は、シリコンウェハは、SU - 8とフォトリソグラフィーマスターの金型を作成するために、または何を我々は単に&quot;マスター&quot;として参照を使用してニューロンマイクロ流体デバイスの設計をパターン化した。次に、我々は、° Cで1​​時間80 PDMSを加熱することにより硬化されているマスターの上にシリコンポリマーPDMSを注ぐ。 PDMSは、デバイスの負の金型を形成している。 PDMSは、慎重にカットし、マスターから離れて持ち上げられる。穴は貯水池があるところ打ち抜き、過剰PDMSは、デバイスからトリムされます。窒素は装置から余分なゴミを吹き飛ばすために使用されます。この時点でデバイスを使用する準備が整いましたので、どちらもプラズマ滅菌器/クリーナーとコーニング第1カバーガラスに接着したり、可逆的に単にカバーガラスの上にデバイスを配置することにより、カバーガラスにバインドすることができます。ガラスへのデバイスの可逆的結合は、別のビデオで覆われ、デバイスは70％エタノールでまたはオートクレーブのいずれかによって滅菌される最初の必要です。それ以上の処置は必要ないので、プラズマの治療には、デバイスを滅菌する。それは、表面がまだ親水性である一方、プラズマ処理の10分以内にデバイスに液体を追加するデバイスを、プラズマが、治療時に、、しかし、重要です。デバイスに液体を追加する10分以上待つことが困難液体がデバイスを入力できるようになります。ニューロンデバイスは、通常のガラスとpH8.5のホウ酸緩衝液に0.5 mg / mlのポリ- L -リジン（PLL）をカバーするためにプラズマバインドされたが、すぐにデバイスに追加されます。 PLLでインキュベート3時間の最小値の後に、デバイスが各洗浄の間に少なくとも15分にdH2Oの水で最低3回洗浄する。次に、水は除去され、新鮮なメディアがデバイスに追加されます。この時点で、デバイスの使用準備ができています。デバイスからすべてのメディアを取り外すことは決してして、この時点で覚えておくことが重要です。常にメインチャネルのメディアを残す。

このビデオでは、我々は、培養神経細胞のためのマイクロ流体デバイスをfarbricateするために使用するポリジメチルシロキサン（PDMS）とソフトリソグラフィーの手法を示しています。

本ビデオでは、ポリジメチルシロキサン（PDMS）を用いたソフトリソグラフィーの技術を実演します。本手法は、...のためのマイクロ流体デバイスの作製に使用されます。

Newly John博士の研究室へようこそ。John研究室では、生物学的応用のためのマイクロ流体プラットフォームのエンジニアリングを専門としています。このビデオでは、一次ニューロンの区画化および培養のために設計されたマイクロ流体デバイスの作製と活用方法について解説します。ニューロンデバイスは、2005年8月にNature Methodsで初めて発表されました。導入以来、このニューロンデバイスは世界中の共同研究者によって広く利用されています。ニューロンデバイスは、フォトリソグラフィーによって作製されたデバイスのSUAパターンを含むシリコンウェハー上で成形されたPDMS片で構成されています。このデバイスは、直径8 mmの4つのリザーバー、幅1.5 mm、長さ7 mm、高さ100 µmの2つのメインチャネル、および2つのメインチャネルを接続する幅10 µm、高さ3 µmのマイクログルーブという3つの主要な特徴を備えています。マイクログルーブの長さは150 µmから900 µmまで変更可能ですが、標準的な選択長は450 µmです。メインチャネルとマイクログルーブが垂直になるようにデバイスを観察すると、グルーブの左側にあるリザーバー同士がメインチャネルを介して接続されており、右側のリザーバー同士も同様に接続されていることがわかります。この機能により、液体をメインチャネルに流すことができ、細胞のロードや培地の交換を可能にする重要な役割を果たします。ニューロンデバイスには、従来の組織培養プラットフォームと比較して3つの大きな利点があります。1つ目は、細胞体（soma）と軸索を区画化できることです。ニューロンデバイスを用いることで、純粋な軸索画分を得ることが可能になります。マイクログルーブのサイズと長さにより、軸索をもう一方のメインチャネルへ通過させつつ、細胞体が乗り越えるのを防ぐことができます。2点目に、デバイスの設計と静水圧を利用することで、デバイスの一方のリザーバーの液量をもう一方より高く維持するだけで、細胞側または軸索側のいずれか、あるいはその両方を個別に処理することが可能です。そして3点目に、デバイスの軸索のみが含まれる画分を真空吸引で切断できるため、研究者は軸索の再生を研究および観察することができます。研究者のHina Leeが、マイクロ流体ニューロンデバイスの作製手順を実演します。フォトリソグラフィーによってSU-8でパターン形成された3 Angのシリコンウェハを使用して、ポリジメチルシロキサン（PDMS）マイクロ流体モールドを鋳造します。このSU-8パターンシリコンウェハをマスターモールド、または単にマスターと呼びます。PDMSを硬化剤と10:1の重量比で混合します。例えば、PDMS 15 gに対して硬化剤 1.5 gを用います。その後、PDMSを十分に混合し、シリコンウェハー上に流し込みます。シリコンウェハは10 centimeterのポリスチレン製ペトリ皿に入れています。MAを約four millimeterの厚さで覆うには、約12 gramsから15 gramsのPDMSが必要です。次に、PDMSを塗布したマスターをペトリ皿の蓋を開けた状態で真空デシケーターに入れ、真空引きを行います。これは、硬化剤の攪拌中にPDMS内に混入した気泡を除去するために行います。気泡が除去されるまでには約15分かかります。真空デシケーター内で15分経過後、PDMSを塗布したマスターをデシケーターから取り出します。PDMSマスターにまだいくつかの気泡が残っています。0.45 micronフィルターを備えたエアガンを使用して、残っている気泡を除去します。その後、マスターを80 °Cのホットプレートに1時間置いてキュアさせます。真空デシケーターが利用できない場合は、マスターを室温で数時間放置してください。気泡は最終的に自然に消滅します。ホットプレートが利用できない場合は、PDMSは24時間後に室温で硬化します。硬化プロセス中、マスターが水平であることを確認することが重要です。PDMSがマスター上で硬化した後、外科用メスを用いてクリーンフードへ移動させます。デバイスの周囲に沿って円形に切り込みを入れます。ブレードをPDMSに挿入してシリコンウェハーに接触させることが重要ですが、ウェハーに過剰な圧力をかけないようにしてください。さもなければ、デバイスの周囲に円状の切り込みが入り、マスターが割れてしまいます。3インチのシリコンマスター1枚につき、4つのデバイスがあります。PDMSをマスターから慎重に剥離させます。外科用メスを、あらかじめ入れた切り込みに挿入しながら、ゆっくりとひねることで開始できます。モールド上のPDMSデバイスは非常に薄くなっています。8 mmの組織生検パンチを用いて、デバイスに上向きのリザーバーを開けます。パンチャーに残った破片をロッドで押し出します。次に、デバイスを4等分し、Corning社製のカバーガラス（No.1、24 mm × 40 mm）に適切に収まるように余分なPDMSをトリミングします。窒素ガスを用いて、残った破片を吹き飛ばして除去します。しつこいゴミは、3M スコッチブランド 4 7 1 ビニールテープを使用して除去することも可能です。これで、洗浄済みのデバイスをプラズマボンディングに使用できる状態にします。Herrick プラズマクリーナーを用いて、ニューロンデバイスをカバーガラスに短時間でボンディングします。デバイスとカバーガラスをトレイに載せ、そのトレイをプラズマクリーナーに入れ、真空ポンプを用いてチャンバー内から空気を排気します。PDMSデバイスは、デザイン面がプラズマガスにさらされるよう、上向きに配置することが重要です。真空度が300 millitorrに達した後、電熱コイルに電源を入れ、「高」に設定します。チャンバー内に少量の空気を取り入れてプラズマ発生を促進させるため、ドアをわずかに開けます。その後、デバイスとカバーガラスを2分間プラズマ処理します。チャンバー内の紫色の光に注目してください。これが実際のプラズマです。電気コイルによってプラズマが生成されます。プラズマとは、電子、イオン、および中性の原子または分子からなる部分的にイオン化されたガスのことです。プラズマはガラスとデバイスの表面に反応性種を生成し、これらを接合させることで恒久的な結合が形成されます。また、プラズマは表面を親水性に変化させ、液体の添加を容易にします。さらに、プラズマクリーナーによってデバイスの滅菌も行われます。2分間のプラズマ処理後、真空装置の電源を切り、チャンバー内に空気を導入します。プラズマ処理を施したガラス面とマイクロ流体デバイスの表面を、クリーンベンチ内で互いに接触させて組み立てます。その後、デバイスを滅菌済みの60 mmディッシュに入れます。プラズマ処理を施したガラスとデバイスの表面は、強固で不可逆的な結合を形成します。プラズマボンディング後10分以内に、デバイスをガラスに固定し、デバイスにポリリシンを添加します。10分後には、デバイスの親水性が低下します。これにより、PLLがデバイス内に浸入しにくくなります。PLL添加後は、デバイス内に気泡がないか確認することが重要です。気泡を除去する簡単な方法として、100 µLの液体を満たしたP 200ピペットを使用する方法があります。このケースでは、PLLのチップをメインチャネルの開口部に直接配置し、P 200を強く押し下げます。この操作を数回繰り返す必要があるかもしれませんが、最終的にはピペットによる圧力で気泡が押し出されます。PLLを含むデバイスを、37°C、5% CO2の標準的な組織培養インキュベーターで一晩インキュベートします。PLLで24時間インキュベートした後、デバイスをオートクレーブ済みの脱イオン水で素早く2回洗浄します。この工程において、メインチャネル内の液体は決して完全に除去せず、リザーバー内の液体のみを除去してください。メインチャネルから液体を除去すると、気泡が混入します。2回素早くすすいだ後、デバイスに再びオートクレーブ滅菌済みの脱イオン水を満たし、インキュベーターで最低3時間または一晩置きます。翌日、水で一晩または最低3時間インキュベートした後、デバイスを再びバイオセーフティキャビネットに入れ、脱イオン水で2回すすぎます。その後、一次ラットニューロンの培養に必要なサプリメントであるB 27およびグルタミン酸を含むニューラル基礎培地をデバイスに添加します。その後、デバイスをインキュベーターに戻し、次回の使用に備えます。これで、ニューロンを播種するための準備が整いました。本ビデオでは、ニューロンデバイスの作製に使用したソフトリソグラフィーの技術について実演しました。これらのデバイスは、ニューロンやその他の目的の細胞タイプの培養に使用できます。これらのデバイスの最大の利点は、デバイスの一方でニューロン細胞体を、もう一方では純粋な軸索画分を、分離して区画化した状態で培養できることです。次のビデオでは、E 18ラット胎児皮質ニューロンの調製方法と、デバイスへの細胞の播種方法について説明します。John研究室からの解説は以上です。ご視聴ありがとうございました。

fabrication-microfluidic-device-for-compartmentalization-neuron-soma

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

このビデオでは、E18皮質ラットニューロンの準備を示しています。...

マイクロ流体デバイスでコンパートメントのためのE18脳ラットのニューロンの準備

バイオMEMS：生物学者とエンジニアの間の新しいコラボレーションを鍛造

マルチコンパートメントのCNSニューロングリア共培養マイクロ流体プラットフォーム

このビデオは、初代ラット海馬ニューロンのコンパートメント化された培養のための組み立て済みのプラスチックマイクロ流体チップの利用を示しています。ニューロンはマイクロ流体コンパートメントの1つに播種され、そこで付着して成長し、チップのマイクログルーブを介して軸索を隣接するコンパートメントに伸ばします。細いマイクログルーブは、ニューロン細胞体の侵入を防ぎ、それによって体細胞コンパートメントと軸索コンパートメント間の物理的な分離を可能にします。...

プラスチックマイクロ流体チップを用いた分別初代マウスニューロン培養

このビデオは、マイクログルーブバリアによって分離された体細胞と軸索コンパートメントで構成されるマイクロ流体デバイスを使用して、神経幹細胞(NSC)の分化を示しています。NSCは体細胞コンパートメントに導入され、接着することができます。NSCは体細胞コンパートメント内でニューロンに分化し、微小溝バリアを介して軸索コンパートメントに軸索を伸ばします。...

コンパートメント化されたマイクロ流体デバイスを用いた神経幹細胞のニューロンへの分化

生体材料コーティングのチップ内のプラズマパターニングのための単一ニューロンマイクロ流体アレイ化と水のマスキングのためのプロトコルが記載されている。高度に相互接続された共培養細胞は、最小限の入力を用いて調製することができる。...

単セルの精度で神経共培養の調製

この原稿では、微細組織工学ニューラルネットワークの作成について詳しく述べる。三次元のミクロンサイズの構造物は、管状ヒドロゲルに包まれた凝集ニューロン集団にまたがる長い整列した軸索路からなる。これらの生存足場は、神経回路を再構成または調節するための機能的中継として、または灰白色物質の神経解剖学を模倣するバイオフィリックテストベッドとして役立ち得る。...

神経系の再構築、変調、モデリングのための解剖学的にインスパイアされた3次元マイクロ組織工学ニューラルネットワーク

このプロトコルでは、文化し、一次マウス...

プライマリ マウス神経細胞も見逃せません組み立て済みプラスチック製マイクロ流体チップの使用

このプロトコルは、コンパートメント化されたマイクロ流体チップの使用を示し、環状オレフィン共重合体で成形された注射をヒト幹細胞から分化した培養ニューロンに対して行う。これらのチップは、従来のコンパートメント化ポリ(ジメチルシロキサン)デバイスよりも組み立て済みで使いやすいです。ウイルス標識、流体単離、軸除染、免疫染色など、複数の一般的な実験パラダイムがここに記載されています。...

組み立て済みプラスチックマイクロ流体チップ内のヒト幹細胞由来ニューロンの区分化

本プロトコルは、マイクロ流体チャンバーにおけるニューロンミトコンドリアの播種および染色を記載する。これらのチャンバー内の流体圧力勾配により、軸索のミトコンドリアを選択的に処理して、細胞体コンパートメントに影響を与えることなく、薬理学的課題に応じてその特性を分析することができます。...

マイクロフルイディクス支援による軸索ミトコンドリアの選択的脱分極

このプロトコルは、軸索損傷後のニューロン代謝ダイナミクスをモデル化するマイクロ流体システムを記述し、内因性代謝リモデリングのイメージング、マルチオミクス分析、およびメカニズム研究を可能にします。...

軸索損傷モデル用マイクロ流体チップの構築とマルチオミクス解析の実現

学ぶソフトリソグラフィー法によるマイクロ流体デバイスの作製技術。PDMSを用いて神経細胞の細胞体と軸索を分離培養し、神経再生や軸索機能の研究に活用できる画期的なデバイス製造法を解説します。

ニューロン相馬と軸索のコンパートメントのためのマイクロ流体デバイスの作製

さらに動画を探す