Zebrafish의 일반 관리 및 유지 관리 ( Danio rerio) 실험실 : 소개

이 프로토콜은 제브라 피시 실험실의 정기적인 관리 및 유지 관리에 대해 설명합니다. 제브라 피쉬 연구에 대한 관심이 줄어들었기 때문에 제브라 피쉬 사육 시설을 설립하고 유지해야 할 필요성도 증가하고 있습니다. 제브라 피시 실험실의 유지 관리에 대한 문헌을 사용할 수 있지만 간결한 비디오 프로토콜은 부족합니다.

이 비디오는 제브라피시 유충의 시스템 유지 관리, 먹이, 번식 및 사육에 대해 설명합니다. 안녕하세요, 저는 대학교 의과대학의 ABH입니다. 안녕하세요, 저는 Thee Institution의 Manchi입니다.

오늘 우리는 제브라 피시 실험실의 정기적 인 관리와 유지 보수를 보여 드리겠습니다. 제브라피쉬는 유전학, 약리학 및 행동 연구에서 인기를 얻고 있습니다. 높은 F 유지 보수 용이성과 빠른 개발로 인해 유전자 조절에 매우 적합하며 높은 뇌졸중 약물 스크리닝에 적합합니다.

이 파트 코드는 새로운 어류 시설 설립을 고려하고 있는 어류 사용자와 연구원에게 제브라피시 사육에 대한 아이디어를 제공합니다. 시작하겠습니다. 여러 회사에서 어류 시스템을 제공하지만 우리는 수생 서식지의 시스템을 사용합니다.

우리 실험실에서 얼룩말 물고기는 섭씨 26도에서 28.5도, 14에서 10도의 밝은 주기에서 어두운 주기로 유지됩니다. 얼룩말 물고기는 순환 시스템에 보관되어 시스템 물을 지속적으로 여과하고 폭기합니다. 건강한 수생 환경에 필요한 수질을 유지하기 위해 시스템은 시스템 내에서 다양한 유형의 필터 세트를 사용합니다.

탱크의 물은 필터 패드, 캐니스터 필터, 생물학적 필터, 활성탄 필터 및 UV 필터를 통과한 후 탱크로 다시 순환됩니다. 탈염소 처리되거나 노화된 물은 제브라피시 시스템에 사용됩니다. 물은 최소 48시간 동안 숙성하여 염소를 제거할 수 있습니다.

매일 시스템 물의 pH를 확인하고 6.8에서 7.5 사이를 유지하십시오. 중탄산나트륨을 사용하여 어항을 정기적으로 청소해야 합니다. 어항을 청소하려면 이 탱크로 가는 물의 흐름을 닫고 탱크를 뒤로 기울여 과도한 물을 배출한 다음 시스템에서 탱크를 조심스럽게 제거하십시오.

깨끗한 탱크를 설정하고 시스템 물로 채우십시오. 물고기 그물을 사용하여 이 수조로 물고기를 조심스럽게 옮기십시오. 뚜껑을 닫고 탱크 이름 태그를 조심스럽게 교체하십시오.

탱크를 시스템에 놓습니다. 튜브를 탱크에 다시 넣고 물 공급을 켭니다. 어망과 수조를 70% 에탄올로 오염 제거하십시오.

물로 헹구고 말리십시오. 재사용하기 전에. 순환 시스템의 필터는 적절한 기능을 보장하기 위해 정기적으로 점검하고 교체해야 합니다.

120미크론 필터 패드는 교체하기 전에 매일 점검하고 물의 흐름 쪽으로 재배치합니다. 캐니스터 필터는 매주 교체해야 합니다. 캐니스터 필터를 교체하려면 렌치나 손으로 제거하십시오.

물이 엎질러지지 않도록 아래에 플라스틱 시트나 수건을 깔아주세요. 새 캐니스터를 삽입하고 필터를 적용한 다음 장치를 시스템에 다시 끼웁니다. 손과 렌치로 조심스럽게 조입니다.

필요한 경우 탄소 필터를 격주로 교체해야 합니다. 카본 필터를 교체하려면 조심스럽게 제거하십시오. 렌치를 손에 들고 필터에서 활성탄을 버리고 새 활성탄으로 교체하십시오.

탄소 홀더를 다시 장착하고 필터 장치에 다시 넣습니다. 필터 장치를 시스템에 다시 장착합니다. 시스템을 켜고 물이 필터로 흐르고 있는지 확인하십시오.

생물학적 필터는 6개월마다 청소해야 합니다. 생물학적 필터를 교체하려면 시스템에서 필터를 제거하십시오. 압력 해제 버튼을 눌러 필터의 압력을 해제합니다.

필터의 나사를 풀고 뚜껑을 제거합니다. 내용물을 체로 쳐서 용기에 비우고 물에서 Cy Oex를 분리합니다. Cy Oex가 매우 더러우면 교체하십시오.

새 cy ax로 필터를 채웁니다. 장치를 시스템 물에 채웁니다. 필터의 뚜껑을 닫고 장치를 다시 끼우고 전원을 켭니다.

UV 필터는 생물학적 오염 물질을 제어하는 데 사용되며 9개월에서 10개월마다 교체해야 합니다. 얼룩말 물고기는 건조 사료 또는 소금물 새우, 소금물 새우, 계란과 같은 살아있는 식품을 먹일 수 있으며 지역 애완 동물 가게에서 구할 수 있으며 여기에 설명된 간단한 단계에 따라 실험실에서 부화할 수 있습니다. 붉은 바다 소금을 시스템 물에 용해시켜 리터당 30-35 그램의 용액을 만듭니다.

소금물 새우 패처에 소금물을 채우고 새우 알을 리터당 1.2큰술 농도로 넣는다. 공기 펌프로 부화기를 세게 폭기하고 소금물 새우 알을 약 48시간 동안 수정하도록 둡니다. 공기 파이프를 제거하고 배양액이 4-5분 동안 가라앉도록 합니다.

수정된 소금물 새우는 부화기 바닥에 있는 탭을 사용하여 부화기 바닥에 모여 수정되지 않은 알이 포함된 첫 번째 흐름을 버립니다. 그런 다음 수정한 소금물 새우를 수집합니다. 소금물 새우와 짠물을 분리하십시오.

소금물 새우 수집 그물을 사용합니다. 소금물 새우를 용기에 헹굽니다.시스템 물을 사용하면 소금물 새우가 용기 바닥에 고농도로 존재하며 이제 얼룩말 물고기에게 먹이를 줄 준비가 되었습니다. 파이프나 스포이드를 사용하여 소금물 새우를 물고기에게 먹입니다.

분배되는 음식의 양은 개별 탱크의 개체군 크기에 따라 다릅니다. 배고픈 물고기는 물에 음식을 주입한 후 소금물 새우를 잡기 위해 헤엄치는데, 이는 규칙적인 운동에 중요합니다. 건식 먹이는 수생 서식지, 물고기 음식 디스펜서 또는 간단한 숟가락을 사용하여 수행할 수 있습니다.

얼룩말 물고기는 빛이 시작될 때 번식을 시작합니다. 난자는 인타 또는 쌍 교배를 통해 얻을 수 있습니다. 인타 번식은 노동 효율이 더 높고 정기적인 배아 채취에 사용되지만, 수조 사육에서 유전자나 돌연변이를 검사하고 수조 내 사육자를 조립하고 수조에 천천히 떨어뜨릴 때 쌍별 호흡이 선호됩니다.

빛이 시작된 후, 수조에서 사육자를 제거하고 알을 모으기 전에 물고기가 짝짓기를 할 수 있도록 수조에 약 15분 동안 번식 설정을 두십시오. 배현명한 번식은 오후 늦게 번식 탱크를 조립하고 시스템 물로 채워서 설정됩니다. 암컷 1 명과 수컷 1 명을 탱크의 반대편으로 옮깁니다.

암컷은 배가 더 크기 때문에 수컷과 구별할 수 있습니다. 다음날 아침에 칸막이를 제거하십시오. 빛이 시작된 직후, 20분 동안 또는 충분한 수의 배아가 수조 바닥에 놓일 때까지 짝짓기를 할 물고기를 그대로 두십시오.

번식이 끝나면 물고기를 수조로 되돌려 놓으십시오. 체로 알을 모으십시오. 배아를 철저히 씻으십시오.

시스템 물로. 배아로 여과기를 헹구어 배아를 페트리 접시로 옮깁니다. 중간 배아는 현미경으로 관찰할 수 있습니다.

수정되지 않은 배아는 바늘과 피펫을 사용하여 수정된 배아와 분리해야 합니다. 수정란이 수정되지 않은 난자에서 분리된 후, 유충이 부화할 때까지 약 섭씨 28.5도의 인큐베이터에서 72시간 동안 보관됩니다. 이제 애벌레는 COR에서 나와 자유롭게 수영합니다.

유충은 수정 후 5일 동안 먹이를 먹어야 하며 시스템으로 옮기기 전에 며칠 동안 고인 물에 보관해야 합니다. 유충을 약 300-400 미크론의 작은 크기의 배플이 들어있는 탱크로 부드럽게 옮깁니다. 14일이 지나면 유충 탱크를 시스템에 꽂고 작은 순환수 흐름을 공급할 수 있습니다.

유충과 성인 물고기의 크기에 따라 다른 크기의 배플을 사용해야 합니다. 배아가 성적으로 성숙한 성인으로 발달하는 데는 보통 3개월이 걸립니다. 메뉴를 시청해 주셔서 감사드리며, 실험에 행운을 빕니다.