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방법 논문

규아 샤 프로 시저에 헴 Oxygenase - 1 Upregulation의 Bioluminescence 이미징

13.4K 조회수

DOI:

10.3791/1385

2009년 8월 28일

이 논문에서

요약

규아 샤, 중국어 번체 치료 피부 스크레이핑은 피하 microvascular 혈액 넘쳐 흐름을 발생합니다. 우리의 bioluminescence 이미징의 프로토콜보고 HO - 1 - 루시페라제 유전자 변형 생쥐 oxygenase - 1 여러 장기 (HO - 1).

초록

규아 샤는 피하 microvascular 혈액 넘쳐 흐름과 타박상을 일으킬 힘든 피부를 고용하고 중국의 전통 민속 요법입니다. 의 발광 생물 광학 이미징을위한 프로토콜 HO - 1 -

프로토콜

  1. 여성 HO - 1 - 루시페라제 유전자 변형 생쥐 (4-6 주 세)가 도착되면, 주식 타코닉 팜에서 구입할 수 있으며, 생쥐는 숙박 시설을 허용하는 최소 4 일 동안 동물의 주택 시설에 배치됩니다.
  2. bioluminescence 이미징을위한 준비 :
    1. 각 HO - 1 마우스의 무게를. 동물의 무게 luciferin의 복용량을 계산이 필요합니다.
    2. 제모 : 또는 다시 동물의 복부 및 /여 머리 제거제 나이르 ®를 적용하는 면으로 스왑을 사용합니다. 5-10초 기다 리면서. 머리를 닦아으로 깨끗한 면봉 스왑을 사용합니다. 깨끗한 남은 머리를 닦아 증류수에 조직의 한 조각을 찍어.
    3. 배경 잡음을 줄이기 위해 IVIS 100 역의 이미징 플랫폼 이외의 형광 검은 종이 (스트라 스 모어 Artagain ® 검은 종이)를 놓으십시오.
    4. luciferin (Xenogen 회사에서) 7.5 MG / ML (멸균 H 2 O에 용해)의 농도에 솔루션을 준비합니다. luciferin의 복용은 65.5 밀리그램 / kg 체중이다. 따라서, 20g의 마우스 0.175 ML luciferin 솔루션의 intraperitoneal 주사를 ....

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토론

HO - 1, 헴 oxygenase의 inducible 양식의 전사는 헴, 과산화수소, UV 조사, hypoxia, 물리적 스트레스 등 많은 요인에 의해 upregulated 있습니다. 이러한 보고된 HO - 1 bioluminescence 프로토콜로 온몸의 화상은 여러 장기에서 체계적 HO - 1 표현의 빠른 스냅샷을 제공합니다. 작은 동물에서, bioluminescence 이미징은 높은 감도에 - 생체내 유전자 발현 체계의 변경을 실시간으로 양적 세로 광학 평가, 그림과 같이 있습니다. Bioluminescence 분자 이미징은 비용을 절감하고 실천 빠르게 복잡한 시스템 생물학 가설의 조사에 필요한 통계 전력을 달성하고 제안 제약 및 기타 치료 개입의 전신 효과에 대한 평가하고, 작은 동물의 유전자 표현 assays의 처리량을 증가시킵니다. 한 제한은 해부학의 낮은 공간 해상도입니다. 단층 기능이 새로운 광학 이미징 시스템은 문제를 완화합니다. 마이크로 - CT 또는 MRI 작은 동물의 이미지 수집 및 등록 제대로 해부학을.......

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공개 사항

저자들은 공개할 이해관계가 없습니다.

감사의 글

K. 웡, STC 왕은 기능 및 분자 이미징 센터, 브리검 앤드 위민스 병원에서 기금에서 지원하는
K. 웡, STC 왕은 생명 공학 및 정보학, 메소 디스트 병원 연구소, 웨일 코넬 메디컬 칼리지를위한 센터에 의해 지원됩니다.
KK 크왕, 난 첸, JQ 르네는 바이오 메디컬 이미징, 매사 추세츠 종합 병원에 대한 Athinoula A. Martinos 센터에서 기금에 의해 지원됩니다.
Lenuta Kloetzer, 브래든 쿠오는 Neuroenteric 연구 센터, 매사 추세츠 종합 병원의 기금에 의해 지원됩니다
저자 DRS 감사합니다. Q. Zeng 및 광학 이미징 연구소, 브리검 및 기술 지원을위한 여성 병원의 X. 쑤.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
루시페린(Luciferin)Caliper Life SciencesP/N 122796이전 Xenogen
IVIS 100Caliper Life Sciences이전 Xenogen

참고문헌

  1. Zhang, W. Selection of potential therapeutics based on in vivo spatiotemporal transcription patterns of heme oxygenase-1. J Mol Med. 80, 655-6564 (2002).
  2. Zhang, W. Rapid in vivo functional analysis of tr....

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재인쇄 및 허가

태그

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