ラット肝移植モデルにおける血球力学的変化をシミュレートすることによる臓器虚血再灌流損傷

ラット肝移植モデルにおける血行力変化をシミュレートすることにより、臓器虚血再灌流傷害虚血再灌流傷害は、肝移植後の一般的な適用である。肝外臓器関与の患者は、入院時間が長く、より多くを費やし、予後が悪くなる傾向がある。

合併症の発症は、肝臓移植の肝相の長さと密接に関連している。しかし、肝移植後の虚血再灌流傷害に関する基礎研究は、肝移植後の生存率が、外核臓器への傷害の程度に反比例することを示している。解剖期の定義に基づき、肝移植における血行力学的変化をシミュレートし、ハプティック外器官の虚血再灌流傷害を引き起こした。

本論文の中で、ラットにおけるアンハプティック相の動物モデルを構築する方法について、肝移植後の虚血再灌流傷害に関する基礎研究について詳細に説明する。元元博士は、すべてのビデオ動物の操作を担当しています。2つの眼圧力、ストレートおよびベンディング、および眼間レンズ、IOL鉗子、眼科用はさみ、1~2つのレトラクター、綿棒、3〜0個の外科縫合糸、ヨドフォームガーゼ、縫合針、必要に応じてバイオシステム、および眼間レンズ、IOL鉗子は、円形のために血管を分離するために使用される。

動物麻酔機械、脱水装置、 埋め込み機械、病理学的スライサー、冷凍機、組織スライサー、空気乾燥オーブン、神経光学顕微鏡、スキャナー、一般麻酔用のエンフルラン、4%パラホルムアルデヒド溶液、任意のエタノール、キシレン、高効率パラフィンワックス、ヘマトキシリンエオシン色素溶液、ハイドロリン酸、アンモニアスライド、ガラスカバー、中性、およびガムスライタ、および死ぬ材料、ピペット、遠心分離機、自動生化学分析装置、アラニンアミノトランスファーゼ、ALTキット、アスパラギン酸、アミノトランスレシーゼ、ASTキット、クレアチニンキット。体重を量った後、ラットは動物麻酔装置によってイオフルランで麻酔される。

腹部消毒後、鉗子とはさみを使用して、xiphoidプロセスの下に3センチメートルの中央値切開を行います。腹腔を開き、レトラクターを使用して肝臓を露出させ、肝胃靭帯を動員する。綿棒を使用して肝臓の中央葉を優しく反転させ、上向きに回してポルタの習慣を露出させます。

胆管、門脈、肝動脈を特定します。綿のスワップを使用して左下腹腔に向かって小腸を押し、下の静脈を右腎静脈に移動させ、門脈、肝動脈、眼内レンズで右腎静脈の上の下静脈を分離し、IOL、それぞれ3-0シルク糸でマークされた鉗子をスリップノットで覆う。左右下肢の皮膚を切り開き、眼用鉗子を使用して大腿静脈を露出させる。

低分子量ヘパリン625 IU/kgを大腿静脈からゆっくりと注入し、全身をヘパリン化する。3-0の縫合糸を持つ右腎静脈の上に門脈、肝動脈、および下の静脈をリゲートし、45分間持続する。腹腔内の小腸を交換し、ガーゼで覆います。

吸入麻酔はこれらの期間の間に減少する。45分後、門脈、肝動脈、右腎静脈の上の下静脈を解放する。筋肉と皮膚層を層状に縫合し、吸入麻酔を終了する。

4時間ごとに5mg/kgの皮下モルヒネを使用して術後鎮痛を提供する 目を覚まし、25プラスマイナス2度の温度で供給し続け、湿度50プラスマイナス10%の動物暖房ランプが必要です。この動物モデルでは、ラットを15分間の虚血に従って5群に無作為に分け、I15群、30分、I30群、45分、I45群、60分、I60、及び各群に10匹のラットを有するシャム群を用いた。各群の生存率は、手術後14日目に観察された。

すべてのラットはI 15、I 30およびシャム群で生き残った。8人はI 45グループで14日間生き残り、I 60グループで生き残ったのはわずか2人でした。結果は、ラットがせいぜい45分間、肝相を許容できることを示唆した。

実験の間、バイオシステムは、無肝期前後の心拍数および血圧、右内頸動脈挿管の変化を記録するために使用された。この結果、心拍数と平均動脈圧であるラットのMAPは、血管結紮後に劇的に変化することがわかりました。結紮後、腸内の肝虚血、鬱血、および浮腫、胃静脈瘤および脾腫が明らかであった。

80匹のラットを45分間虚血を含む8群に無作為に分け、T0、6時間の再灌流、T6、12時間、T12、24時間、T24、48時間、T48、72時間、T72、7日間、T7、T7、それぞれ14日間、T14。腎臓、膵臓、小腸、心臓および肺組織は、ラットが屠殺された後にHEで採取され、染色された。心臓を除いて、病理学的スコアはそれぞれ参照に従って与えられた。

結果は、肝外器官の最大傷害の時間が変化することを示した。膵臓の手術後6~24時間、肺では24~48時間であった。腸管と腎臓は、虚血の45分後に最も重傷を負った。

手術後24時間で腸粘膜の明らかな異常はなく、腎臓は48時間後に回復した。心臓に関しては、再灌流後の時間の経過とともに、局所心筋細胞ナルコシス、細胞の断片化および溶解、炎症細胞浸潤、および局所血管拡張および鬱血が手術後24〜48時間までに組織中に発見された。血清を採取し、ALT、AST、クレアチニン、およびアミラーゼのレベルを自動生化学分析装置によって検出した。

すべての指標は、病理学的変化とは異なり、24〜48時間でピークに達した。レベルは手術後48時間は基本的に正常であったが、病理学的損傷はまだ続いていた。要約すると、ラットのモデルは単純で、マイクロサージャリーなしで使いやすい、肝虚血後の肝外器官の虚血再灌流傷害の基礎的な研究に基礎を提供する。