QuEChERS 분석법 및 가스 크로마토그래피-탠덤 질량분석법을 이용한 아보카도 품종의 45가지 살충제 측정

화학 분석에서 매트릭스 효과(ME)는 다양한 방법으로 정의할 수 있지만, 널리 받아들여지는 일반적인 정의는 다음과 같습니다: 신호의 변화, 특히 특정 분석물의 분석 중에 샘플 매트릭스 또는 그 일부가 존재할 때 검량선의 기울기 변화를 나타냅니다. 중요한 측면으로, ME는 표적 분석물¹에 대한 정량 측정의 정확도에 직접적인 영향을 미치기 때문에 모든 분석 방법의 검증 과정에서 철저한 조사가 필요합니다. 이상적으로, 시료 전처리 절차는 시료 매트릭스에서 성분을 추출하지 않도록 충분히 선택적이어야 합니다. 그러나 상당한 노력에도 불구하고 이러한 매트릭스 구성 요소 중 다수는 대부분의 경우 여전히 최종 결정 시스템으로 끝납니다. 결과적으로, 이러한 매트릭스 구성 요소는 종종 복구 및 정밀도 값을 손상시키고, 추가 노이즈를 유발하며, 방법과 관련된 전체 비용과 노동력을 증가시킵니다.

가스 크로마토그래피(GC)에서 ME는 GC 시스템 내에 다양한 메커니즘을 통해 표적 분석물과 상호 작용하는 활성 부위의 존재로 인해 발생합니다. 한편으로, 매트릭스 성분은 표적 분석물과 상호 작용할 수 있는 이러한 활성 부위를 차단하거나 마스킹하여 빈번한 신호 향상을 초래합니다². 반면에, 장애물이 없는 활성 부위는 강한 상호 작용으로 인해 피크 테일링 또는 분석물 분해를 유발하여 음의 ME로 이어질 수 있습니다. 그러나 이는 특정 경우에 잠재적인 이점을 제공할 수 있습니다². GC 시스템에서 완전한 불활성 상태를 달성하는 것은 매우 불활성인 구성 요소를 사용하고 적절한 유지 관리를 수행함에도 불구하고 매우 어렵다는 점을 강조하는 것이 중요합니다. 지속적인 사용으로 GC 시스템에서 매트릭스 구성 요소의 축적이 더욱 두드러져 ME가 증가합니다. 오늘날에는 산소, 질소, 인, 황 및 이와 유사한 원소를 포함하는 분석물이 이러한 활성 부위와 쉽게 상호 작용하기 때문에 더 큰 ME를 나타낸다는 것이 널리 알려져 있습니다. 반대로, 탄화수소 또는 유기 할로겐과 같은 매우 안정적인 화합물은 이러한 상호 작용을 겪지 않으며 분석 중에 관찰 가능한 ME를 나타내지 않습니다 ^2,3.

전반적으로 ME는 완전히 제거할 수 없으므로 매트릭스 구성 요소를 완전히 제거할 수 없는 경우 보정 또는 수정을 위한 여러 전략을 개발하게 됩니다. 이러한 전략 중 중수소화 내부 표준물질(IS), 분석물 보호제, 매트릭스 정합 보정, 표준물질 첨가 방법 또는 주입 기술의 수정의 활용이 과학 문헌 1,2,4,5에 문서화되어 있습니다. SANTE/11312/2021 가이드라인도 이러한 전략을 권장하고^{있습니다 6}.

ME를 보상하기 위한 매트릭스 매칭 보정의 적용과 관련하여, 실제 상황에서의 시료 염기서열은 다양한 유형의 식품 또는 동일한 상품의 다양한 시료를 포함합니다. 이 경우, 동일한 상품의 샘플을 사용하면 모든 샘플에서 ME를 효과적으로 보상할 수 있다고 가정합니다. 그러나 기존 문헌에는 이 문제를 구체적으로 조사하는 충분한 연구가 부족하다⁷.

상당한 비율의 지방과 색소를 함유한 매트릭스에서 살충제의 다중 잔류물을 측정하는 것은 어려운 작업입니다. 상당한 양의 공발추출된 물질은 추출 효율에 상당한 영향을 미치고 후속 크로마토그래피 측정을 방해하여 컬럼, 소스 및 검출기를 손상시킬 수 있으며 상당한 MEs ^8,9,10을 초래할 수 있습니다. 결과적으로, 이러한 매트릭스에서 미량 수준의 살충제를 분석하려면 분석 전에 매트릭스 성분을 크게 줄이면서 높은 회수율을 보장해야 한다⁷. 높은 회수율을 얻는 것은 농약 분석이 신뢰할 수 있고 정확하며 규제 표준을 준수하도록 하는 데 매우 중요합니다. 이는 농업 및 관련 분야에서 식품 안전, 환경 보호 및 정보에 입각한 의사 결정을 보장하는 데 매우 중요합니다.

아보카도는 전 세계적으로 열대 및 지중해성 기후에서 재배되는 상업적 가치가 높은 과일로 원산지와 수많은 수출 시장에서 널리 소비됩니다. 분석적 관점에서 아보카도는 견과류와 유사한 상당한 수의 지방산(즉, 올레산, 팔미트산, 리놀레산)을 포함하는 복잡한 매트릭스이며, 녹색 잎과 같은 중요한 색소 함량, 다른 과일에서 발견되는 것과 유사한 당 및 유기산을 함유하고 있습니다¹¹. 지방이 많은 특성으로 인해 분석을 위해 분석 방법을 사용할 때 특별한 주의를 기울여야 합니다. GC-MS를 사용하여 아보카도에 대한 잔류 농약 분석이 수행되었지만 일부 사례에서 8,12,13,14,15,16,17,18,19,20에 비해 상대적으로 빈도가 낮았습니다. 대부분의 경우, Qu ick-Easy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe(QuEChERS) 방법의^{버전이 적용되었다 8,12,13,14,15,16,17,18}. 이러한 연구 중 어느 것도 다양한 아보카도 품종 간의 ME의 일관성을 조사하지 않았습니다.

따라서 이 연구의 목적은 포름암모늄 및 GC-MS/MS와 함께 QuEChERS 방법을 사용하여 다양한 종류의 아보카도(예: Criollo, Hass 및 Lorena)에서 45가지 대표적인 살충제에 대한 ME의 일관성과 회수 값을 연구하는 것이었습니다. 우리가 아는 한, 이러한 유형의 연구가 이러한 지방 매트릭스 샘플에 대해 수행된 것은 이번이 처음입니다.

1. 재고 및 작업 용액의 준비

알림: 안전상의 이유로 프로토콜 전반에 걸쳐 니트릴 장갑, 실험실 가운 및 보안경을 착용하는 것이 좋습니다.

1. 45가지 상업용 살충제 표준물질( 재료 표 참조) 각각의 개별 원액을 10mL 용량 플라스크의 아세토니트릴에서 약 1,000mg/L로 준비합니다.
2. 위의 개별 스톡 용액을 결합하여 25mL 용량 플라스크의 아세토니트릴에 400mg/L 스톡 용액을 준비합니다.
   참고: 이 혼합 솔루션은 복구 및 보정 실험을 위한 작업 솔루션을 준비하는 데 사용됩니다.
3. 10mL 용량 플라스크의 아세토니트릴에서 각각 750mg/L 및 1,050mg/L 농도의 atrazine-d₅ 및 triphenyl phosphate(TPP) 원액을 준비합니다. atrazine-d₅ 를 절차적 내부 표준물질(P-IS)로, TPP를 주입 내부 표준물질(I-IS)로 활용합니다.
   참고: 이상적인 시나리오는 각 특정 표적 분석물질에 대해 동위원소로 표지된 내부 표준물질을 활용하는 것입니다.
4. 10mL 용량 플라스크에 포름산(분해 방지용) 0.05%(v/v)를 함유한 아세토니트릴로 스톡 회수 용액을 준비하여 살충제의 경우 10, 100 및 400μg/kg 샘플 등가물을, P-IS의 경우 200μg/kg을 별도로 수득합니다. 이 용액을 -20 °C의 어두운 곳에서 호박색 유리 바이알에 보관하십시오.
5. 살충제와 P-IS의 보정 용액을 10mL 용량 플라스크에 0.05%(v/v)의 포름산과 함께 아세토니트릴에 준비하여 각각 5, 10, 25, 75, 200, 400 및 600μg/kg 및 200ng/ng를 수득하고 -20°C의 어둠 속에서 호박색 유리 바이알에 보관합니다.
   알림: 실험 작업 전반에 걸쳐 동일한 솔루션을 사용할 수 있지만 각 사용 직후 지정된 조건에서 보관하는 것이 필수적입니다.
6. 3-에톡시-1,2-프로판디올 100g/L, L-굴론산 γ-락톤 10g/L, D-소르비톨 10g/L, 시키믹산 5g/L를 함유한 분석물 보호제의 혼합물을 0.5%(v/v)의 포름산과 함께 물에 대한 아세토니트릴의 4/1(v/v) 비율로 준비합니다.
   참고: 이 분석물 보호제 혼합물은 ME를 완화하기 위해 주입 직전에 첨가해야 합니다.

2. 시료 채취

1. 슈퍼마켓에서 구할 수 있는 세 가지 아보카도 종(예: Criollo, Hass, Lorena)의 샘플을 수집합니다. 각 샘플의 무게는 약 1kg이며, 이는 모든 후속 연구를 수행하기에 충분하고 Directive 2002/63/CE²¹에 부합하는지 확인합니다.
   참고: 살충제 잔류물의 존재 가능성을 최소화하기 위해 유기 샘플을 우선적으로 선택했습니다.
2. 수집된 아보카도 샘플을 실험실로 운반하고 다지퍼를 사용하여 파이프 없이 개별적으로 균질화합니다( 재료 표 참조). 균질화된 시료를 분석할 때까지 4°C의 호박색 유리 용기에 보관합니다.
   참고: 전체 연구에서 동일한 아보카도 샘플이 사용됩니다. 따라서 매번 사용 직후 지정된 조건에서 보관하는 것이 중요합니다.

3. 포름암모늄과 함께 QuEChERS 방법을 활용한 시료 전처리

참고: 그림 1 은 포름암모늄을 사용한 QuEChERS 분석법의 개략도를 보여줍니다.

1. 50mL 원심분리기 튜브에서 각 아보카도 샘플 5g의 무게를 칭량합니다( 재료 표 참조).
2. 50μL의 P-IS 용액을 추가하여 200μg/kg의 농도를 생성합니다. 회수 평가를 위해 1.4단계에서 준비한 살충제 용액을 추가하여 10, 100 및 400μg/kg(각각 n = 5)의 농도를 생성합니다.
3. 스파이크가 샘플에 완전히 통합되도록 튜브를 30초 동안 소용돌이칩니다.
4. 원심분리기 튜브에 아세토니트릴 10mL를 추가합니다. 70rpm으로 튜브를 5분 동안 흔듭니다.
5. 포름산암모늄 2.5g을 넣고 70rpm에서 5분 동안 튜브를 다시 흔든 다음 1,800× g 에서 5분 동안 원심분리합니다.
6. 150mg의 무수_MgSO4, 50mg의 1차-2차 아민(PSA) 50mg, 50mg의 옥타데실실란(C₁₈), 10mg의 흑연화 카본 블랙(GCB) 및 60mg의 산화지르코늄 기반 흡착제 Z-Sep+를 함유한 2mL 원심분리기에 분산-고체상 추출(d-SPE)을 사용하여 정제하기 위해 추출물 1mL를 추가합니다. 튜브를 30초 동안 소용돌이치고 1,800× g 에서 5분 동안 원심분리합니다.
7. 추출물 200μL를 자동시료주입기 바이알에 옮기고, 1.6단계에서 준비한 분석물 보호제 용액 20μL를 추가하고, TPP 용액 50μL를 넣습니다.
8. GC-MS/MS 시스템을 사용하여 기기 분석을 수행합니다(섹션 4 참조).
9. d-SPE 단계(단계 3.6) 중에 15mL 튜브에서 상층액 5mL를 세척하는 경우를 제외하고 블랭크 추출물을 사용하여 위에서 설명한 것과 동일한 절차에 따라 매트릭스 일치 보정을 수행합니다. 3.7단계에서 스파이크 및 P-IS 솔루션을 추가합니다. 자동 시료 주입기 바이알에 보정 표준 용액을 추가하여 TPP와 함께 5, 10, 25, 50, 100, 200, 400 및 600 μg/kg을 수득하면 최종 부피는 270 μL가 됩니다.
   참고: 전반적으로 각 아보카도 품종과 아세토니트릴 전용 보정에 대해 매트릭스 일치 보정 곡선을 구성해야 합니다.

4. GC-MS/MS를 이용한 기기 분석

1. 전자 이온화 인터페이스(−70eV) 및 자동 시료 주입기( 재료 표 참조)가 장착된 삼중 사중극자(TQ)가 있는 GC-MS/MS 시스템을 사용하여 분석을 수행합니다.
2. MS GC 컬럼(길이 30m, 내경 0.25mm, 필름 두께 0.25μm의 실리카 본드)과 초고순도 헬륨 을 1.2mL/분의 일정한 유속으로 운반 가스로 사용합니다.
3. 장비 작업을 진행하기 전에 다음 매개변수를 확인하십시오.
   1. 가스 압력이 올바른지 확인하십시오: 헬륨 은 140psi , 아르곤 은 65psi입니다.
   2. 로터리 펌프 오일의 상태를 점검하여 깨끗하고 적절한 수준인지 확인하십시오.
   3. 주입 주사기에 이전 주입으로 인한 장애물이 없는지 확인하십시오.
   4. 세척 바이알에 각 용매가 충분한 부피로 들어 있는지 확인합니다.
   5. 소모품 카운터(격막, 라이너)가 한계에 도달하지 않았는지 확인하십시오.
4. 전면 패널에 있는 메인 GC 스위치를 켜고 후면에 있는 MS 스위치를 켭니다.
5. GC-MS/MS 시스템의 모든 파라미터를 제어하는 GCMS 실시간 분석 소프트웨어를 엽니다.
   참고: 기기 시스템에는 기본적으로 GCMS 실시간 분석 소프트웨어가 포함되어 있습니다.
6. Vacuum Control(진공 제어) | 고급 | 로터리 펌프 1을 사용하여 진공 시스템을 시작합니다.
   알림: 이 창에서 압력을 모니터링하여 9.0Pa보다 낮아야 하는 최적의 진공 값을 결정합니다. 약 12 시간 정도 소요됩니다.
7. 시작을 클릭하여 터보 분자 펌프 1과 터보 분자 펌프 2를 켭니다.
8. Ion Source Heater 옵션에 대해 Start(시작)를 클릭합니다.
   알림: 권장 시간인 1시간 후에 시스템의 진공을 확인하여 권장 값이 1.6e-3Pa보다 낮은지 확인하십시오.
9. MS 인터페이스 온도 를 250°C 로 설정하고 이온 소스 온도 를 300°C로 설정합니다.
10. GC 오븐을 초기 온도 50°C에서 1분 동안 유지한 다음 ramp 25°C/min의 속도로 180°C까지 올립니다. 그런 다음 온도를 230°C/min에서 5°C로 높인 다음 25°C/min에서 290°C로 높입니다. 마지막으로 290분 동안 온도를 6°C로 일정하게 유지합니다. 총 분석 시간은 24.6분입니다.
11. 이 모든 시스템이 켜지면 닫기를 클릭하십시오.
12. 분석 소프트웨어에서 Tuning 옵션을 클릭하고 Peak Monitor View 를 클릭하여 질량분석기 조건의 초기 검증을 수행합니다.
    참고: 필요한 경우 자동 조정을 수행합니다.
13. Acquisition( 획득)을 클릭하고 표시된 창에서 Download Initial Parameters(초기 파라미터 다운로드)를 클릭합니다. 장비가 준비 GC 및 준비 MS인지 확인합니다.

5. 데이터 수집

1. 소프트웨어에서 새 배치 파일을 클릭하고 샘플 이름, 샘플 ID, 분석법 파일, 데이터 파일, 주입 볼륨 및 튜닝 파일과 같은 정보가 포함된 시퀀스를 생성합니다. 필요에 따라 행을 추가하고 저장을 클릭합니다.
2. Batch Start를 클릭하고 주입 프로세스를 시작합니다.
3. 비분할 모드에서 250°C에서 주입을 수행하여 주입 부피를 1μL로 유지합니다. 주입 후 1분 후에 분할을 엽니다.
   참고: 주입 사이에 각 용매로 한 번의 헹굼을 사용하여 메탄올, 에틸 아세테이트 및 아세토니트릴로 10μL 주사기를 세척해야 합니다. 모든 주사는 삼중으로 수행됩니다.
4. TQ가 있는 MS/MS 시스템에서 사용되는 표준 모드인 MRM(Multiple Reaction Monitoring) 모드를 사용하여 분석물을 분석합니다.
   참고: 표 1 은 멀티클래스 살충제, P-IS 및 I-IS에 대한 머무름 시간(분)과 정량자 및 한정자 전이를 제공합니다. 정량 분석은 P-IS 이온에 대한 정량 이온의 피크 면적 비율에 의존합니다. I-IS는 사출 중 품질 관리를 위해 사용됩니다. 보충 파일 1 에는 분석된 45가지 살충제 모두에 대한 크로마토그램이 포함되어 있습니다.
5. 데이터 분석을 위해 Postrun Analysis 소프트웨어를 엽니다.
   참고: 기기 시스템에는 기본적으로 GCMS Postrun Analysis 소프트웨어가 포함되어 있습니다.
6. 분석할 주입을 클릭하고, 분석물질이 포함된 표를 탐색하고, 관심 피크를 선택합니다.
7. 피크 또는 관심 영역을 클릭하여 크로마토그램을 시각화합니다. 피크 적분을 검토하고 필요한 경우 수동 적분을 수행합니다. 필요한 계산 및 분석법 평가를 수행하기 위해 모든 분석물의 영역을 확인합니다.

SANTE/11312/2021 가이드라인6에 따라 분석 방법의 포괄적인 검증이 수행되었으며, 여기에는 선형성, ME, 회수 및 반복성 평가가 포함됩니다.

선형성 평가를 위해 여러 농도 수준(5 - 600 μg/kg 범위)에서 스파이크된 블랭크 샘플을 사용하여 매트릭스 일치 보정 곡선을 구성했습니다. 선택된 대부분의 살충제에 대한 결정 계수(R2)는 0.99 이상인 것으로 나타났으며, 이는 농도와 반응 사이에 매우 선형적인 관계가 있음을 나타냅니다. 식품 모니터링 목적으로 설정된 10μg/kg의 설정된 최대 잔류물 한계(MRL)를 준수하여 5μg/kg의 가장 낮은 보정 수준(LCL)이 선택되었습니다22.

ME를 평가하기 위해, 순수 용매와 매트릭스 매칭 보정 조건 간에 멀티클래스 살충제의 보정 곡선의 기울기를 비교했습니다. 예시적인 예로, 그림 2 는 용매의 곡선과 카보푸란에 대한 3개의 매트릭스 각각을 비교한 것입니다. ME는 방정식 (1)7을 사용하여 계산되었으며, 신호 향상(양수 백분율) 또는 신호 억제(음수 백분율)를 나타내는 백분율을 산출했습니다.

매트릭스 효과(%) = (1)

백분율 범위를 기반으로 제시된 ME 분류 시스템은 살충제 신호에 대한 매트릭스의 영향에 대한 통찰력을 제공하여 분석 결과의 해석을 돕습니다. 카보푸란의 모든 경우에서 20% 이상의 양성 ME가 얻어졌다. 그러나 매트릭스 정합 보정 곡선 생성의 결과는 대부분의 살충제/품종 조합에 대해 20% 미만(연성 ME로 분류됨)의 상대적으로 일관된 ME를 나타냈습니다( 표 2 및 그림 3 참조).

분석의 정확성과 반복성을 평가하기 위해 빈 샘플에 세 가지 농도 수준(10, 100 및 400μg/kg, 각 농도당 n = 5)의 살충제를 주입했습니다. 그림 4 의 결과는 각 아보카도 유형에 대해 평균 회수율이 허용 범위인 70-120% 내에 있는 살충제의 수를 보여줍니다. 또한 표 3 은 얻은 모든 특정 값에 대한 자세한 데이터를 제공합니다. 테스트된 살충제의 상당 부분이 회수율이 특정 범위 내에 속하며 상대 표준 편차(RSD) 값이 20% 미만이었습니다.

그림 1: 아보카도 샘플에서 잔류 농약을 추출하기 위해 포름암모늄을 사용한 QuEChERS 분석법의 개략도. 약어: QuEChERS = Qu ick-E asy-Cheap-E ffective-R ugged-S afe; IS = 내부 표준; PSA = 1차-2차 아민; GCB = 흑연화 카본 블랙; QC = 품질 관리; GC-MS/MS = 가스 크로마토그래피-탠덤 질량분석법. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 2: carbofuran에 대한 용매와 매트릭스의 보정 곡선 비교. 용매 : y = 0.0028x - 0.0054 및 R2 = 0.9974; 크리올로: y = 0.0050x + 0.0050, R2 = 0.9994, ME = 80%; 하스 : y = 0.0037x - 0.0109, R2 = 0.9977 및 ME = 30 %; 로레나 : y = 0.0041x + 0.0053, R2 = 0.9998 및 ME = 42 %. 약어: ME = 매트릭스 효과; P-IS = 절차적 내부 표준. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 3: 아보카도 품종에 대한 각각의 ME 범위에 따라 분류된 선택된 살충제의 수. ME의 분류는 부드러움(-20%에서 20% 사이의 값), 중간(-20%에서 -50% 사이 또는 20%에서 50% 사이의 값), 강함(50%를 초과하거나 -50% 미만으로 떨어지는 값)의 세 가지 범주를 기반으로 합니다. 약어: ME = 매트릭스 효과. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 4: 3가지 아보카도 품종에서 허용 회수 범위를 벗어나거나 회수 범위 내에 있는 살충제의 수가 10, 100, 400μg/kg(n = 15)으로 급증했습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

표 1: P-IS 및 I-IS와 함께 선택한 살충제의 GC-MS/MS 분석에 사용된 머무름 시간, 정량자 및 분출자 전이. 약어: P-IS = 절차적 내부 표준; I-IS = 사출 내부 표준물질; GC-MS/MS = 기체 크로마토그래피-탠덤 질량분석법; HCB = 헥사클로로벤젠; α-HCH = 알파-헥사클로로시클로헥산; β-HCH = 베타-헥사클로로시클로헥산; 4,4'-DDD = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에탄; 4,4'-DDE = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에틸렌; 4,4'-DDT = 4,4'-디클로로디페닐트리클로로에탄; TPP = 트리페닐 포스페이트; EPN = 에틸 니트로페닐 페닐포스포노티오에이트. 이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.

표 2: 최종 분석 방법의 검증 중 다양한 아보카도 품종에서 선택한 살충제에 대한 매트릭스 효과 값(%). 약어 : HCB = 헥사 클로로 벤젠; α-HCH = 알파-헥사클로로시클로헥산; β-HCH = 베타-헥사클로로시클로헥산; 4,4'-DDD = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에탄; 4,4'-DDE = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에틸렌; 4,4'-DDT = 4,4'-디클로로디페닐트리클로로에탄; TPP = 트리페닐 포스페이트; EPN = 에틸 니트로페닐 페닐포스포노티오에이트. 이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.

표 3: 회수율 및 괄호 안의 해당 RSD(각 스파이크 수준에서 n = 5), 최종 분석 방법의 검증 중 다양한 아보카도 품종에서 선택된 살충제에 대한 %, 단위. 약어: RSD = 상대 표준 편차; HCB = 헥사클로로벤젠; α-HCH = 알파-헥사클로로시클로헥산; β-HCH = 베타-헥사클로로시클로헥산; 4,4'-DDD = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에탄; 4,4'-DDE = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에틸렌; 4,4'-DDT = 4,4'-디클로로디페닐트리클로로에탄; TPP = 트리페닐 포스페이트; EPN = 에틸 니트로페닐 페닐포스포노티오에이트. 이 표를 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.

보충 파일 1: 모든 살충제의 질량 분광 스펙트럼. 약어 : HCB = 헥사 클로로 벤젠; α-HCH = 알파-헥사클로로시클로헥산; β-HCH = 베타-헥사클로로시클로헥산; 4,4'-DDD = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에탄; 4,4'-DDE = 4,4'-디클로로디페닐디클로로에틸렌; 4,4'-DDT = 4,4'-디클로로디페닐트리클로로에탄; EPN = 에틸 니트로페닐 페닐포스포노티오에이트. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.