急性胆道膵炎モデル:膵管注入による急性胆道膵炎マウスモデルの生成方法

膵管は消化酵素を輸送し、腸の近くの総胆管と接続します。これらの管は、胆汁酸塩が腸に出る前に消化酵素を活性化するチャネルを形成します。

胆石がこのチャネルを塞ぐと、胆汁が逆流し、膵臓自体の消化酵素が活性化され、重度の炎症状態である急性胆汁性膵炎を引き起こします。マウスモデルでこの状態を模倣するには、麻酔をかけたマウスを仰臥位で準備します。

胸の下の上腹部を切開します。次に、膵臓で小腸の上部を引っ張り、その側端を固定して、膨大部周囲領域(膵管の開口部を含む複雑な解剖学的構造)にアクセスします。

他の臓器への漏れを防ぐために、総胆管の近位端と遠位端を固定します。次に、タウロコール酸ナトリウム溶液で満たされた注射器を輸液ポンプに接続します。タウロコール酸ナトリウムは、脂肪消化のために酵素を活性化する胆汁酸塩です。

次に、針を膨大部に挿入し、希望の時間、最適な速度と濃度で灌流を開始します。灌流後、針と縫合糸を取り外します。腸を腹膜に戻します。

切開部を縫合します。マウスが回復するまで待ちます。最終的に、タウロコール酸ナトリウムが膵臓に入り、消化酵素を活性化し、膵臓の損傷を引き起こします。

つま先をつまんで麻酔の深さを確認した後、麻酔をかけたマウスの腹部を5%ポビドンヨード溶液で洗浄します。トリマーを使用して、胸と下腹部の間の毛を取り除き、約2平方センチメートルの手術領域を70%アルコールで洗浄します。動物を手術板に固定し、はさみを使用して、腹部の上部と剣状突起の下1センチメートルの皮膚を水平に5ミリメートル切ります。腹膜の切り込みを繰り返します。

空洞の露出を最小限に抑えて開腹術を行うには、トラクターを使用して肝臓を腸から約1センチメートルの頭に向かって引っ張り、膵臓と十二指腸の領域を見つけます。鉗子を使用して、肝臓を動物の頭に向かって持ち上げます。小腸の部分をそっと引っ張って、総胆管チューブの遠位部分が見やすくなるように、2つの外側の端を6-0ポリプロピレン縫合糸で固定します。

微小血管クリップを使用して、近位総胆管を一時的に閉塞します。臓器を腹腔から露出させます。次に、遠位総胆管を8-0で一時的に閉塞します縫合。総胆管にアクセスするには、0.4ミリメートルの針を0.54ミリメートルのポリエチレンチューブに接続して、小腸壁の白っぽい部分として見える膨大部周囲に穴を開けます。体重10グラムあたり10マイクロリットルの一定速度で2.5%タウロコール酸ナトリウム溶液注入の輸液ポンプを3分間始動します。

注入後、微小血管クリップを取り外し、一時的な8-0縫合糸、および膵胆管からの注射針。6-0非吸収性モノフィラメントポリプロピレン縫合糸で腹部を縫合します。開腹術と縫合糸の末端の間の時間は30分を超えてはなりません。手術後、動物は木の削りくずと水と食べ物を自由に並べたポリエチレン製の箱に入れます。