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방법 논문

햄스터의 지느러미 피부에 피부 Leishmaniasis : Antileishmanial 약물의 상영을위한 유용한 모델

21.5K 조회수

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DOI:

10.3791/3533

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2012년 4월 21일

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이 논문에서

요약

의 intradermal 주입하여 피부 leishmaniasis에 대한 실험 햄스터 모델의 최적화 Leishmania 지느러미 피부에 promastigotes. 이 방법은 접종시, 후속, 병변의 특성, 치료의 적용과 임상 샘플을 얻는 데 유용합니다. 음식과 물 공급을 위해 운동, 검색은 연극과 사회 활동이 보존됩니다.

초록

전통적으로, 햄스터는 실험적으로 주둥이이나 노상 강도에 주사한다. 그러나 이들 사이트에 궤양이 항상 발생하지, 병변 크기의 측정이 어려운 절차이며 동물 때문에 병변으로 인해 먹고 호흡하며 이동하기 어려움을 보여줍니다. 피부 leishmaniasis, 젊은 성인 남성과 여성의 골든 햄스터를위한 햄스터 모델을 최적화하기 위해서는 (Mesocricetus auratus) 1-1.5 X L0 7 Leishmania 종의 promastigotes 이후 병변의 진행과 함께 지느러미 피부에 intradermally 주입되었다이 최대에 대한 평가되었다 16주 게시물 감염. 그들은 다른 종족에 의해 감염에 감염될만큼 그것이 Leishmania 상대로 마약을 평가할 바이오 모델이 적절한 것으로 간주되기 때문에 골든 햄스터가 선택되었다. 만성하지만 제어 병변, 그리고 인간에서 관찰 이들과 유사한 증상과 임상 진화의 햄스터 결과의 피부 감염. 따라서 식당 Oindurations 및 궤양의 면적에 따라 병변의 크기를 측정하여 감염의 F 정도는 가능합니다. 이러한 접근 방식은 접종시의 다양성과 쉬운 관리를 입증되었습니다 다른 치료 후 임상 샘플을 다른 방법과 취득을 통해 전형적인 병변 (궤양), 트리 트먼트의 응용 프로그램을 후속 조치 및 특성. 이 방법은 운동과 관련하여 동물의 삶의 질, 음식, 물, 놀이와 isalso가 보존 사회 활동에 대한 검색을 사용함으로써.

프로토콜

1. 햄스터의 감염

1. 동물

1백40-1백60g 무게 탐욕 암컷과 수컷 골든 햄스터 (Mesocricetus auratus), 6-8 주 동안 사용됩니다. 그들은 표준 설치류 말린 음식을 먹지 않나와 물 광고 libitum 함께 제공, 온도 제어 숙소에서 동물 시설에서 지내게됩니다. 동물과 관련된 모든 절차는 실험 동물의 이용 기관 윤리위원회의 승인을하고 있습니다. dermotropic Leishmania의 기생충 동물과 실험적인 감염이 sexed되기 전에, 표시 및 표준화된 절차에 따라 가중치를. sexing 들어, 동물 등 mammary 라인과 여성의 짧은 ano-생식기 거리 시각화, 또는 고환과 남성의 항문과 포피 사이에 큰 거리의 시각화와 같은 고유한 특징에 대해 검사되었습니다. 그런 다음, 동물 귀 피어싱이나 배어 면봉으로 피부의 면적을 더럽히는 것에 의해 표시됩니다피크르산 인치 고막 천공의 경우 70 % 알코올로 세척 후 청력은 설치류 동물을위한 귀 펀치를 사용하여 뚫었있다. 혈관이있는 지역은 피해야한다. 케타민을 (50 밀리그램 / ㎏)과 Xilacine (20 밀리그램 / ㎏) 260-300μl 25-G 바늘의 볼륨에 intraper....

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토론

피부 leishmaniasis는 열대와 neotropics의 발병이다. 그것은 종종 있기 때문에 작은 피부 nodules에서 총 점막 조직 파괴에 이르기까지 임상 발현의 다양한 스펙트럼의 질병의 그룹로 언급됩니다. 대부분의 사용 가능한 약물은 비용이 많이 드는이며, 장기 치료 regimens가 필요하고 새로운 약물의 발견 necessitating, 점점 비효 해지고 있습니다.

마우스 모델은 널리 사용되고 있지만, 일부 단점을 가지고있다. 높은 BALB / C에서 본대로 확대 궤양 병변을 특징으로 영구적인 감염 취약하고 따라서 예를 들어, dermotropic Leishmania 종의 promastigotes의 intradermal 주입 후 개발 병변에 근거하여, 생쥐는 세 그룹으로 나눌 수 DBA / 2, DBA / 3 생쥐, CBA / H, C3H/He 및 A / J와 매우 강한 그룹에서 따로 병변 typi에서 본대로 병변은 8 주 이내에 해결할 수있는 비교.......

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공개 사항

관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.

감사의 글

COLCIENCIAS과 열대 질병에 대한 제품 개발을위한 센터 - - CIDEPRO이 연구는 Antioquia 대학 (CODI), 과학 기술 개발을위한 콜롬비아 연구소에서 연구위원회에서 교부금에 의해 지원되었다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
시약의 이름 유형 회사 카탈로그 번호
케타민을 시약 홀리데이 - 스콧 SA
Xilacine 시약 합성
PBS 시약 GIBCO 14190-136
디지털 캘리퍼스 장비 어부 15-077-958
Giemsa 시약 시그마 GS1L-1L
포르말린 시약 노바 실험실 11,273
파라핀 시약 Pechiney 플라스틱 포장 PM-996
Haemotoxilin 시약 노바 실험실 10870103
Eosin 노바 실험실 10870203
코닥 Ektachem 건식 화학 장비 코닥 Ektachem DT-60
meglumine antimoniate 시약 Aventis
현미경 사용법 장비 니콘 YS2-T

참고문헌

  1. WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
  2. Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice.

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