마우스에 모터 밸런스 조정의 평가는 밸런스 빔을 사용하여

미세 모터 조정에 적자가 균형 빔 테스트와 평가를하실 수 있습니다. 빔의 성능은 광선이 통과하는 속도와 마우스이 빔을에 미끄러져 횟수에 의해 계량입니다.

이 절차의 전반적인 목표는 생쥐의 운동 협응과 균형을 평가하는 것입니다. 첫 번째 단계는 모션 디텍터의 위치와 함께 밸런스 빔을 조립하여 빔 교차의 대기 시간을 기록하고 밸런스 빔의 시작점에 놓고 안전한 플랫폼으로 건너갈 수 있도록 훈련을 시작하는 것입니다. 종점을 향해 빔을 따라 동물을 격려하는 것이 때때로 필요합니다.

10분의 시험 간 간격 후, maer는 더 높은 감도를 허용하기 위해 더 좁은 빔에서 훈련했습니다. 절차의 마지막 단계는 다양한 너비의 빔에서 훈련된 동물을 테스트하는 것입니다. 궁극적으로, 운동 협응력과 균형의 결핍을 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.

안녕하세요, 저는 Tim Luong이고 California Institute of Technology의 생물학과에서 MD 박사 과정 학생입니다. 저는 캘리포니아 공과대학(California Institute of Technology)의 생물학과 박사후 연구원인 홀리 칼라일(Holly Carlisle)이며, 오늘은 밸런스 빔 테스트를 사용하여 생쥐의 균형과 운동 협응력을 평가하는 방법을 보여드리려고 합니다. 이제 로터 로드와 같은 다른 방법과 비교하여 이 기술의 주요 장점은 밸런스 빔 테스트가 모터 조정의 미묘한 결함에도 더 민감한 경향이 있다는 것입니다.

이 방법은 특정 신경 질환 모델에서 운동 협응 및 균형이 영향을 받는지 여부, 운동 결핍이 특정 치료로 완화되는지 여부와 같은 행동 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 테스트의 목적은 마우스가 멈추거나 실속하지 않고 조사자의 지시 없이 빔을 건너는 데 걸리는 시간을 측정하는 것입니다. 시험 당일에 깨끗한 달리기를 하기 위해 우리는 시험 전에 이틀 동안 훈련합니다.

이 방법의 시각적 시연은 마우스 핸들링 및 빔 가로질러 도움을 주는 방식이 행동 테스트에 익숙하지 않은 사람들에게는 어려울 수 있으므로 도움이 됩니다. 시작하겠습니다. 이 프로토콜은 Southwell, etal 및 Carter etal의 프로토콜을 기반으로 합니다.

이 장치는 50cm 높이의 두 기둥 사이에 1미터 길이의 빔을 놓아 조립합니다. 빔은 너비가 6mm 또는 12mm인 평평한 표면을 가지고 있습니다. 더 큰 너비의 빔은 더 큰 마우스와 더 좁은 크기를 교차할 수 없는 마우스에 사용할 수 있습니다.

빔의 끝에 블랙 박스를 배치하고 블랙 박스 내부에 중첩 재료를 배치하여 마우스가 종료 지점을 향하도록 격려하고 램프로 시작점을 비추어 혐오 자극 역할을합니다. 모션 디텍터는 빔 교차의 대기 시간을 기록하기 위해 0과 80cm에 배치되고, 빔 아래에 나일론 해먹을 늘리고 테이블 상판 위로 약 7.5cm를 늘려 낙상을 완충합니다. 이 절차에 사용된 쥐는 12시간 동안 밝고 어두운 주기로 수용되며 테스트 전 2주 동안 적응했습니다.

실험을 시작하기 약 10분 전에 동물을 실험실에 소개하고 최상의 결과를 위해 테스트 조건당 최소 10마리의 생쥐 코호트를 사용합니다. 훈련을 시작하려면 12mm 너비의 빔의 시작 위치에 마우스를 놓습니다. 타이머는 마우스의 코가 80cm 중앙에 들어갈 때 시작되고 동물이 80cm 끝에 도달하면 멈춥니다.

생쥐는 최소한의 정지 또는 실속으로 빔을 건너야 합니다. 동물이 앞으로 나아가는 것을 멈추면 뒤에서 부드럽게 찔러서 계속하도록 격려하십시오. 동물이 빔을 성공적으로 통과하면 안전 상자에서 동물을 꺼내 다음 훈련 세션을 시작하기 전에 10분 동안 가정용 케이지에 다시 넣습니다.

밸런스 빔과 상자는 다음 마우스를 소개하기 전에 70% 에탄올로 청소하고 닦습니다. 각 마우스는 12mm 너비의 빔에서 3회 훈련을 받은 후 6mm 너비의 빔에서 훈련을 받습니다. 추가로 세 번 더 훈련을 받으면 동물이 작업과 장치에 더 익숙해짐에 따라 실속 발생이 증가할 수 있습니다.

반면에, 마우스가 2일간의 훈련 후에도 전체 빔을 성공적으로 횡단하지 못하면 추가 훈련이 필요할 수 있습니다. 동물이 치료를 받기 전에 기준선 측정값을 기록해야 합니다. 그날의 훈련이 끝나면 생쥐를 가정용 케이지로 돌려보내 보관 시설로 되돌려 보냅니다.

테스트 당일에는 앞서 보여준 것처럼 실험을 시작하기 10분 전에 동물을 방으로 데려오고, 시작 위치에 마우스를 놓고 동물이 빔의 중앙을 80cm 가로지르는 대기 시간을 기록합니다. 이 데이터는 마우스가 연구자가 멈추지 않고 재촉하지 않고 끝까지 직접 교차한 두 번의 성공적인 시도의 평균으로 보고되었습니다. 비디오 녹화는 미끄러짐 및 기타 관찰 가능한 모터 결함을 보다 세밀하게 분석하는 데 사용할 수 있습니다.

이 예에서는 9주에서 11주 된 C 57 검은색 6마리 마우스를 12mm 및 6mm 너비의 빔에서 테스트했습니다. 12mm 너비의 빔을 건너는 평균 시간은 수컷의 경우 4.6 플러스 마이너스 0.4 초, 암컷의 경우 3.3 플러스 마이너스 0.3 초, 6 개의 빔의 시간은 수컷의 경우 6.8 플러스 마이너스 0.7 초, 5.9 플러스 마이너스 0.5 초였습니다. 여성의 경우.

밸런스 빔 성능은 마우스의 연령과 변형률에 따라 달라질 수 있습니다. 본 실시예에 사용된 C 57 블랙 식스 마우스는 전형적으로 활동적인 동물이며, 약간의 미끄러짐이 있으나 이러한 마우스에 대한 낙상은 관찰되지 않았으며 유전적 또는 약리학적으로 조작된 동물, 미끄러짐 및 낙상이 더 빈번해질 수 있으며 정량화될 수 있습니다. 손상된 마우스는 빔의 측면에 달라붙을 수 있으며, 이로 인해 이 절차를 시도하는 동안 교차하는 시간이 늘어납니다.

쥐가 빔에서 멈추거나 주의가 산만해질 경우 앞으로 나아가도록 끈질기고 일관성 있게 자극하는 것이 중요합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 쥐가 균형 빔을 건너도록 훈련하고 균형과 조정력을 평가하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 시청해 주셔서 감사드리며 도움이 되었기를 바랍니다.