ゼブラフィッシュの定期的ケアとメンテナンス（ゼブラフィッシュ）研究所：はじめに

このプロトコルは、ゼブラフィッシュ研究所の定期的な手入れとメンテナンスについて説明しています。ゼブラフィッシュの研究への関心が惜しいため、ゼブラフィッシュの飼育施設を設立し維持する必要性も高まっています。ゼブラフィッシュの実験室の維持に関する文献は入手可能ですが、簡潔なビデオプロトコルが不足しています。

ゼブラフィッシュ仔魚のシステムメンテナンス、給餌、繁殖、飼育について解説した動画です。こんにちは、私は大学医学部のABHです。こんにちは、私はThee Institutionのマンチです。

今日は、ゼブラフィッシュの実験室の定期的な手入れとメンテナンスをご紹介します。ゼブラフィッシュは、遺伝学、薬理学、行動学の研究で人気が高まっています。メンテナンスの容易さと迅速な開発のために、彼らは遺伝子調節に非常に適しており、高脳卒中薬物スクリーニングに適しています。

このパートコードは、ゼブラフィッシュの飼育に関する考え方を、魚類利用者や新たな魚類施設の設立を検討している研究者に提供しています。それでは始めましょう。魚のシステムを提供している会社はいくつかありますが、私たちは水生生物のシステムを使用しています。

当研究室では、ゼブラフィッシュを26°Cから28.5°Cに保ち、明暗サイクルを14°Cから10°Cにしています。ゼブラフィッシュは循環システムに保管され、システムの水を継続的にろ過および通気します。健康な水生環境に必要な水質を維持するために、システムはシステム内のさまざまなタイプのフィルターのセットを利用しています。

タンクからの水は、フィルターパッド、キャニスターフィルター、バイオロジカルフィルター、活性炭フィルター、UVフィルターを通過してから、タンクに戻されます。ゼブラフィッシュシステムでは、脱塩素水または老化水が使用されます。水は、少なくとも48時間のエージングによって脱塩素することができます。

システムの水のpHを毎日チェックし、6.8〜7.5に維持します。重炭酸ナトリウムを使用して、水槽は定期的に清掃する必要があります。水槽を清掃するには、この水槽への水の流れを閉じ、水槽を後ろに傾けて余分な水を排出し、システムから水槽を慎重に取り外します。

きれいなタンクを設置し、システム水で満たします。魚を魚網でこの水槽に慎重に移します。蓋を閉め、タンクの名札を慎重に取り付けます。

タンクをシステムに配置します。チューブをタンクに戻し、給水をオンにします。魚網と水槽を70%エタノールで除染します。

水ですすぎ、乾かします。再利用する前に。循環システムのフィルターは、適切に機能するために定期的にチェックおよび交換する必要があります。

120ミクロンのフィルターパッドは、交換する前に毎日チェックされ、水流に向かって再配置されます。キャニスターフィルターは毎週交換する必要があります。キャニスターフィルターを交換するには、レンチまたは手で取り外します。

水がこぼれないように、プラスチックシートまたはタオルを下に置きます。新しいキャニスターとフィルターを挿入し、ユニットをシステムに戻します。手とレンチで慎重に締めます。

必要に応じて、カーボンフィルターは隔週で交換する必要があります。カーボンフィルターを交換するには、慎重に取り外します。レンチを手に持って、フィルターから活性炭を捨て、新しい活性炭と交換します。

カーボンホルダーを再度取り付け、フィルターユニットに戻します。フィルターユニットをシステムに戻します。システムのスイッチを入れ、水がフィルターに流れているかどうかを確認します。

生物学的フィルターは6か月ごとに清掃する必要があります。生物学的フィルターを交換するには、システムからフィルターを取り外します。圧力解放ボタンを押して、フィルターから圧力を解放します。

フィルターのネジを緩め、蓋を取り外します。内容物をふるいにかける容器に入れて、Cy Oexを水から分離します。Cy Oexが非常に汚れている場合は、交換してください。

フィルターに新しいcyaxを入れます。ユニットをシステム水に満たします。フィルターの蓋を閉め、ユニットを再度取り付けて電源を入れます。

UVフィルターは生物学的汚染物質を制御するために使用され、9〜10か月ごとに交換する必要があります。ゼブラフィッシュには、ドライフードやブラインシュリンプ、ブラインシュリンプなどの生きた食物を与えることができます。卵は地元のペットショップから入手でき、ここで説明する簡単な手順に従って実験室で孵化させることができます。赤海塩をシステム水に溶かして、1リットルあたり30〜35グラムの溶液を作ります。

ブラインシュリンプパッチャーに塩水を入れ、エビの卵を1リットルあたり大さじ1.2の濃度で加えます。エアポンプで孵化器を激しく曝気し、ブラインシュリンプの卵を約48時間受精させます。エアパイプを取り外し、培養物を4〜5分間落ち着かせます。

受精したブラインシュリンプは、孵化器の下部にあるタップを使用して孵化器の底に集まり、未受精卵を含む最初の流れを捨てます。次に、受精したブラインシュリンプを収集します。ブラインシュリンプを塩水から分離します。

ブラインシュリンプ収集ネットを使用。ブラインシュリンプを容器にすすぐ システム水を使用すると、ブラインシュリンプは容器の底に高濃度で存在し、ゼブラフィッシュの餌付けの準備が整いました。パイプまたはスポイトを使用してブラインシュリンプを魚に供給します。

分配される食品の量は、個々のタンクの人口規模によって異なります。水に食べ物を注入した後、空腹の魚は、定期的な運動に重要なブラインシュリンプを捕まえるために泳ぎます。乾式給餌は、水生生物の生息地、魚の餌ディスペンサー、または簡単なスプーンを使用して行うことができます。

ゼブラフィッシュは、光が差し込むと繁殖を開始します。卵は、インタ育種またはペアワイズ育種によって得ることができます。インタ育種はより労働効率が高く、通常の胚収集で使用されますが、遺伝子や突然変異を水槽育種でスクリーニングする場合は、ペアワイズ呼吸が好まれます。水槽内ブリーダーを組み立てて、ゆっくりと水槽に落とします。

光が入り始めたら、ブリーダーを水槽から取り出して卵を集める前に、魚が交尾できるように、繁殖装置を水槽に約15分間置いておきます。ナシ賢明な繁殖は、繁殖タンクを組み立ててシステム水で満たすことにより、午後遅くに設定されます。1人の女性と1人の男性をタンクの反対側に移します。

女性はお腹が大きいため、男性と区別できます。翌朝、仕切りを取り外します。光が差し始めた直後、魚を交尾させるため、20分間、または十分な数の胚が水槽の底に置かれるまで、アンダーストを乱したままにします。

繁殖後、魚を水槽に戻します。ストレーナーで卵を集めます。胚をよく洗います。

システム水付き。ストレーナーを胚ですすいで、胚をペトリ皿に移します。中期胚は顕微鏡で観察できます。

未受精の胚は、針とピペットを使用して受精した胚から分離する必要があります。受精卵は未受精卵から分離された後、幼虫が孵化するまで72時間、摂氏約28.5度のインキュベーターに保管されます。これで、幼虫はCORの外に出て、自由に泳いでいます。

幼虫は受精後5日から給餌され、システムに移される前に数日間停滞した水に保たれる必要があります。幼虫を約300〜400ミクロンの小さなサイズのバッフルが入ったタンクにそっと移します。14日後、幼虫のタンクをシステムに棚上げし、少量のサイクリング水を供給することができます。

幼魚と成魚のサイズに応じて、さまざまなサイズのバッフルを使用する必要があります。胚が性的に成熟した成体に成長するには、通常3か月かかります。メニューをご覧いただきありがとうございます、そしてあなたの実験に幸運を祈ります。