든 샘플 준비 : 울트라 씬 레이어 방법

단백질의 정확한 질량 측정에 특히 유용한 초박막법 방법에 대한 CHI Lab 튜토리얼에 오신 것을 환영합니다. 질량 분석법의 민감한 특성으로 인해 HPLC 등급 시약과 파우더 프리 라텍스 또는 니트릴 장갑만 사용하여 플레이트를 청소합니다. 메탄올 물로 번갈아 헹구고 마지막으로 다시 메탄올을 헹굽니다.

헹굴 때마다 렌즈 티슈를 사용하여 과도한 용제를 부드럽게 닦아냅니다. 깨끗한 접시를 만드는 데 필요한 만큼 이 세척 단계를 반복할 수 있습니다. 그리고 일단 청소하고 말리면 접시를 즉시 사용해야 합니다.

20-30 마이크로 리터의 박막 기판 용액을 깨끗한 MALDI 플레이트에 바르고 펴십시오. 여기에서는 P two 50 피펫 팁을 사용하여 플레이트가 긁히는 것을 방지하면서 용액을 고르게 펴 놓습니다. 얇은 층이 마르면 김 물티슈로 부드럽게 닦아서 남아 있는 물방울을 제거합니다.

그런 다음 Kim 와이프로 한 번의 부드러운 동작으로 플레이트를 부드럽게 닦아 얇은 층을 적절하게 형성합니다. 마지막으로, 질량분석기가 오염되지 않도록 플레이트의 가장자리를 청소합니다. 샘플을 적용하기 전에 얇은 층을 테스트하는 것이 중요합니다.

결정이 균일하지 않은 곳에서 테스트 지점이 건조되는 데 너무 오래 걸리는 경우 문제는 얇은 층 자체 또는 매트릭스 용액 내에 있을 수 있으며 플레이트를 청소하고 얇은 층을 다시 도포한 다음 다시 테스트하십시오. 얇은 층에 얼룩을 만들 때 반점이 건조하게 증발하는 것을 원하지 않습니다. 오히려, 결정화가 느려지고 멈추면 과도한 용매를 제거하십시오.

진공 흡입기를 사용하면 염 및 세제와 같은 오염 물질의 존재와 높은 분석물 농도가 결정화를 방해할 수 있습니다. 추가 시료 희석은 결정화를 개선할 수 있습니다: 시료에 가까운 곳에 있는 개미를 찾아냅니다. 이를 통해 플레이트가 샘플 스폿에서 캘리브레이션 스폿으로 이동하는 의사 내부 캘리브레이션이 가능합니다.

샘플을 수집하는 동안 CAS의 레이저 샷을 스펙트럼에 몇 개 추가하면 이 접근 방식은 외부 보정만 사용하는 것보다 더 높은 질량 정확도 보정을 보장합니다. 분석물을 방해할 수 있는 소금이나 세제와 같은 오염 물질을 씻어내는 것이 매우 중요합니다. 이온화. 그렇게 하려면 얼음처럼 차갑게 떨어뜨리고 HPLC에 0.1%Tri Fluor 아세트산을 떨어뜨리고 반점에 직접 물을 등급을 매깁니다.

진공 흡입기를 사용하여 세척 용액을 제거합니다. 이 방법은 멤브레인 단백질과 용해성 단백질 모두에 대해 우수한 스펙트럼을 생성합니다.