2017년 4월 7일
여기에서는 부패를 줄이고 신선한 과일의 유통 기한을 연장하는 새로운 서방형 ClO2 제품의 적용을 위한 프로토콜에 대해 설명합니다. 서방형 ClO2 제품은 표준 상업용 포도 토마토 포장에 첨가되어 Escherichia coli 및 Alternaria alternata에 대해 테스트되었습니다.
이 실험의 전반적인 목표는 새로운 제어 방출 이산화염소 제품을 사용하여 식품 매개 질병 및 식품 부패의 위험을 줄이고 신선한 과일의 유통 기한을 연장하는 것입니다. 이 방법은 신선한 과일과 채소의 보존에 대한 농업 수확 후 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 포장된 농산물의 전체 저장 및 취급에 걸쳐 방출량과 이산화염소 처리 기간을 제어할 수 있다는 것입니다.
이 방법은 농산물 보존을 위한 항균제의 통제된 방출에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만 물 살균 및 탈취와 같은 다른 시스템에도 적용할 수 있습니다. 절차를 시작하기 전에 양면 테이프로 유리 챔버의 뚜껑에 이산화염소 파우치를 부착하고 챔버를 바셀린으로 밀봉하십시오. 이산화염소 가스 감지기의 입구와 출구를 챔버에 연결하고 입구 및 출구 가스 흐름을 켭니다.
그런 다음 표시된 시점에서 챔버의 이산화염소 농도를 측정하고 온도 및 상대 습도 데이터 로거를 사용하여 온도와 상대 습도를 모니터링합니다. 다음으로, 얼어붙은 박테리아 스톡을 해동하여 대장균을 되살리고 섭씨 35도에서 24시간 배양을 위해 대장균 한천에 현탁액을 플레이트화합니다. 다음날, 24시간, 섭씨 35도의 배양을 위해 새 플레이트에서 유기체를 재배양합니다.
그런 다음 섭씨 35도에서 24시간 동안 Levine Eosin-Methylene Blue Agar 플레이트에 군체를 줄무늬로 만듭니다. 반사되는 금속 녹색으로 변하는 배양은 대장균에 양성입니다. 한천 플레이트에서 식별된 대장균 세포를 McFarland 등가 탁도 표준과 비교하여 밀리리터당 9 log CFU에 도달할 때까지 50 ml의 멸균 증류수로 긁어낸 다음 50 ml의 박테리아를 0.1% Tween 20을 포함하는 1950 ml의 멸균수에 부어 2리터의 최종 접종 부피를 얻습니다.
A.alternata의 경우 포자가 나타날 때까지 섭씨 25도에서 감자 포도당 한천에 곰팡이를 배양하고 방금 시연한 대로 2리터 용량의 샘플 접종물을 준비합니다. 접종물이 준비되면 7kg의 토마토를 오토클레이브 백에 완전히 밀폐된 10리터 스테인리스 스틸 팬에 넣습니다. 가방과 팬을 안전 후드로 옮기고 방아쇠 분무기를 사용하여 관심 있는 실험용 접종 용액을 바르고 장갑을 낀 손으로 과일을 부드럽게 저어줍니다.
5분 후, 토마토를 한 겹으로 얹어 멸균된 호일에 2시간 동안 올려 놓습니다. 과일이 마르면 토마토 200g을 1파운드의 구멍이 뚫린 조개 껍질 24개에 옮깁니다. 오염된 호일을 조심스럽게 접고 오토클레이브 살균을 위해 팬에 호일과 장갑을 넣습니다.
이제 조개 껍질 절반의 뚜껑에 이산화염소 파우치를 부착하고 각 전체 조개 껍질의 무게를 잰다. 모든 조개 껍질은 섭씨 20도에서 14일 동안 보관하십시오. 그런 다음 적절한 실험 시점에서 이산화염소 가스 감지기의 입구 및 출구 튜브를 양쪽 끝 사이에 2cm 거리로 조개 껍질 중앙에 삽입하고 이산화염소 측정값을 얻습니다.
초기 체중과 비교하여 체중 감소를 계산하려면 과일과 함께 전체 조개 껍질의 무게를 측정하십시오. 각 시점에서 과일 표면에 존재하는 미생물 개체군을 측정하기 위해 각 복제에서 5개의 과일을 99ml의 멸균 인산염 완충 식염수와 함께 멸균된 샘플링 백에 넣고 오비탈 쉐이커에서 1시간 동안 분당 100회전으로 교반합니다. 교반이 끝나면 나선형 플래터를 사용하여 적절한 배양 기간 동안 적절한 한천 플레이트에 완충액 세척의 50마이크로리터 연속 희석액을 시딩하고 광학 플레이트 리더를 사용하여 미생물 콜로니 수를 측정합니다.
과일 경도를 측정하려면 제조업체의 지침에 따라 과일 경도 테스터를 사용하여 각 복제에서 20개의 과일을 분석하고 사용 후 장비를 소독하는 것을 기억하고 결과를 과일을 1mm 압축하는 데 필요한 압력으로 표현합니다. 그런 다음 분산 분석을 사용하여 데이터를 분석하고 Duncan의 다중 범위 검정을 통해 평균 분리를 확인합니다. 이산화염소 방출은 처음에 처음 4시간 동안 시간당 약 2.38ppm의 농도 증가와 함께 선형 패턴을 나타냅니다.
방출 속도는 다음 20시간 동안 느려져 이산화염소 농도가 25.4ppm이 되며, 이 시점에서 가스 농도가 안정화되는 것으로 보입니다. 포도 토마토의 조개 껍질에 있는 머리 공간 이산화염소 농도는 일반적으로 3일에서 10일 사이에 약 4ppm으로 측정되며, 이 시점에서 가스 농도는 14일째에 약 2ppm에 도달할 때까지 감소합니다. 접종 후 과일의 초기 박테리아 집단 농도는 E.coli의 경우 그램당 4.3 로그 집락 형성 단위, A.alternata의 경우 그램당 3.4 로그 집락 형성 단위이며, 이는 이산화염소 처리된 조개 껍질에 14일 동안 보관한 후 그램당 각각 3.08 및 2.85 로그 집락 형성 단위만큼 감소합니다.
또한, 이산화염소 처리는 처리되지 않은 토마토를 대조군에 비해 과일의 단단함과 무게를 유지할 뿐만 아니라 이러한 효과도 시간이 지남에 따라 증가하는 것으로 보입니다. 이 비디오를 시청한 후에는 신선한 농산물의 유통 기한을 보존하고 연장하기 위해 이 새로운 이산화염소 제품을 활용하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
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본 논문은 신선 과일의 부패를 줄이고 유통 기한을 연장하기 위해 고안된 새로운 서방형 이산화염소 제품의 사용 프로토콜을 제시합니다. 이 방법은 상업용 방울토마토 포장 적용에 중점을 두며, Escherichia coli 및 Alternaria alternata와 같은 병원균에 대한 효과를 다룹니다.
본 방법은 지속적인 항균제 방출을 가능하게 함으로써 신선 농산물 공급망의 수확 후 미생물 제어 문제를 해결합니다. 이는 제품 품질을 저하시키지 않으면서 유통기한 연장 및 안전성 개입에 대한 예측 신뢰도를 높여줍니다. 이러한 접근 방식은 부패성 상품의 생물학적 위험을 줄이기 위한 확장 가능한 비열 처리 개입 방안을 제공합니다.
이 방법은 제형 개발에 앞서 항균 효능과 안정성을 평가하는 초기 발견 워크플로우에 적합합니다.