プライマリーヒトT細胞のpiggyBacトランスポゾンシステムの変更

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2012年11月5日

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Sunandan Saha¹^,² , Yozo Nakazawa³ , Leslie E. Huye⁴^,⁵ , Joseph E. Doherty²^,⁶ , Daniel L. Galvan² , Cliona M. Rooney⁴^,⁵^,⁷ , Matthew H. Wilson¹^,²^,⁴^,⁸

¹Program in Translational Biology and Molecular Medicine, Baylor College of Medicine , ²Department of Medicine, Division of Nephrology, Baylor College of Medicine , ³Department of Immunology and Pathology, Shinshu University School of Medicine, ⁴Center for Cell and Gene Therapy, Baylor College of Medicine , ⁵Department of Pediatrics, Baylor College of Medicine , ⁶Program in Cell and Molecular Biology, Baylor College of Medicine , ⁷Department of Molecular Virology and Microbiology, Baylor College of Medicine , ⁸Michael E. DeBakey VA Medical Center

我々は、遺伝的に非ウイルスを用いて導入遺伝子を持つプライマリヒトT細胞を変更する方法を説明します piggyBacトランスポゾンシステム。 T細胞は、使用して変更された piggyBacトランスポゾンシステムは安定した導入遺伝子の発現を示す。

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末梢血単核細胞

フローサイトメトリー解析

遺伝子改変

ニュークロフェクション手順

T細胞活性化

GFPレポーター発現

安定的な外来遺伝子の組み込み

非ウイルス性トランスポゾン

Chapters in this video

0:05

タイトル

1:39

0日目：ヒト血液からのPBMCの単離

3:23

1日目：T細胞刺激のための抗CD28および抗CD3抗体によるプレートコーティング

3:59

1日目：未刺激T細胞のヌクレオフェクション

5:54

2日目：T細胞の非特異的刺激

7:28

7日目：遺伝子発現の解析

8:05

結果：piggyBacによるヒトT細胞の遺伝子改変

9:19

結論

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