Name: 일반 CNS의 실시간 PCR에 의한과 Neuroinflammation 동안 Microglia에 MicroRNAs의 탐지 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 36 s
Description: 배우세요 중추신경계 미세아교세포에서 microRNA 발현을 실시간 PCR로 분석하는 방법을. 퍼콜 밀도구배리법과 유세포분석을 통해 세포를 분리하고 RNA 품질을 확인합니다.

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작품은 NIH R01 NS071039-01A1 연구 기금에 의해 지원되었다.

<ol><li>Tremblay, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Role+of+Microglia+in+the+Healthy+Brain%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The Role of Microglia in the Healthy Brain.</a> J. Neurosci. 31, 16064-16069 (2011).</li>
<li>Graeber, M. B., Li, W., Rodriguez, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+microglia+in+CNS+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Lett%22%5BJournal%5D)">Role of microglia in CNS inflammation.</a> FEBS Lett. , (2011).</li>
<li>Ponomarev, E. D., Shriver, L. P., Maresz, K., Dittel, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglial+cell+activation+and+proliferation+precedes+the+onset+of+CNS+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Res%22%5BJournal%5D)">Microglial cell activation and proliferation precedes the onset of CNS autoimmunity.</a> J. Neurosci. Res. 81, 374-389 (2005).</li>
<li>Perruisseau-Carrier, C., Jurga, M., Forraz, N., McGuckin, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miRNAs+stem+cell+reprogramming+for+neuronal+induction+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">miRNAs stem cell reprogramming for neuronal induction and differentiation.</a> Mol. Neurobiol. 43, 215-227 (2011).</li>
<li>McCoy, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+miRNAs+in+cytokine+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Biosci%22%5BJournal%5D)">The role of miRNAs in cytokine signaling.</a> Front Biosci. 17, 2161-2171 (2010).</li>
<li>He, M., Xu, Z., Ding, T., Kuang, D. M., Zheng, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-155+regulates+inflammatory+cytokine+production+in+tumor-associated+macrophages+via+targeting+C%2FEBPbeta%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol.+Immunol%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-155 regulates inflammatory cytokine production in tumor-associated macrophages via targeting C/EBPbeta.</a> Cell Mol. Immunol. 6, 343-352 (2009).</li>
<li>Ponomarev, E. D., Veremeyko, T., Barteneva, N., Krichevsky, A. M., Weiner, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-124+promotes+microglia+quiescence+and+suppresses+EAE+by+deactivating+macrophages+via+the+C%2FEBP-alpha-PU.1+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-124 promotes microglia quiescence and suppresses EAE by deactivating macrophages via the C/EBP-alpha-PU.1 pathway.</a> Nat. Med. 17, 64-70 (2011).</li>
<li>Basu, S., Campbell, H. M., Dittel, B. N., Ray, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+Specific+Cell+Population+by+Fluorescence+Activated+Cell+Sorting+%28FACS%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS).</a> J. Vis. Exp. (41), e1546-3791 (2010).</li>
<li>Gabriely, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+21+promotes+glioma+invasion+by+targeting+matrix+metalloproteinase+regulators%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">MicroRNA 21 promotes glioma invasion by targeting matrix metalloproteinase regulators.</a> Mol. Cell Biol. 28, 5369-5380 (2008).</li>
<li>Caffarelli, E., Filetici, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+regulation+in+cancer+development%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Biosci%22%5BJournal%5D)">Epigenetic regulation in cancer development.</a> Front Biosci. 17, 2682-2694 (2011).</li>
<li>Cardona, A. E., Huang, D., Sasse, M. E., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+murine+microglial+cells+for+RNA+analysis+or+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of murine microglial cells for RNA analysis or flow cytometry.</a> Nat. Protoc. 1, 1947-1951 (2006).</li>
<li>Gordon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+magnetic+separation+method+for+high-yield+isolation+of+pure+primary+microglia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A simple magnetic separation method for high-yield isolation of pure primary microglia.</a> J. Neurosci. Methods. 194, 287-296 (2011).</li>
<li>Moltzahn, F., Hunkapiller, N., Mir, A. A., Imbar, T., Blelloch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+Throughput+MicroRNA+Profiling%3A+Optimized+Multiplex+qRT-PCR+at+Nanoliter+Scale+on+the+Fluidigm+Dynamic+ArrayTM+IFCs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">High Throughput MicroRNA Profiling: Optimized Multiplex qRT-PCR at Nanoliter Scale on the Fluidigm Dynamic ArrayTM IFCs.</a> J. Vis. Exp. (54), e2552(2011).</li>
</ol>

관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.

최근에는 상당한 관심이 microglia 및 neuroinflammation 및 neurodegeneration와 관련된 많은 pathologies에서 이러한 세포의 관여로 주어졌다. 또한, 면역과 암 세포의 분화에 microRNAs의 역할이 극적으로 지난 몇 년 5,10 이상 성장했습니다. 우리는 이전에 정상 CNS 7 microglia의 비 활성 또는 휴식 표현형의 유지에 미르-124의 역할을보고했지만 microglia의 표현형 및 활성화 상태에있는 microRNAs의 다른 종류의 역할을 발견한다 남아있다. 이것은 microglia에서 특별히 miRNA 발현을 측정하는 새로운 방법의 개발이 필요합니다. Microglia들은 CNS에서 자신의 고립 이후 활성화되고 크게 변경되기 때문에 실험에 처리하기 어려운 세포입니다. 정상 CNS에서 microglia의 고립을위한 프로토콜은 이전에 11,12을 발표했다. 비록 이러...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 1X PBS </td><td> GIBCO </td><td> 14,190 </td><td> 7.2-7.4 : 실험실, 산도에서 건조 구성 요소에서 준비할 수 </td></tr><tr><td> 10X PBS </td><td> 써모 과학 </td><td> SH30258.02 </td><td> 7.2-7.4 : 실험실, 산도에서 건조 구성 요소에서 준비할 수 </td></tr><tr><td> DMEM, FBS </td><td> GBCO </td><td> 11,965, 10,438 </td><td></td></tr><tr><td> miRVana 키트 </td><td> Invitrogen </td><td> AM1561 </td><td></td></tr><tr><td> Percoll </td><td> 시그마 </td><td> P4937-500 ML </td><td> 100 % Percoll 100 ML은 10X PBS의 10 ML과 시그마에서 Percoll의 90 ML을 혼합하여 준비가되어 있습니다. 70 % Percoll의 50 ML입니다100 % Percoll 35 ML로 혼합하여 준비과 DMEM의 15 ML 40 % Percoll의 50 ML는 혼합 100 % Percoll 20 ML 및 1X PBS의 30 ML에 의해 준비가되어 있습니다 </td></tr><tr><td> 35-55 펩타이드를 집고 양이 </td><td> AnaSpec INC </td><td> 60130-5 </td><td></td></tr><tr><td> CFA </td><td> DIFCO </td><td> 263,810 </td><td></td></tr><tr><td> 백일해 독소 </td><td> 시그마 </td><td> P7208 </td><td></td></tr><tr><td> FcR는 항체를 차단 </td><td> BD Biosciences </td><td> 553,142 </td><td> 클론 2.4G2 </td></tr><tr><td> 안티 CD11b - 체육 mAb </td><td> BD Biosciences </td><td> 553,311 </td><td> 다른 fluorophores (예 : AF488)와 함께 사용할 수 있습니다 </td></tr><tr><td> 안티 CD45-APC-Cy7의 mABs </td><td> Biolegend </td><td> 103,116 </td><td> 다른 fluorophores (예 : APC)와 함께 사용할 수 있습니다 </td></tr><tr><td> Paraformaldehyde (16 %) </td><td> EMS INC </td><td> 15,710 </td><td> 1X PBS에서 1시 15분를 희석 </td></tr><tr><td> 15% TBE-우레아 젤 </td><td> 생명 기술 주식 회사 </td><td> EC68855BOX </td><td></td></tr><tr><td> TaqMan의 MicroRNA 역방향 전송 키트 </td><td> 생명 기술 INC </td><td> 4,366,596 </td><td></td></tr><tr><td> TaqMan 범용 PCR 마스터 믹스 </td><td> 생명 기술 INC </td><td> 4,304,437 </td><td></td></tr><tr><td> TaqMan의 MicroRNA의 Assays MMU - 미르-124a </td><td> 생명 기술 INC </td><td> 4,427,975 ID 001182 </td><td></td></tr><tr><td> TaqMan의 MicroRNA의 Assays snoRNA-55 </td><td> 생명 기술 INC </td><td> 4,427,975 ID 001228 </td><td></td></tr><tr><td> Nuclease없는 물 </td><td> 생명 기술 INC </td><td> AM9937 </td><td> Nuclease없는 물 </td></tr><tr><td> 384도 투명 광학 반응 플레이트 </tD&gt; <td> 생명 기술 주식 회사 </td><td> 4,309,849 </td><td> 다른 실시간 PCR 장비에서 다른 접시 (예 : 96도 강판)로 대체 수 </td></tr><tr><td> 다운스 호모 지 나이저 (15 ML) </td><td> Wheaton의 과학 제품. </td><td> 358,044 </td><td> 테플론 / 유리 </td></tr><tr><td> 40 μ 나일론 셀 스트레이너 </td><td> 매 </td><td> 352,340 </td><td></td></tr><tr><td> 커다란 원심 분리기 </td><td> Sorval </td><td> RT 6000B </td><td> 로터 직경 18.5 cm </td></tr><tr><td> 소형 원심 분리기 </td><td> Eppendorf </td><td> 5415 R </td><td> 로터 직경 6.5 cm </td></tr><tr><td> 실시간 PCR 기기 </td><td> 생명 기술 주식 회사 </td><td> AB 7900 HT </td><td> 다른 장비로 대체 수 </td></tr><tr><td> 흐름 cytometer </td><td> BD Biosciencess </td><td> LSR II </td><td> 다른 장비로 대체 수 </TD&gt; </tr><tr><td> FACS </td><td> BD Biosciences </td><td> FACSAria </td><td> 다른 장비로 대체 수 </td></tr><tr><td> Nanodrop 분광 광도계 </td><td> 써모 과학 </td><td> Nanodrop 1000 </td><td></td></tr></tbody></table>

일반 cns의 실시간 pcr에 의한과 neuroinflammation 동안 microglia에 micrornas의 탐지

Detection of MicroRNAs in Microglia by Real-time PCR in Normal CNS and During Neuroinflammation

Microglia는 중추 신경계 (CNS) 1에 상주 골수양 혈통의 세포입니다. 이러한 세포는 여러 경화증 (MS) 2 등 neuroinflammation과 관련된 많은 질병의 pathologies에 중요한 역할을한다. 정상 CNS의 Microglia는 대식 세포 표시자 CD11b 표현과 같은 CD45와 같은 활성 마커의 낮은 수준을 표현하여 휴식 표현형을 나타냅니다. CNS의 병적인 행사 기간 동안 microglia는 CD45의 upregulation과 다른 마커 3 등의 결정이 활성화된다. microglia의 표현형 및 CNS의 기능에 영향을 미치는 요인을 잘 공부하지 않습니다. MicroRNAs는 (miRNAs) 등 세포 성장과 분화 4와 같은 염증 5와 pathologies 많은 정상적인 생리 과정에 관여하고 보존 분자 (~ 22 세포핵 길이)의 성장하는 가족입니다. MiRNAs가들의 구속력을 보완 시퀀스에서 특정 타겟 유전자의 표현을 downregulateIR mRNAs하고 macrophages 6 microglia 7을 포함하여 타고난 면역 세포의 활성화에 중요한 역할을한다. microglial 표현형, 생물 학적 기능을 정의하고, macrophages 다른 유형에서 microglia를 구별하는 miRNA-매개 경로를 조사하기 위해서는 양적 CNS 상주 microglia의 고유한 하위 집합에서 특정 microRNAs의 표현을 평가하는 것이 중요합니다. CNS의 miRNAs의 표현을 측정하는 일반적인 방법은 전체의 연결 조직에서하고 원위치 하이브리드화의 정량 PCR을 포함합니다. 그러나, 전체 조직 homogenate에서 정량 PCR은의 연결 조직 세포의 유일한 5~15%을 대표 microglia에서 miRNA의 표현의 평가를 허용하지 않습니다. 현장에서 하이브 리다이 제이션은 조직 섹션에서 특정 세포 유형에서 microRNA의 표현의 평가를 가능하지만,이 방법은 전적으로 양적 없습니다. 이 보고서에서는 양적와 SENS을 설명정상 CNS이나 실험적인 면역 encephalomyelitis (EAE), MS에 대한 마우스 모델을 사용 neuroinflammation 동안 격리 microglia의 실시간 PCR에 의한 miRNA의 검출을위한 itive 방식입니다. 설명한 방법은 정상 CNS에서 또는 MS, 뇌졸중, 외상성 부상, 알츠하이머 질환과 뇌종양 등 각종 pathologies과 관련된 neuroinflammation 중 microglia의 microRNAs의 표현의 수준을 측정하는 것이 유용할 것이다.

Microglia은 중추 신경계의 방어 및 면역 감시의 첫번째 라인을 제공 macrophages를 거주하고 있습니다. MicroRNAs는 활성화 및 macrophages의 차별화 등 많은 생리 과정에 중요한 역할을 규제 분자입니다. 이 문서에서는 microglia에서 microRNAs의 측정을위한 방법을 설명합니다.

일반 CNS의 실시간 PCR에 의한과 Neuroinflammation 동안 Microglia에 MicroRNAs의 탐지

미세아교세포(Microglia)는 중추신경계(CNS)에 상주하는 골수성 계열의 세포입니다1. 이 세포들은 많은 ...의 병리 과정에서 중요한 역할을 합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 미세아교세포(microglia) 내의 마이크로 RNA 발현을 분석하는 것입니다. 이는 먼저 뇌와 척수를 적출한 다음, 중추신경계 또는 CNS 조직을 균질화함으로써 수행됩니다. 두 번째 단계에서는 Percoll 밀도 구배 원심분리를 통해 CNS의 단핵세포를 분리하고, 이후 FACS를 이용하여 미세아교세포 군집을 식별합니다.다음으로, 미세아교세포 RNA를 분리하고 샘플의 품질을 분석합니다. 마지막으로, 관심 대상인 특정 micro RNA에 대한 실시간 PCR을 수행합니다. 결과적으로, delta delta CT 방법을 사용하여 미세아교세포 내 특정 micro RNA의 상대적 발현 수준을 나타낼 수 있습니다.일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 연구자들은 중추신경계(CNS)에서 충분한 수의 단핵구를 분리하지 못하거나, 샘플이 수초 및 세포 파편으로 오염되어 어려움을 겪습니다. 두 경우 모두 시료 준비의 품질 저하를 초래하며, 각각 RNA 농도가 낮아지거나 단백질 오염이 발생하는 결과로 이어집니다. 본 절차의 시연은 저와 vir가 진행하겠습니다.모든 마우스의 관류가 끝나면 뇌와 척수를 적출하십시오. 그다음 뇌 하나와 척수 하나를 한 번에 15 mL 다운스 균질기(downs homogenizer)에 넣고, 매번 조직에 5 mL의 PBS를 추가하십시오. 10~20회 정도 부드럽게 분쇄한 후, 균질물을 70 µm 세포 스트레이너를 통해 각각의 50 mL 원추형 튜브에 통과시키고, 834 ×g, 4 °C에서 5~7분 동안 원심분리하십시오.상층액을 제거한 후, 마우스 2~3마리에서 얻은 뇌 및 척수 균질액을 70% percoll 5~7 mL에 다시 현탁합니다. 그다음 40% percoll 7 mL를 위에 층성히 얹고, percoll 및 세포 용액을 20 °C에서 850 ×g로 30분 동안 브레이크 없이 원심분리합니다. 70% percoll 층 상단에 위치한 손상된 세포와 마이엘린 및 파편을 제거합니다.그 후 70%와 40% Percoll 용액 사이의 계면에 있는 단핵 세포를 수집하고, 수집된 세포를 PBS에 최소 1:1 비율로 희석합니다. 세포를 원심 분리하여 가라앉힌 후, 펠렛을 0.5 mL의 PBS로 재부유시켜 1.7 mL 에펜도르프 튜브에 옮깁니다. 밀도 구배로 분류된 세포 50 µL를 새로운 1.7 mL 에펜도르프 튜브에 옮긴 다음, 해당 튜브에 FACS 버퍼 350 µL를 첨가하는 것으로 시작

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

미세 아교 세포 생물학의 성공적인 조사에 하나의 키는 CNS의 조직으로부터 분리하는 동안 생체 미세 아교 immunofunction의 보존이다. 형광 이미징, 면역 세포 화학, 및 염증성 자극 지질 다당류 (LPS)와 팸 3 CSK 4 (팸)와 ELISA 다음 미세 아교 세포의 활성에 의해 평가 매우 순수하고 immunofunctional 세포 배양에 회전 흔들림 결과를 통해 미세 아교 세포를 분리.

쥐과 신생아에서 보존 면역 표현형과 기능으로 두피 소교 세포의 분리

우리는 뇌척수액 (CSF)에서 마이크로 RNA 프로필 실시간 PCR의 프로토콜을 설명합니다. RNA 추출 프로토콜을 제외하고, 절차는 다른 체액, 배양 된 세포 또는 조직 표본에서 추출한 RNA로 확장 될 수있다.

정량 실시간 PCR을 사용하여 뇌척수액의 마이크로 RNA 프로파일

미세 아교 세포의 활성화 및 microgliosis 만성 신경 퇴행의 핵심 반응이다. 여기, 우리는 생체 내, 공 초점 검안경으로 망막 CX3CR1-GFP + 미세 아교 세포의 장기 시각화를위한 방법을 제시하고, 임계 값 및 형태 계측 학적 대한 식별과 활성화를 정량화 분석한다. 우리는 연령과 관련된 녹내장의 초기 단계 소교 변경 사항을 모니터링 할 수 있습니다.

마우스 녹내장에 공 촛점 안저 이미징 및 세포 형태 계측 : 신경 퇴행 중 망막 미세 아교 활성화의 생체 역학

Microglia(뇌의 면역 세포)는 나노 입자가 신경 독성에 어떻게 영향을 미치는지 결정하기 위한 대리 바이오 센서로 사용됩니다. 우리는 신경독성을 결정하기 위해 나노 입자에 대한 미세아교세포 반응과 활성화된 미세아교세포의 상층액에 대한 시상하부 뉴런의 노출을 분석하기 위해 고안된 일련의 실험에 대해 설명합니다.

나노 입자 신경 독성을 결정하는 대리 바이오 센서로 미세 아교 세포

여기, 우리는 시험 관내 실험에 대한 출생 마우스 새끼에서 미세 아교 세포를 분리하는 프로토콜 (1 일)을 제시한다. 단리 방법이 즉석에서 모두 높은 수율 및 순도, 소교 생물학의 해명을 목적으로 다양한 실험을 허용 다른 방법에 비해 상당한 이점을 생성한다.

향상된 순도와 다양성에 차 미세 아교 세포의 신속하고 세련된 CD11b를 자기 절연

우리는 성인 마우스 뇌 반구의 다른 해부 된 영역에서 microglia의 격리를위한 프로토콜을 제공하고, 전체 길이 전사체의 깊은 단일 세포 RNA 시퀀싱을위한 반자동 라이브러리 준비를 제공합니다. 이 방법은 건강과 질병에서 microglia의 기능적 이질성을 해명하는 데 도움이됩니다.

깊은 단세포 RNA 염기서열 분석에 대한 하나의 성인 마우스 뇌 반구에서 영역 별 Microglia의 격리

1차 미세아교세포 배양은 일반적으로 새로운 항염증 분자를 평가하는 데 사용됩니다. 본 프로토콜은 신생아 새끼로부터 미세아교세포를 자기적으로 분리하는 재현 가능하고 관련성 있는 방법을 설명합니다.

일차 세포 배양을 위한 Neonate 마우스의 미세아교세포의 자기 분리

이 논문은 정밀하게 제어된 수술과 이광자 현미경을 사용하여 마우스 해마 CA1에서 휴식 미세아교세포를 만성적으로 생체 내에서 관찰하는 방법을 설명합니다.

생체 내 마우스 해마에서 미세아교세포의 만성 이광자 이미징

우리는 상대적으로 짧은 시간에 MACS(magnetically activated cell sorting)를 사용하여 쥐의 시상하부(또는 이에 상응하는 작은 뇌 구조)에서 미세아교세포를 분리하는 프로토콜을 설명합니다. MACS 분류된 시상하부 미세아교세포는 체외 분석에 사용할 수 있으며 in vitro 분석을 수행하기 위해 도금할 수 있습니다.

Isolation of Hypothalamic Microglia from Freshly Perfused Adult Mouse Brain by Magnetic-Activated Cell Sorting  

본 논문은 회전 원반 공초점 현미경을 사용하여 망막에서 미세아교세포 운동성과 시냅스 후 눈점과의 접촉을 시각화하고 정량화하는 방법을 시연합니다.

병든 쥐 망막에서 미세아교세포 역학과 시냅스와의 상호작용에 대한 실시간 영상 및 특성 분석

미세아교세포 파라미터 매핑 소프트웨어(MMPS)는 코딩 전문 지식이 필요 없는 사용자 친화적인 분석 파이프라인으로, 면역형광 이미지로부터 단일 세포 미세아교 형태학 분석을 반자동으로 수행합니다. 설치류 지다당류 유도 신경염증 모델에서 검증된 MMPS는 활성화 관련 형태학적 변화를 재현 가능하게 감지하고 표준화되고 확장 가능한 미세아교세포 표현형을 가능하게 합니다.

미세아교세포 파라미터 매핑 소프트웨어(MMPS): 정량적 미세교교세포 형태학 분석을 위한 오픈 소스 사용자 친화적 도구입니다

배우세요 중추신경계 미세아교세포에서 microRNA 발현을 실시간 PCR로 분석하는 방법을. 퍼콜 밀도구배리법과 유세포분석을 통해 세포를 분리하고 RNA 품질을 확인합니다.

일반 CNS의 실시간 PCR에 의한과 Neuroinflammation 동안 Microglia에 MicroRNAs의 탐지

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