Name: 마우스에 모터 밸런스 조정의 평가는 밸런스 빔을 사용하여 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-03-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: 배우세요 마우스의 운동 조정 및 균형을 평가하는 밸런스 빔 프로토콜을. C57BL/6 마우스를 사용하여 횡단 시간과 발 미끄러짐을 측정하고, 뇌 손상이나 유전적 변화로 인한 미세한 운동 결손을 감지하는 민감한 행동 신경과학 방법을 익히세요.

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호박 사우는 장치를 설정하고 사용중인 작가들을 훈련시켰습니다. 기금은 NINDS의 폴 패터슨에게 부여에 의해 제공되었다.

1. 이 프로토콜은 사우 스웰 동부 표준시의 사람에 따라 달라집니다. 알. (2009)와 카터 동부 표준시. 알. (2001). <ol><li> 빔 장치는 평면 12mm의 표면 또는 6mm 폭 1 미터 광선으로 구성되어 있습니다) 휴식이 기둥에있는 테이블 톱 위에 50cm. 블랙 박스는 마무리 지점으로 광선의 끝에 배치됩니다. (합판과 대들보, 기둥, 그리고 상자 나무의 다른 유형은 대부분의 하드웨어 매장에서 찾을 수 있습니다.) 홈 케이지에서 중첩 자료는 마무리 지점에 마우스를 창출할 수있는 블랙 박스에 저장됩니다. 램프 (60 와트 전구 포함)의 시작 지점 위에 빛을 사용 aversive의 자극 역할을합니다. 타이머를 중지 80cm에서 타이머 하나를 시작 0cm 한 : 중앙 80cm를 건너 시간은 두 개의 동작 감지기 (Visopia에 의해 조작)에 의해 측정됩니다. 나일론 그물이 있습니다 (이 지역의 직물 가게에서 구할 수 있습니다) 빔 아래에 뻗어있다, 어떤 폭포 쿠션하는 테이블 톱 위에 ~ 7.5 cm. 비디오 카메라의 성능을 기록 삼각대에 자리잡고 있습니다. 이 예제에 사용되는기구는 사이트에 지어졌습니다. </li><li> 각 조건에 대해 적어도 10 생쥐의 코호트이 테스트를 권장합니다. 생쥐는 12 시간 빛을 그룹 가능 (오전 7시부터 오후 7시까지) / 어두운 사이클로 보관되어 사전 테스트의 시작에 최소한 2 주 동안 행동 시설에서 연습장 acclimated 있습니다. 사전 교육 / 시험하기 위해 약 10 분, 생쥐는 빔 장치가있는 방에로 이송 수 있습니다. </li><li> 교육 일에 각 마우스 12mm 빔에게 3 회 다음 6mm 빔 3 번 교차. 넓은 너비 (예 : 28mm)의 들보는 좁은 범위의 것들을 교차 수없는 쥐 또는 큰 쥐를 사용할 수 있습니다. 생쥐는 광선의 한쪽에 위치하고 시간이 (80cm 거리) 모션 감지기에 의해 측정되는 다른 끝에 탈출 상자에 교차해야합니다. 타이머는 센터에게 80cm를 입력하는 마우스의 코로 시작하고, 동물이 80cm의 끝에 도달하면 중지됩니다. 두 대들보에 대한 교육 세션 사이에 자신의 홈 새장에서 10 분 쥐 나머지. 이 intertrial 기간 동안, 또 다른 생쥐는 3-4 시간을 효율적으로 사용할 수 있도록 훈련을하실 수 있습니다. C57BL / 6 마​​우스는 일반적으로 중지하거나 연기의 최소 금액으로 광선을 교차. 그러나, 그들이 실속을 할 때, 도청이나 앞으로 절차없이 주위를 둘러 봐, 탐정은 마우스가 괴롭히는 파고, 또는 장갑 낀 손가락으로 뒤에서 그것을 밀어 전진을 계속하도록 권장한다. 생쥐가 안전 상자에되면, 그들은 다음 재판 전에 휴식 시간이 좀 (~ 15 초) 사용할 수 있습니다. 각 훈련 세션 후, 생쥐들은 홈 케이지에 직접 반환하고 자신의 주택 방으로 다시 이동. 그들은 이상의 훈련을하며 작업 및 장치와도 잘 될 경우, 그 생쥐는 더 오래 기다릴 수 있습니다. 생쥐가 여전히 교육 2 일 후에 성공적으로 전체 빔을 통과하지 않으면 반면에, 교육은 추가적인 일 동안 계속하실 수 있습니다. 치료는 생쥐에 적용하는 경우, 성능의 기준 척도가 치료하기 전에받을 수 있습니다. </li><li> 시험 당일 각 광선을 건너 시간이 기록됩니다. 마우스 빔에 스톨 안되는 두 개의 성공적인 재판이 평균입니다. 비디오 레코딩은 줄어 드의 미세한 분석 및 기타 띄는 모터 적자 사용할 수 있습니다. 빔 산책을 평가하기 위해 다른 방법은 "1"의 점수로 빔을 교차하는 무능력과 빔 표면에 두 발톱과 함께 정상적으로 광선을 통과하는 능력과 미만 요금 신경 점수 시스템 1,2, 것입니다 같이 두 개의 도보 전표 "7." 슬립은 광선의 상단을 오는 도보로 정의됩니다. 이 색인 시스템에서, "3"의 점수는 팔다리를 드래그하여 광선을 횡단에 해당하는 것입니다. 이 실험에 대한 점수 1 retested 아니라는 것을 동물. 다른 점수에 관련된 광선의 성능에 대한 설명은 피니 외., (1982)와 카터 외., (2001)에서 찾을 수 있습니다. </li><li> 광선과 상자는 마우스 배설물 청소하고 다음 빔이 장비에 배치되기 전에 70 %의 에탄올과 다음 물로 묻은 타월로 닦아 있습니다. </li></ol> 2. 대표 결과 : <img src="/files/ftp_upload/2376/2376fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 6mm와 12mm 들보에 남성과 여성 C57Bl6의 전형적인 교차 배. 9-11주 오래된 C57BL/6-NCRL WT 마우스의 일대가 교육 2 일 후에 양쪽 대들보에서 테스트되었습니다. 12mm 빔을 건너 평균 시간은 4.6 ± 0.4되었습니다 남성을위한 초 (n은 = 14)과 3.3 ± 여성을위한 0.3 초​​ (n은 = 11). 6mm 빔에 시간이 6.8 ± 0.7되었습니다 남성을위한 초 (n은 = 13) 및 5.9 ± 여성을위한 0.5 초 (N = 10) (오류가 SEM으로보고됩니다.)

<ol><li>Feeney, D. M., Gonzalez, A., Law, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphetamine%2C+haloperidol%2C+and+experience+interact+to+affect+rate+of+recovery+after+motor+cortex+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Amphetamine, haloperidol, and experience interact to affect rate of recovery after motor cortex injury.</a> Science. 217, 855-857 (1982).</li>
<li>Carter, R. J., Morton, J., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+coordination+and+balance+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Motor coordination and balance in rodents.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, (2001).</li>
<li>Wallace, J. E., Krauter, E. E., Campbell, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+and+reflexive+behavior+in+the+aging+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Motor and reflexive behavior in the aging rat.</a> J Gerontol. 35, 364-370 (1980).</li>
<li>Brooks, S. P., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tests+to+assess+motor+phenotype+in+mice%3A+a+user%27s+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Tests to assess motor phenotype in mice: a user's guide.</a> Nat Rev Neurosci. 10, 519-529 (2009).</li>
<li>Fox, G. B., Fan, L., Levasseur, R. A., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+sensory%2Fmotor+and+cognitive+deficits+with+neuronal+apoptosis+following+controlled+cortical+impact+brain+injury+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Sustained sensory/motor and cognitive deficits with neuronal apoptosis following controlled cortical impact brain injury in the mouse.</a> J Neurotrauma. 15, 599-614 (1998).</li>
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<li>Southwell, A. L., Ko, J., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrabody+gene+therapy+ameliorates+motor%2C+cognitive%2C+and+neuropathological+symptoms+in+multiple+mouse+models+of+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Intrabody gene therapy ameliorates motor, cognitive, and neuropathological symptoms in multiple mouse models of Huntington's disease.</a> J Neurosci. 29, 13589-13602 (2009).</li>
<li>Carter, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+progressive+motor+deficits+in+mice+transgenic+for+the+human+Huntington%27s+disease+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of progressive motor deficits in mice transgenic for the human Huntington's disease mutation.</a> J Neurosci. 19, 3248-3257 (1999).</li>
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<li>Stanley, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+beam+walking+assay+offers+improved+sensitivity+over+the+mouse+rotarod+in+determining+motor+coordination+deficits+induced+by+benzodiazepines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">The mouse beam walking assay offers improved sensitivity over the mouse rotarod in determining motor coordination deficits induced by benzodiazepines.</a> J Psychopharmacol. 19, 221-227 (2005).</li>
</ol>

동물 실험은 Caltech 기관 애니멀 케어 및 사용위원회 (IACUC)에서 정한 지침과 규정에 따라 수행되었다.

평균대 위에서 성능은 잘 조정과 균형의 유용한 측정하고 이전 작업에 의해 검증되었습니다. 빔 시험은 젊은 세 이상 설치류 2,3,4에 연령에 의한 모터 적자, 중추 신경 syst`병변, 그리고 유전 및 약리 조작을 검색할 수 있습니다. 피질 충격 병변와 마우스는 종종 빔 5,6에서 미끄러지고 contralateral 나타냅니다. 빔 테스트는 시간이 지남에 따라 야생 타입의 모터 기술 (WT)와 헌팅턴 병 (HD) 마우스 모델을 차별하고 치료 7,8와 HD 생쥐의 개선을 평가하기 위해 사용되고 있습니다. 모터 적자가 평균대 위에서 발견되었습니다 다른 유전자 마우스 모델은 Sandhoff 질환, lysosomal 저장 장애 9 마우스 모델을 포함합니다. benzodiazepines에 의해 유도 모터 조정 적자를 감지에서 빔 테스트 Rotarod보다 더 민감했다. 스탠리 (2005) 다이아제팜 또는 로라 제 팜에 의해서만 30 % GABA (A) 수용체 ...

마우스에 모터 밸런스 조정의 평가는 밸런스 빔을 사용하여

Assessment of Motor Balance and Coordination in Mice using the Balance Beam

뇌 손상, 유전 조작 및 약리 치료 생쥐의 모터 기술의 변경이 발생할 수 있습니다. 파인 모터 조정 및 균형은 빔 도보 분석에 의해 평가하실 수 있습니다. 이 테스트의 목표는 직립 유지 및 안전 플랫폼으로 높은 좁은 빔에 걸쳐 도보로 마우스입니다. 교육 및 시험 1 일 2 일 :이 테스트는 연속 3 일 동안 이루어진다. 빔의 성능 그것이 빔을 그 과정에서 발생하는 포 전표의 번호를 통과하는 마우스에 대한 걸리는 시간을 측정하여 계량입니다. 여기서 우리는 우리 실험실에서 사용되는 프로토콜 및 C57BL / 6 마​​우스의 일대에서 대표적인 결과를보고합니다. 이 작업에는 Rotarod 같은 다른 자동차 검사에 의해 감지되지 않을 수 있습니다 모터 기술과 균형 미묘한 적자를 탐지에 특히 유용합니다.

미세 모터 조정에 적자가 균형 빔 테스트와 평가를하실 수 있습니다. 빔의 성능은 광선이 통과하는 속도와 마우스이 빔을에 미끄러져 횟수에 의해 계량입니다.

뇌 손상, 유전자 조작 및 약물 치료는 생쥐의 운동 능력 변화를 초래할 수 있습니다. 미세 운동 협응 및...

본 절차의 전반적인 목표는 마우스의 운동 협응력과 균형 감각을 평가하는 것입니다. 첫 번째 단계는 밸런스 빔을 조립하고 모션 감지기의 위치를 설정하여 빔 통과 잠복기를 기록하는 것이며, 훈련을 시작하기 위해 마우스를 밸런스 빔의 시작점에 두고 안전한 플랫폼으로 건너가게 합니다. 때로는 동물이 빔을 따라 끝점까지 이동하도록 독려하는 것이 필요할 수 있습니다.10분간의 시행 간 간격을 둔 후, 더 높은 민감도를 확보하기 위해 더 좁은 빔에서 훈련을 실시했습니다. 절차의 마지막 단계는 훈련된 동물을 다양한 너비의 빔에서 테스트하는 것입니다. 궁극적으로, 운동 조정 및 균형 능력의 결손을 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.안녕하세요, 저는 캘리포니아 공과대학교 생물학과에서 MD PhD 과정을 밟고 있는 Tim Luong입니다. 저는 캘리포니아 공과대학교 생물학과의 박사후 연구원 Holly Carlisle이며, 오늘은 밸런스 빔 테스트를 사용하여 마우스의 균형 감각과 운동 조절 능력을 평가하는 방법을 보여드리겠습니다. 로타로드와 같은 다른 방법들과 비교했을 때 이 기술의 주요 장점은, 밸런스 빔 테스트가 운동 조절 능력의 아주 미세한 결함까지도 더 민감하게 감지하는 경향이 있다는 점입니다.이 방법은 특정 신경질환 모델에서 운동 coordination과 균형 감각이 영향을 받는지, 그리고 특정 치료법에 의해 운동 결손이 완화되는지와 같은 행동학 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 테스트의 목적은 마우스가 연구자의 자극 없이 멈추거나 지체하지 않고 빔을 가로지르는 데 걸리는 시간을 측정하는 것입니다. 테스트 당일에 정확한 결과를 얻기 위해, 테스트 전 이틀 동안 훈련을 실시합니다.행동 테스트에 익숙하지 않은 분들에게는 마우스를 다루는 방법과 빔 위를 건너도록 돕는 방식이 어려울 수 있으므로, 이 방법의 시각적 시연이 도움이 될 것입니다. 그럼 시작하겠습니다. 본 프로토콜은 Southwell 외 연구진 및 Carter 외 연구진의 방법을 기반으로 합니다.장치는 50cm 높이의 폴 두 개 사이에 1m 길이의 빔을 거치하여 조립합니다. 빔의 평평한 표면 너비는 6mm 또는 12mm입니다. 더 큰 쥐나 너비가 좁은 빔을 건너지 못하는 쥐의 경우에는 더 넓은 빔을 사용할 수 있습니다.빔 끝에 검은색 상자를 배치하고, 마우스가 종료 지점으로 향하도록 검은색 상자 내부에 둥지 재료를 넣으며, 혐오 자극으로 작용하

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

프로토콜은 두도 설립 모터 조정 작업 가속화 로타로드 및 수평 막대, 최근 옥스퍼드에서 개발 된 두 개의 테스트, 정적로드 및 병렬 막대를 위해 제공됩니다. 이 테스트는 모터 잠재적으로 자신의 권리에 대한 관심의 손상뿐만 아니라, 행동의 다른 지역의 시험에서 가능한 변수 인를 검색 할 수 있습니다.

마우스에 모터 조정을 측정

이 비디오에서는 생쥐의 보행 및 운동 협응을 평가하기 위한 발자국 테스트 절차 및 관련 분석에 대해 설명합니다.

발자국 분석을 통한 보행 평가: 마우스의 운동 협응을 테스트하는 방법

일반적으로 파킨슨 병 및 운동 장애에 민감하고 안정적​​인 행동 분석은 새로운 잠재적 인 치료를 테스트하기 위해 필수적입니다. 여기, 우리는 흑질 선조체 시스템에 손상의 정도를 변화와 전임상 연구에 유용에 민감한 쥐를위한 감각 테스트의 관리 배터리를 설명합니다.

파킨슨 병의 마우스 모델에서 감각 기능의 평가

모터 제어 및 균형 성과는 나이와 함께 저하하는 것으로 알려져있다. 이 논문은 노화의 쥐 모델에서 균형 성능 전정 시스템 및 표시 변경에 도전 할 수있는 간단한 회전 자극의 추가와 함께 표준 비 침습적 행동 검사의 번호를 제공합니다.

노화 마우스 전정 시스템의 행동 평가

행동 테스트 질병 또는 동물의 웰빙에 대 한 치료의 phenotypic 효과 평가 하기 위해 전 임상 시험에 사용 됩니다. 세계적으로 모터 기능 평가, 우리는 일반적인 운동, 근 력, 및 조정에 대 한 테스트를 선택: 오픈 필드 테스트, 메쉬 테스트 및 rotarod 테스트, 각각.

행동의 배터리 테스트 사정 일반 운동, 근육 강도, 그리고 조정 마우스

프로토콜은 엘리베이터 수직 모션 및 관람수 회전을 사용하여 설치류의 수동 모션의 자율 및 행동 효과를 평가하기 위해 제공됩니다.

엘리베이터 수직 모션 및 관람대 회전을 사용하여 쥐의 수동 모션의 자율 및 행동 효과 평가

마우스워커(MW) 툴박스를 사용하여 자유롭게 걷는 쥐의 운동 패턴을 정량적으로 설명하는 실험 파이프라인이 제공되며, 초기 비디오 녹화 및 추적에서 정량화 후 분석에 이르기까지 다양합니다. 생쥐의 척수 타박상 손상 모델은 MW 시스템의 유용성을 입증하기 위해 사용됩니다.

MouseWalker를 사용하여 척수 손상 마우스 모델에서 운동 기능 장애 정량화

여기에서는 최근에 개발된 다양한 동작 테스트인 래더 빔 테스트를 위한 프로토콜을 제시합니다. 이 검사는 중추신경계의 갑상선 호르몬 작용 결함으로 인한 미묘한 소뇌 운동 실조증을 검출할 수 있는 장점이 있으며, 운동 성능을 평가하는 기존 행동 검사에 비해 우수합니다.

소뇌 기능에 대한 갑상선 호르몬 효과를 조사하기 위한 다양한 행동 방법

이 글은 대형 스트로크 마우스에서 고도로 번역되고 독립적으로 입증된 마우스 mSU(Stroke Unit) 개념을 실행하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 또한 생쥐에서 초점 실험 뇌졸중 척도를 실행하기 위한 표준화된 프로토콜을 제공하며, 이는 장기간 감지된 뇌졸중 국소 결손을 평가합니다.

중개 마우스 스트로크 연구를 위한 표준화된 신경학적 점수를 사용한 마우스 스트로크 단위 프로토콜

우리는 아편 유발 통각 과민과 생쥐의 관용의 개발을 검토하는 프로토콜을 설명합니다. 순진과 모르핀 처리 된 동물의 열 및 기계적 통각 반응의 측정을 바탕으로, 그것은 고통의 감도 (통각 과민)의 증가를 정량화 및 만성 아편 관리와 관련된 진통제 (허용 오차)이 감소 할 수 있습니다.

열 및 기계를 침해 수용성 모달리티를 사용하여 마우스의 모르핀에 의한 통각 과민과 진통 공차의 평가

배우세요 마우스의 운동 조정 및 균형을 평가하는 밸런스 빔 프로토콜을. C57BL/6 마우스를 사용하여 횡단 시간과 발 미끄러짐을 측정하고, 뇌 손상이나 유전적 변화로 인한 미세한 운동 결손을 감지하는 민감한 행동 신경과학 방법을 익히세요.

마우스에 모터 밸런스 조정의 평가는 밸런스 빔을 사용하여

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