Name: 近親繁殖マウス株に基づく歯髄炎の動物モデルとその組織学的解析 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-27T14:35:00.000+00:00
Duration: 5 min 6 s
Description: 学ぶ歯髄炎の動物モデルと組織学的解析法。NMRIマウスを用いて再現性の高い歯髄炎誘導法と定量的組織形態学的解析プロトコルを確立し、炎症の時間経過的変化を評価する方法を解説します。

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<table><tbody><tr><td>ベースモールド</td><td>イタリアのヒストライン研究所</td><td>R4166C2:D23</td><td>試料をパラフィンに埋め込むために</td></tr><tr><td>カーバイドバー #1/4 弾</td><td>ミッドウェスト、ウィチタフォールズ、テキサス州</td><td>389101</td><td></td></tr><tr><td>複合顕微鏡 Motic BA310</td><td>Motic Inc. Co. Ltd、香港</td><td>https://moticmicroscopes.com/products/ba310e</td><td></td></tr><tr><td>ジクロフェナクナトリウム 25mg/mL</td><td>インダス・ファーマ(DYCLO)</td><td>https://sahar.ph/product/dyclo-diclofenac-sodium-25-mg-ml-im-iv/</td><td>200&micro;L皮下</td></tr><tr><td>E型低速ハンドピース Rose201-M4</td><td>中国の佛山であること</td><td>https://www.beingfoshan.com/en/h-pd-353.html</td><td></td></tr><tr><td>カセットの埋め込み&nbsp;</td><td>イタリアのヒストライン研究所</td><td>R4004</td><td></td></tr><tr><td>安楽死チャンバー</td><td>ConductScience、イリノイ州アメリカ</td><td>CS-EUTH2A</td><td>7.25リットル容量、マウスとラット用[最大500g]</td></tr><tr><td>ファルコンチューブ 15 ml</td><td>巣</td><td>188271</td><td></td></tr><tr><td>ホルマリン&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ、ミズーリ州セントルイス、アメリカ合衆国</td><td>158127</td><td>buffered&nbsp;</td></tr><tr><td>蟻酸&nbsp;</td><td>BDHラボラトリーサプライズ プール(イングランド)&nbsp;</td><td>28428</td><td>10%</td></tr><tr><td>均質化器&nbsp;</td><td>オムニミキサーホモジナイザー、オムニ・インターナショナル、ジョージア州 アメリカ</td><td>https://omni-inc.com/high-shear-lab-homogenizers/omni-th-0-2ml-100ml/omni-tissue-homogenizer-th</td><td></td></tr><tr><td>インディア・インク</td><td>シグマ・オルドリッチ、ミズーリ州セントルイス、アメリカ合衆国</td><td>198285</td><td></td></tr><tr><td>K型15 歯内管ファイル</td><td>マニ、日本</td><td>https://www.mani.co.jp/en/product/dental_01.html</td><td></td></tr><tr><td>ケタミン-キシラジンカクテル</td><td>ブルックス・ファーマ・プライベート・リミテッド / マイラボ(プライベート)Ltd.</td><td></td><td>87.5mg/kgケタミン+12.5mg/kgキシラジン</td></tr><tr><td>ミクロトームHM 315 R</td><td>ドイツ、マイクロム</td><td>901100</td><td></td></tr><tr><td>マイクロモーターマラソンIII</td><td>BT-マラソン、サイヤン・マイクロテック株式会社、韓国</td><td>https://www.saeyang.com/theme/basic/sub/product/view.php?it_id=1752202111</td><td>最大速度の1/3での使用</td></tr><tr><td>マイクロピペット0.2-2およびマイクロ;L&nbsp;</td><td>フランス、ギルソン</td><td>https://www.gilson.com/default/ pipetman-p2-0-2-2-micro-l-metal -ejector.html?srsltid=AfmBOoobE 0iSWY_902ZHGZ7AoJ6wzN5PI 0H4V4vkxHQgK1mq7Wg2kkbS</td><td>0.2-2 & micro;L&nbsp;</td></tr><tr><td>リン酸塩緩衝塩水&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ、ミズーリ州セントルイス、アメリカ合衆国</td><td>P4417</td><td></td></tr><tr><td>社会科学向け統計パッケージ</td><td>IBM、アーモンク、ニューヨーク</td><td>SPSS for Mac バージョン 23.0&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>立体顕微鏡BMK-3リード</td><td>明治テクノ、日本</td><td>https://meijitechno.com/product/bmk-3-led-stereo-microscope/</td><td></td></tr><tr><td>手術用ブレード第22号</td><td>フェザーサージカルブレード、フェザーセーフティカミザー株式会社、大阪、日本</td><td>Facebook。12</td><td></td></tr><tr><td>ザイモサンA</td><td>シグマ・オルドリッチ、ミズーリ州セントルイス、アメリカ合衆国</td><td>カタログ番号Z4250</td><td>1 mL Zymosan から 1mg/mL</td></tr></tbody></table>

近親繁殖マウス株に基づく歯髄炎の動物モデルとその組織学的解析

An Animal Model of Pulpitis Based on an Outbred Mice Strain and Its Histological Analysis

The Naval Medical Research Institute (NMRI) mice have not been reported previously for creating a dental pulp inflammation model. In this protocol, we ...

本研究では、歯髄炎の発症および進展とその潜在的なメカニズムを調査するためのモデルとして、NMRIマウスを確立します。既存の手法は詳細な記述が不十分であり、試行錯誤や不必要な動物の喪失を招いていました。本プロトコルでは、歯髄炎の誘発および解析を標準化します。まず、長さ100 mm、直径0.7 mmのステンレス製矯正用ワイヤーを用意し、中央に5 mmのループを作ります。ループから5 mmの位置でワイヤーの両端を、急峻な屈曲を避けながら直角に曲げます。それぞれの直角曲げ部分から25 mmを測定して切り込みを入れ、自由端を外側に向けます。歯髄炎を誘導するために、まず必要な数のマウスをグループAとグループBに分けます。マウスを麻酔した後、10倍のロングアーム実体顕微鏡を調節し、牽引した上顎歯を直接観察できるようにします。次に、クリップを挟み、切り欠きのある部分を左右の上顎切歯と下顎切歯の間に配置します。クリップを離し、自由端を粘着テープで固定します。クリップを配置したら、歯科用ピンセットを使用して動物の頬を広げます。その後、10倍の倍率下で、低速ハンドピースに取り付けた1/4ラウンドカーバイドバーを用いて、右上顎第一大臼歯の中央に深さ1/2のクラスI窩洞を形成します。バーを低速で慎重に操作し、掃引動作で行います。次に、15番のKファイルを用いて歯髄を露出させます。グループAでは、歯髄を露出させたままにして歯髄炎を誘導します。グループBでは、露出した歯髄に0.2 µLのZymosan溶液を塗布し、そのまま露出させて歯髄炎を誘導します。動物の安楽死後、固定した上顎骨を回収し、10%ギ酸で3日間脱灰させます。22番のメスを用いて、正中面に沿って咬合面に平行に切開し、次にメスを上顎大臼歯の口蓋側尖の高さの口蓋側に配置して切断します。方向性を維持するため、咬合面をインクでマークします。溶かしたパラフィンをステンレス製のベース型に注ぎます。切断した顎の切断面を型の底に向けにして埋め込み、ブロックを凝固させます。その後、硬化したブロックを型から取り出し、ミクロトームに装着します。ミクロトームの厚さを3 µmに調整します。正中断面を切出し、清潔な帯電スライドガラスに転写します。咬合腔が見えるまで、複合顕微鏡で切片を順次観察します。歯髄腔全体と1～2本の根管を確認し、正しい正中方向であることを確認します。両群の組織学的画像では、対照組織と比較して、0時間から72時間にかけて炎症反応が漸進的に増加していることが示されました。高倍率像では、赤血球の血管外漏出と壊死領域が確認されました。組織形態学的解析により、両群において時間の経過とともに炎症が進行していることが示され、各時間の間隔で有意差が認められたことから、時間依存的な増加であることが示唆されました。このプロトコルにより、研究者は規定の

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学ぶ歯髄炎の動物モデルと組織学的解析法。NMRIマウスを用いて再現性の高い歯髄炎誘導法と定量的組織形態学的解析プロトコルを確立し、炎症の時間経過的変化を評価する方法を解説します。

近親繁殖マウス株に基づく歯髄炎の動物モデルとその組織学的解析

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