혈액 - 뇌 장벽 장애의 쥐 모델 Neurovascular 치료학 타겟이 분명한 허용하려면

이 절차의 전반적인 목표는 혈액-뇌 장벽을 파괴하는 것입니다. 이것은 먼저 기관내 기도와 함께 동물을 IV 마취에 놓음으로써 수행됩니다. 다음으로, 총경동맥의 분기점이 노출됩니다.

그런 다음 카테터를 외부 경동맥에 삽입합니다. 마지막으로 만니톨을 투여합니다. 궁극적으로 Evan's Blue Dye의 유출을 통해 혈액 뇌 장벽 파괴를 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.

기존 동맥 내 치료 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 생리학적 조건에서 일반적으로 혈액-뇌 장벽을 통과하지 않는 약물이 뇌에 들어갈 수 있다는 것입니다. 이는 혈액-뇌장벽을 통과할 수 있는 능력이 좋지 않은 새로운 치료법을 테스트할 수 있게 해주기 때문에 신경과학 분야에 시사하는 바가 있습니다. 이 기술의 의미는 신경 종양학으로 확장되어 많은 화학 요법제가 혈액 뇌 장벽을 통과하지 못하기 때문입니다.

글쎄요, 이 방법은 새로운 종양학에 대한 통찰력을 제공하지만, 혈액 뇌 장벽 투과성이 좋지 않은 약물로 치료되는 다른 신경학적 디스 장애에 대한 정보도 제공할 수 있습니다. 우리는 이 방법의 시각적 시연을 통해 동물 수술에 익숙한 연구원들이 실험실에서 이 기술을 사용할 수 있기를 바랍니다. 시작하려면 25% 만니톨 용액을 준비하고 결정이 없는지 확인합니다.

결정이 있는 경우 바이알을 섭씨 80도의 수조에 넣고 교반하여 분해합니다. 주기적으로 동물의 질량을 기록하고 분당 0.1 밀리리터의 속도로 전달되는 프로포폴 12cc 주사기 2개를 준비합니다. 유도실에서 동물을 마취한 후 일회용 수건에 올려 놓고 목과 허벅지 안쪽을 면도합니다.

동물을 다시 유도실에 3분 동안 눕힙니다. 쥐의 삽관을 준비하려면 먼저 IV 카테터로 기관내관을 준비합니다. 튜브는 적절한 공기 흐름을 허용할 수 있을 만큼 충분히 커야 하지만 손상을 일으키지 않고 기관에 들어갈 수 있을 만큼 작아야 합니다.

스타일러스를 만들려면 플라스틱 카테터에서 바늘을 빼내고 조심스럽게 바늘을 부러뜨립니다. 날카로운 끝에서 약 1cm 떨어진 곳에 바늘을 카테터에 다시 넣습니다. 다음으로, 비스듬한 표면에 쥐의 이빨을 매달아 놓고 귀 사이에 정렬된 동물의 목에 직접 빛을 비춥니다.

다음으로 구인두에 작은 주걱을 삽입합니다. 약 3cm. 혀를 입 밖으로 부드럽게 빼내면서 위로 들어 올립니다.

기관의 개구부를 열리고 닫히는 작은 구멍으로 시각화합니다. 숨을 쉴 때마다 카테터를 구멍에 부드럽게 삽입하고 민감한 기관의 연골에 억지로 밀어 넣지 않도록 합니다. 인공호흡기를 분당 1리터, 60BPM으로 설정한 다음 불소를 2%로 설정한 다음 카테터를 인공호흡기에 연결하고 튜브를 수술 표면에 테이프로 붙입니다.

발가락 꼬집기를 수행하여 동물이 마취되었는지 확인합니다. 꼬리에 있는 네 개의 팔다리를 모두 작동 표면에 테이프로 붙여서 경로를 고정합니다. 면도한 목과 사타구니 부위를 클로르헥시딘 비누로 세 번 문지릅니다.

그런 다음 클로르헥시딘으로 문지릅니다. 세 번 헹굽니다. 프로포폴 주사기를 IV 확장 세트에 부착하고 주입 펌프에 주사기를 장착합니다.

다음으로, 메스를 사용하여 근육을 자르지 않고 면도 한 허벅지의 피부를 잘라냅니다. 그런 다음 집게를 사용하여 절개 부위를 열고 대퇴 정맥을 찾은 다음 동맥 위의 조직을 당겨 혈관을 노출시킵니다. 26G 모노 배출 수의학 IV 카테터를 정맥에 삽입합니다.

바늘이 정맥 벽을 뚫으면 정맥을 밀기가 더 쉬워집니다. 바늘을 집어넣고 3-5분 동안 카테터를 혈관 안으로 밀어 넣습니다. 프로포폴 주입을 시작한 후에, 50%O2와 50%N 2 O의 혼합물로 마취 가스를 전환하고 isof 불소를 차단하십시오.

총경동맥의 분기점을 드러내려면 먼저 메스 날을 사용하여 목의 정중선을 절개합니다. 기관 위의 흉골 설골 근육에 도달하기 위해 정중선을 따라 표재성 근막을 절단합니다. 조직을 옆으로 움직여 집게나 가위로 쥐 경동맥 삼각형을 형성하는 흉골 설골, 위, 흉골 유양돌기의 세 가지 근육 그룹을 시각화합니다.

경동맥을 노출시키기 위해 경동맥 삼각형의 근육 사이에 있는 근막을 분리합니다. 양극성 소작기를 사용하여 거즈 및 면봉과 함께 작은 혈관을 나누십시오 출혈을 조절하려면 견인기를 사용하여 집게로 근육을 분리하십시오. 경동맥에서 조직을 제거하고 분기점을 찾습니다.

분기점 바로 원위부에 있는 후두 동맥을 노출시킵니다. 집게 사이에 소작하고 전기 소작기를 사용하여 집게로 분리하십시오. 경동맥 분기점과 외부 경동맥 또는 ECA를 가능한 한 많이 노출시킵니다.

ECA 원위부에서 후두 동맥으로 분기하는 상갑상선 동맥을 노출시킵니다. 겸자 사이에 소작하고 분리하여 ECA에 카테터를 삽입하십시오. 그 아래에 4 개의 실크를 두 개 길이로 놓습니다.

지혈제를 사용하여 한 길이의 봉합사를 잡고 다른 봉합사와 함께 ECA를 다시 속살로 집어넣습니다. 외과 의사의 매듭으로 가능한 한 두개골 멀리, 분기점 원위부, 영구 결찰부 근위부에 묶습니다. 다른 외과 의사의 매듭을 느슨하게 묶어 동맥을 이완시킵니다.

1%리도카인을 세척하고 카테터에 헤파린 식염수를 채웁니다. 다음으로, 분기점에 최대한 가까운 각도로 임시 용기 클립을 배치합니다. 그런 다음 마이크로 가위를 사용하여 느슨한 매듭을 클립 쪽으로 밉니다.

합자 바로 근위부에 있는 ECA를 작게 자릅니다. 클립과 합자가 고정되어 있으면 겸자를 사용하여 출혈이 없어야 합니다. ECA 벽을 제어하려면 카테터의 비스듬한 끝을 느슨한 외과 의사의 매듭으로 혈관에 공급합니다.

카테터를 고정합니다. 카테터 주위의 동맥을 묶은 다음 클립을 제거하고 면봉을 사용하여 해당 부위를 청소합니다. 카테터를 분기점에서 원위부로 약 1mm 전진시킵니다.

겸자를 사용하여 동맥을 매듭 근위부로 잡고 혈관이 움직이지 않도록 합니다. 만니톨을 투여합니다. 8인치 IV 확장 세트와 6ml 주사기에 기포를 생성하지 않고 만니톨을 채웁니다.

섭씨 37도에서 보관하여 혈액-뇌 장벽 파괴를 시각화하거나 BBBD는 프로포폴 주입과 반대쪽 다리의 새로운 IV 부위를 통해 2%Evans Blue를 킬로그램당 2밀리그램씩 투여합니다. 확장 세트를 5미크론 필터에 부착하고 미놀로 채워 기포를 제거합니다. 그런 다음 거품을 생성하지 않고 스톱 콕에 부착합니다.

초당 0.09밀리리터로 만니톨을 투여합니다 25초 동안 만니톨이 내부 경동맥에 바로 근접한 지점에서 공통 경동맥의 흐름과 평형에 도달하는 것을 관찰하면 쥐의 심박수에 따라 맥박이 뛰는 것처럼 보여야 합니다. 만니톨이 심장 쪽으로 흐르지 않도록 해야 하는데, 이는 만니톨이 쥐의 혈압을 극복하고 심각한 합병증을 유발할 수 있음을 나타냅니다. 뇌의 한쪽에 있는 혈액-뇌 장벽이 파괴되면 Evan의 파란색이 들어가 파괴된 반구를 파란색으로 염색할 수 있지만 비파괴 반구는 변하지 않은 상태로 유지됩니다.

여기에 보이는 것은 혈액 뇌 장벽 파괴 또는 BBBD가 없는 뇌의 예이며, 다음은 삼투압 BBBD 후 파란색으로 염색된 뇌의 예이며, 오른쪽 반구가 염색되고 일부 파란색이 Willis의 원에서 혈류의 혼합의 결과로 내측 세로 균열 근처의 왼쪽 반구로 들어갔다는 것을 주목하십시오. 이 기술은 연구자들이 쥐 모델에서 혈액-뇌 장벽을 통과하지 않는 치료법을 탐구할 수 있는 길을 열어줍니다. 이 비디오를 시청한 후에는 경동맥에 카테터를 삽입하고 매니톨 용액을 뇌에 직접 주입하여 흐릿한 뇌 장벽을 파괴할 수 있을 것입니다.