Funktionelle studier af det auditive system hos pattedyr er traditionelt blevet udført ved anvendelse af rumligt fokuserede teknikker såsom elektrofysiologiske optagelser. Følgende protokol beskriver en fremgangsmåde til at visualisere store mønstre fremkaldt hæmodynamisk aktivitet i katten cortex hjælp af funktionel magnetisk resonans billeddannelse.
Aktuelle viden om sensoriske forarbejdning i pattedyr auditive system er hovedsageligt stammer fra elektrofysiologiske studier i en række dyremodeller, herunder aber, fritter, flagermus, gnavere og katte. For at tegne passende paralleller mellem mennesker og dyremodeller af auditive funktion, er det vigtigt at etablere en bro mellem menneskers funktionelle billeddiagnostiske undersøgelser og animalske elektrofysiologiske studier. Funktionel magnetisk resonans (fMRI) er en etableret, minimalt invasiv metode til måling af brede mønstre af hæmodynamisk aktivitet på tværs af forskellige områder af hjernebarken. Denne teknik er almindeligt anvendt til at undersøge sensorisk funktion i den menneskelige hjerne, er et nyttigt redskab i at knytte studier af auditive behandling i både mennesker og dyr og er med succes blevet anvendt til at undersøge auditive funktion i aber og gnavere. Følgende protokol beskriver en eksperimentel procedure for at undersøge auditiv funktion i bedøvede voksenkatte ved at måle stimulus-fremkaldte hæmodynamiske ændringer i auditive cortex hjælp fMRI. Denne metode gør det lettere sammenligning af de hæmodynamiske respons på tværs af forskellige modeller af auditive funktion dermed fører til en bedre forståelse af arter-uafhængige funktioner i pattedyr auditive cortex.
Nuværende forståelse af auditive behandling i pattedyr er hovedsageligt stammer fra invasive elektrofysiologiske studier hos aber 1-5, fritter 6-10, flagermus 11-14, gnavere 15-19, og katte 20-24. Elektrofysiologiske teknikker almindeligvis anvender ekstracellulære mikroelektroder at optage aktiviteten af en enkelt eller flere neuroner inden for et lille område af neuralt væv, der omgiver elektroden spids. Etableret funktionelle billeddiagnostiske metoder, såsom optisk billeddannelse og funktionel magnetisk resonans (fMRI), tjene som nyttige supplementer til ekstracellulære indspilninger ved at give en makroskopisk perspektiv samtidig driven aktivitet på tværs af flere, rumligt adskilte områder af hjernen. Intrinsic signal optisk billeddannelse letter visualisering af fremkaldte aktivitet i hjernen ved at måle aktivitetsrelaterede ændringer i refleksionsegenskaber af overfladevand væv mens fMRI udnytter blod-ilt-niveau-afhængig (BOLD)kontrast til at måle stimulus-fremkaldte hæmodynamiske forandringer i hjernen regioner, der er aktive i løbet af en bestemt opgave. Optisk billeddannelse kræver direkte eksponering af kortikale overflade udtrykker udviklingen i overfladevævet reflektans der er relateret til stimulus-fremkaldte aktivitet 25. I sammenligning, fMRI er noninvasive og udnytter paramagnetiske egenskaber af deoxygenated blod til at måle både kortikale overflade 26-28 og sulcus-baserede 27,29 fremkaldte aktivitet inden for en intakt kranium. Stærke sammenhænge mellem BOLD signal og neuronal aktivitet i human primat visuelle cortex 30 og i menneskets auditive cortex 31 validere fMRI som et nyttigt redskab til at studere sensorisk funktion. Da fMRI har været brugt i udstrakt grad til at studere funktioner i auditive vej såsom tonotopic organisation 32-36, lateralisering auditive funktion 37 mønstre af kortikale aktivering, identifikation af kortikale regioner 38, effekter af lydintensitet på auditive respons egenskaber 39,40, og karakteristika af BOLD respons tidsforløbet 29,41 i human, abe, og rotte modeller, udvikling af en passende funktionel billeddannelse protokol til at studere auditive funktion i katten ville give et nyttigt supplement til den funktionelle billeddannelse litteratur. Mens fMRI har også været brugt til at udforske forskellige funktionelle aspekter af den visuelle cortex i den bedøvede kat 26-28,42, har kun få studier brugt denne teknik til at undersøge sensorisk forarbejdning i kat auditive cortex. Formålet med denne protokol er at etablere en effektiv metode til at bruge fMRI at kvantificere funktion i den auditive cortex i bedøvede kat. De eksperimentelle procedurerne i dette manuskript med succes er blevet brugt til at beskrive de elementer i BOLD responstid kursus i den voksne kat auditive cortex 43.
Ved udformningen af en fMRI eksperiment for en bedøvet dyremodel af auditive funktion, bør der gives følgende emner nøje overvejelse: (i) virkningen af anæstesi på kortikale svar, (ii) virkningen af baggrunden scanner støj, og (iii) optimering af dataindsamlingen fase af den eksperimentelle procedure.
Mens en bedøvet præparat giver den vigtige fordel, at producere en længere periode sedation og minimere potentielle hoved bevægelse under en funktionel billeddannel…
The authors have nothing to disclose.
Forfatterne vil gerne anerkende bidragene fra Kyle Gilbert, som designede den brugerdefinerede RF-spole, og Kevin Barker, som designede MR-kompatible slæden. Dette arbejde blev støttet af den canadiske Institutes of Health Research (CIHR), naturvidenskab og teknik Forskningsråd Canada (NSERC) og Canada Foundation for Innovation (CFI).
Material | |||
Atropine sulphate injection 0.5 mg/mL | Rafter 8 Products | ||
Acepromazine 5 mg/mL | Vetoquinol Inc. | ||
Ketamine hydrochloride 100 mg/mL | Bimeda-MTC | ||
Dexmedetomidine hydrochloride (Dexdomitor 0.5 mg/mL) | Orion Pharma | ||
Isoflurane 99.9% | Abbott Laboratories | ||
Lidocaine (Xylocaine endotracheal 10 mg/metered dose) | Astra Zeneca | ||
Lubricating opthalmic ointment (Refresh Lacri Lube) | Allergan Inc. | ||
Saline 0.95% | |||
IV Catheter 22g (wings) | |||
IV Extension Set | Codan US Corp. | BC 269 | |
IV Administration Set 10 drips/mL | |||
Endotracheal tube 4.0 | |||
Heating pads (Snuggle Safe) | Lenric C21 Ltd. | ||
Syringe 60 mL | |||
Equipment | |||
External sound card | Roland Corporation | Cakewalk UA-25EX | |
Stereo power amplifier | Pyle Audio Inc. | Pyle Pro PCAU11 | |
MRI-compatible insert earphone system | Sensimetric Corporation | Model S14 | |
Foam ear tips for insert earphones | E-A-R Auditory Systems | Earlink 3B | |
End-tidal CO2 monitor | Nellcor | N-85 | |
MRI-compatible pulse oximeter | Nonin Medical Inc. | Model 7500 | |
Syringe pump | Harvard Apparatus | 70-2208 |