Name: 쥐 간 이식 모형에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션하여 기관 허혈-재관류 상해 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-03-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 7 s
Description: 학습하세요 쥐 간 이식 모형에서 혈역학적 변화를 시뮬레이션하여 무간기 동안 장기 허혈-재관류 손상을 연구하는 방법을. 이 기법은 이식 후 합병증 메커니즘 이해와 환자 예후 개선에 필수적인 기초 연구를 제공합니다.

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우리는 광시의과 대학의 제 2 부속 병원의 원타오 리 박사와 Ji-hua 우 박사가 준 유용한 제안을 인정하고 싶습니다. 저자는 유용한 의견과 토론에 대한 우리의 팀 동료에게 감사드립니다. 저자는 또한 그들의 의견에 대한 익명의 검토자와 편집자에게 감사드립니다. 특별한 감사는 그들의 지속적인 지원과 격려에 대한 박사 위안의 부모에게 가야한다. 이 작품은 닝보 자연과학 재단(2014A610248)의 지원을 받았습니다.

동물윤리위원회는 광시의과대학(No20190920)의 실험을 승인했다. 모든 동물은 광시 의과 대학의 동물 실험 센터에 의해 공급되었다. 우리는 SPF 남성 스프라그 Dawley 쥐 (200-250 g, 10-12 주)를 사용했으며, 25 ± 2 ° C의 실온 과 습도 50 ± 10 %를 사용했습니다. 수유는 작동 24시간 전에 중단되었습니다. 그러나 물이 제공되었습니다.
참고: 한 운전자는 미세 수술 기초 또는 수술 현미경 없이 모든 수술을 수행할 수 있습니다.
1. 작동
<ol><li>계량 후, 이소플루란으로 쥐를 마취 (5%) 동물 마취 기계를 사용 하 여.</li>
	<li>1-2분 후, 쥐의 발가락을 핀셋으로 부드럽게 고정합니다. 쥐가 꼬집은 후에 반응하지 않으면 마취 상태에 들어갔습니다. 눈에 수의사 연고를 사용하여 건조함을 방지하십시오. 동물 가열 램프를 사용하여 쥐의 체온을 37-38 °C에서 유지하십시오.</li>
	<li>복부 소독 (povidone 요오드 용액)에 따라 동물 해부 테이블에 쥐를 고정하십시오. 집게와 가위를 사용하여 xiphoid 프로세스 보다 3cm 의 중앙분리를 합니다.</li>
	<li>복강을 열고, 리트랙터를 사용하여 간을 노출하고, 간위 인대를 동원합니다. 면봉을 사용하여 간 의 중간 엽을 부드럽게 뒤집고 위로 돌려 포타 간염을 노출시십시오. CBD, PV 및 HA를 식별합니다.</li>
	<li>작은 내장을 면 봉면을 사용하여 왼쪽 하복위를 향해 밀어 젖은 거즈로 덮고 자궁 내 정맥을 오른쪽 신장 정맥으로 옮춥니다.</li>
	<li>포털 정맥, 간 동맥 및 오른쪽 신장 정맥 위에 열등한 정맥을 3-0 실크 실로 표시된 집게로 분리합니다.</li>
	<li>왼쪽과 오른쪽 하부 사지 피부를 잘라 안과 포셉을 사용하여 대퇴 정맥을 노출합니다. 대퇴 정맥을 통해 저분자 헤파린 625 IU/kg을 천천히 주입하여 전신을 헤패린시합니다.</li>
	<li>포털 정맥, 간 동맥 및 열등한 정맥 위에 3-0 봉합사로 오른쪽 신장 정맥 위에 45 분 동안 지속됩니다(그림 1). 복강내의 소장을 교체하고 거즈로 덮습니다. 이 기간 동안 흡입 마취를 감소시십시오.</li>
	<li>45분 후, 오른쪽 신장 정맥 위에 포문 정맥, 간 동맥 및 열등한 정맥을 방출한다.</li>
	<li>근육과 피부를 봉합하고, 층별로 겹쳐서, 흡입 마취를 종료한다. 4시간마다 5 mg/kg의 피하 모르핀을 사용하여 수술 후 항간증을 제공합니다.</li>
	<li>2 ±5 °C의 온도에서 깨어 있고 50 ± 10 %의 습도에서 먹이를 줄 때까지 쥐를 관찰하십시오. 동물 난방 램프가 필요합니다.</li>
</ol>

<ol><li>Dar, W. A., Sullivan, E., Byon, J. S., Eltzschig, H., Ju, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischaemia+reperfusion+injury+in+liver+transplantation%3A+Cellular+and+molecular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+International%22%5BJournal%5D)">Ischaemia reperfusion injury in liver transplantation: Cellular and molecular mechanisms.</a> Liver International. 39 (5), 788-801 (2019).</li>
<li>Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+shock+pretreatment+improves+stem+cell+repair+following+ischemia-reperfusion+injury+via+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Heat shock pretreatment improves stem cell repair following ischemia-reperfusion injury via autophagy.</a> World Journal of Gastroenterology. 21 (45), 12822-12834 (2015).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+YAP+attenuates+hepatic+damage+and+fibrosis+in+liver+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Activation of YAP attenuates hepatic damage and fibrosis in liver ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Hepatology. 71 (4), 719-730 (2019).</li>
<li>Hirao, H., Dery, K. J., Kageyama, S., Nakamura, K., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heme+Oxygenase-1+in+liver+transplant+ischemia-reperfusion+injury%3A+From+bench-to-bedside%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radical+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Heme Oxygenase-1 in liver transplant ischemia-reperfusion injury: From bench-to-bedside.</a> Free Radical Biology and Medicine. 157, 75-82 (2020).</li>
<li>Motiño, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+role+of+hepatocyte+cyclooxygenase-2+expression+against+liver+ischemia-reperfusion+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Protective role of hepatocyte cyclooxygenase-2 expression against liver ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Hepatology. 70 (2), 650-665 (2019).</li>
<li>Guo, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+search+for+a+magic+bullet+to+fight+multiple+organ+failure+secondary+to+ischemia%2Freperfusion+injury+and+abdominal+compartment+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">The search for a magic bullet to fight multiple organ failure secondary to ischemia/reperfusion injury and abdominal compartment syndrome.</a> Journal of Surgical Research. 184 (2), 792-793 (2013).</li>
<li>Elham, M., Mahmoudi, M., Nassiri-Toosi, M., Baghfalaki, T., Zeraati, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post+liver+transplantation+survival+and+related+prognostic+factors+among+adult+recipients+in+tehran+liver+transplant+center%3B+2002-2019%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Iranian+Medicine%22%5BJournal%5D)">Post liver transplantation survival and related prognostic factors among adult recipients in tehran liver transplant center; 2002-2019.</a> Archives of Iranian Medicine. 1 (23), 326-334 (2020).</li>
<li>Kim, E. H., Ko, J. S., Gwak, M. S., Lee, S. K., Kim, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+clinical+significance+of+hyperfibrinolysis+during+living+donor+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Coagulation+and+Fibrinolysis%22%5BJournal%5D)">Incidence and clinical significance of hyperfibrinolysis during living donor liver transplantation.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 29 (3), 322-326 (2018).</li>
<li>Czigány, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+research+practice+in+rat+orthotopic+and+partial+orthotopic+liver+transplantation%3A+a+review%2C+recommendation%2C+and+publication+guide%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Improving research practice in rat orthotopic and partial orthotopic liver transplantation: a review, recommendation, and publication guide.</a> European Surgical Research. 55 (1-2), 119-138 (2015).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28 (1), 47-50 (1979).</li>
<li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplantation Proceedings. 11 (1), 571-577 (1979).</li>
<li>Miyata, M., Fischer, J. H., Fuhs, M., Isselhard, W., Kasai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Cuff+technique+for+three+vascular+anastomoses%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A simple method for orthotopic liver transplantation in the rat. Cuff technique for three vascular anastomoses.</a> Transplantation. 30 (5), 335-338 (1980).</li>
<li>Kamada, N. A., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).</li>
<li>Yang, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+of+orthotopic+liver+transplantation+using+a+novel+magnetic+anastomosis+technique+for+suprahepatic+vena+cava+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction.</a> Journal of Visualized Experiments. 19 (133), e56933(2018).</li>
<li>Liu, L. X., He, C., Huang, T., Gu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+new+technique+for+reconstruction+of+hepatic+artery+during+liver+transplantation+in+sprague-dawley+rat%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development of a new technique for reconstruction of hepatic artery during liver transplantation in sprague-dawley rat.</a> PLoS One. 10 (12), 0145662(2015).</li>
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<li>Schmidt, J., Lewandrowsi, K., Warshaw, A. L., Compton, C. C., Rattner, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphometric+characteristics+and+homogeneity+of+a+new+model+of+acute+pancreatitis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pancreatology%22%5BJournal%5D)">Morphometric characteristics and homogeneity of a new model of acute pancreatitis in the rat.</a> International Journal of Pancreatology. 12 (1), 41-51 (1992).</li>
<li>Chui, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+mucosal+lesion+in+low-flow+states.+I.+A+morphological%2C+hemodynamic%2C+and+metabolic+reappraisal%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal.</a> Archives of Surgery. 101 (4), 478-483 (1970).</li>
<li>Kozian, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-lung+ventilation+induces+hyperfusion+and+alveolar+damage+in+the+ventilated+lung%3Aan+experimental+study%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">One-lung ventilation induces hyperfusion and alveolar damage in the ventilated lung:an experimental study.</a> British Journal of Anaesthesia. 100 (4), 549-559 (2008).</li>
<li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heavy+water+%28D2O%29+containing+preservation+solution+reduces+hepatic+cold+preservation+and+reperfusion+injury+in+an+isolated+perfused+rat+liver+%28IPRL%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Medicine%22%5BJournal%5D)">Heavy water (D2O) containing preservation solution reduces hepatic cold preservation and reperfusion injury in an isolated perfused rat liver (IPRL) model.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (11), 1818(2019).</li>
<li>Nakamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sirtuin+1+attenuates+inflammation+and+hepatocellular+damage+in+liver+transplant+ischemia%2Freperfusion%3A+from+mouse+to+human%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Sirtuin 1 attenuates inflammation and hepatocellular damage in liver transplant ischemia/reperfusion: from mouse to human.</a> Liver Transplantation. 23 (10), 1282-1293 (2017).</li>
<li>Blaire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+Considerations+of+Hilar+Cholangiocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Oncology+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Surgical Considerations of Hilar Cholangiocarcinoma.</a> Surgical Oncology Clinics of North America. 28 (4), 601-617 (2019).</li>
</ol>

이 원고의 저자는 공개 할 이해상충이 없습니다.

쥐의 OLT는 간 이식, IRI, 이식 거부, 면역 내성, 이식 병리학 및 약리학, 균동 이식 및 외국인 이식에서 장기 보존을 연구하기위한 이상적인 모델입니다. 현재, 그것은 널리 간 이식의 실험 연구에 사용.
파일럿 연구 도중 우리는 먼저 pentobarbital 나트륨 내 성소 마취를 관리하고 이것이 높은 수술 후 사망률 및 혈역학 변화에 짧은 내성으로 이끌어 낸다는 것을 것을을 발견했습니다. 따라서, 우리는 행동의 급속한 개시 및 체외 특성의 급속한 배제를 위한 후속 예심에서 흡입 마취를 이용했습니다. 흡입 마취로의 전환은 쥐의 허용 오차 시간과 수술 후 생존을 크게 향상시게 했습니다. 수사관은 마취제를 과다 하는 것을 방지하기 위하여 쥐의 호흡 그리고 심박수에 주의를 기울여야 합니다. 생체 시스템은 심박수와 혈압을 모니터링하는 데 사용할 수 있습니다. 우리는 또한 혈관의 결찰에 외과 봉합사 두께의 충격을 관찰했습니다. 3-0보다 작은 선이 혈관을 완벽하게 ...

허혈 -재관류 부상 (IRI) 간 이식 후 일반적인 합병증이다. 간 IRI는 허혈 매개 세포 손상 및 간 재관전의 비정상적인 악화를 관련시키는 병리학적인 과정입니다. 간 IRI 및 국천성 면역 반응은 임상 환경 의 차이에 따라 뜨겁고 차가운 IRI로 나눌 수 있습니다1. 뜨거운 IRI는 줄기 세포 손상에 의해 유도되며, 일반적으로 간 이식, 충격 및 외상2의결과로. 감기 IRI는 내피 세포 및 말초 순환에 의한 간 이식의합병증이다 3. 임상 보고는 간 IRI가 초기 장기 실패의 10%와 연관되고 급성 및 만성거부4,5의부각을 증가시킬 수 있다는 것을 보여주었습니다. 또한, IRI간 은 또한 높은 사망률6을가진 다중 장기 기능 장애 증후군 또는 전신 염증 반응 증후군을 유도할 수 있다. 간 장기 에 관여하는 환자는 병원에서 더 오래 머물고, 더 많은 돈을 지출하고, 더 나쁜 예후7이있는경향이 있다. 합병증의 발달은 간 이식8의간 절단 단계의 길이와 밀접한 관련이 있다.
쥐에 있는 직교성 간 이식 (OLT) 1973년에 미국 교수 리에 의해 처음 보고되었습니다. 실험 적 수술은 봉합 방법을 사용하여 임상 간 이식 및 혈관및 일반적인 담관 (CBD)의 해부학단계를 시뮬레이션했습니다. 절차는 어렵고성공률 9의낮은 시간 소모. 1979년, 카마다 등은 26분10분이내에 항간위상을 조절하기 위해 포털 정맥의 아나스토모정신에 '2-커프 방법'을 창의적으로 사용하여 쥐의 OLT에 상당한 개선을 이루었다. 같은 해, 짐머만은 '단일 담즙 스텐트 방법'을 제안했다. 이이남의 작품을 바탕으로 짐머만은 폴리에틸렌 튜브를 사용하여 기증자와 수령인의 CBD를 직접 마취하고 CBD의 재건을 단순화하고 괄약근의 기능을 보존했으며,이 방법은 OLT 모델11의담즙 재건을위한 표준이되었습니다. 1980년, Miyata 등은 포탈 정맥(PV), 수프라간 정맥(SVC), 및 간내 정맥 카바(IVC)가 커프 방법에 의해 마취된 '3-커프 방법'을 제안했다. 그러나, 열등한 베나 카바역류(12)의방해로 이어질 수 있는 이 방법으로 캐뉼라의 왜곡의 위험이 있다. 1983년, '투커프 방식'은 PV 및 IVC의 해부학을 위한 커프 방법을 사용하여 제안되었지만,SVC(13)에대한 봉합방법을 채택하였다. 이 방법은 OLT 모델을 확립하기 위해 전 세계 학자들에 의해 채택되었습니다. 그 이후, 커프 아나스토모시스 단계는 간항상을 단축하고쥐(14)의생존율을 향상시키기 위해 개선되었다. 유사하게, 개선된 방법은15년형을 단축하기 위해 임상 실습에서 사용된다. 그러나, 간 이식 후 IRI에 대한 기본 연구는 생존율이 비반대로 외간 장기에 상해의 정도와 관련이 있음을 보여 주었다. 따라서 간 이식 후 IRI를 시뮬레이션하기 위해서는 추가 연구가 필요하며, 간 이식 후 IRI를 시뮬레이션하기 위해서는 간단하고 재현 가능한 동물 모델이 필요합니다.
ancc 단계의 정의에 근거하여, 우리는 쥐에 있는 외측 기관의 IRI결과로 간 이식에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션했습니다. 본명, 간 이식 후 IRI에 대한 기초 연구를 용이하게 하기 위해 쥐에서 간편상(간 허혈)의 동물 모델을 구축하는 방법에 대한 상세한 설명을 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>4% 파라포름알데히드 용액</td><td>Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd</td><td>P804536</td><td></td></tr><tr><td>공기 건조 오븐</td><td>Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd.</td><td>BPG</td><td></td></tr><tr><td>알라닌 아미노전이효소(ALT)키트</td><td>Elabscience Biotechnology Co., Ltd</td><td>E-BC-K235-S</td><td></td></tr><tr><td>암모니아</td><td>Sinopharm Chemical Reagents Co., Ltd</td><td>10002118</td><td></td></tr><tr><td>Amylase Kit</td><td>Elabscience Biotechnology Co., Ltd</td><td>E-BC-K005-M</td><td></td></tr><tr><td>무수 에탄올</td><td>Sinopharm Chemical Reagents Co.,</td><td>Ltd 100092183</td><td></td></tr><tr><td>Animal 마취 기계</td><td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co., Ltd.</td>, <td>R640</td><td></td></tr><tr><td>아스파르테이트 아미노전이효소(AST) 키트</td>, <td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td><td>S03040</td><td></td></tr><tr><td>자동 생화학 분석기.</td><td>지멘스 AG FWB:SIE, NYSE:SI Co., Ltd.</td><td>2400</td><td></td></tr><tr><td>Biosystems (when nessary)</td><td>Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd.</td><td>BL-420F</td><td></td></tr><tr><td>원심분리기</td><td>Baiyang Medical Instrument Co., Ltd.</td><td>BY-600A</td><td></td></tr><tr><td>커버 유리</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd.</td>, <td>10212432C</td><td></td></tr>, <tr><td>크레아티닌 키트</td><td>, Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td><td>S03076</td><td></td></tr><tr><td>탈수기</td><td>헝가리 3DHISTECH Co., Ltd</td><td>Donatello 시리즈 2</td><td></td></tr><tr><td>임베딩 머신</td><td>후베이 Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.</td><td>KH-BL1</td><td></td></tr><tr><td>냉동 기계</td><td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td><td>JB-L5</td><td></td></tr><tr><td>hematoxylin-eosin 염료 용액</td><td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td><td>G1005</td><td></td></tr><tr><td>고효율 파라핀 왁스</td><td>상하이 huayong 파라핀 왁스 co., Ltd</td><td>Q/YSQN40-91</td><td></td></tr><tr><td>염산</td><td>Sinopharm 화학 시약 Co.</td><td>Ltd 10011018</td><td></td></tr><tr><td>인공 수정체(IOL) 겸자</td><td>Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd.</td><td>JTZRN</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co., Ltd</td><td>&mdash;</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 가위(네사리 시)</td> <td>상하이 수술 기구 공장</td><td>WA1010</td><td></td></tr><tr><td>바늘 홀더</td><td>상하이 수술 기구 공장</td><td>J32010</td><td></td></tr><tr><td>중립 껌</td><td>상하이 Huashen 치유 장비 Co., Ltd.</td><td>&엠대시;</td><td></td></tr><tr><td>일반 광학 현미경</td><td>Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd</td><td>Nikon Eclipse CI</td><td></td></tr><tr><td>안과 겸자</td><td>상하이 수술 기구 공장</td><td>J3CO30</td><td>스트레이트</td></tr><tr><td>안과 겸자</td><td>상하이 수술 기구 공장</td><td>JD1060</td><td>굽힘</td></tr><tr><td>안과 가위</td><td>상하이 수술 기구 공장</td><td>J1E0</td><td></td></tr><tr><td>병리학적 슬라이서</td><td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td><td>RM2016</td><td></td></tr><tr><td>피펫</td><td>Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd.</td><td></td><td></td>7010101008</tr><tr><td>견인기</td><td>베이징 Jinuotai 기술 개발 Co., 주식 회사.</td><td>JNT-KXQ</td><td></td></tr><tr><td>스캐너</td><td>헝가리 3DHISTECH Co., Ltd</td><td>판노라믹 250</td><td></td></tr><tr><td>슬라이드</td><td>무한 Saiwell 생명 공학 Co., Ltd</td><td>G6004</td><td></td></tr><tr><td>크실렌</td><td>Sinopharm 화학 시약 유한 회사</td><td>1330-20-7</td><td></td></tr></tbody></table>

쥐 간 이식 모형에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션하여 기관 허혈-재관류 상해

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

쥐의 직소 간 이식 (OLT)은 수술 전, 수술 내 및 수술 후 연구에 사용되는 시도되고 입증 된 동물 모델이며, 비형 기관의 허혈 재관류 손상 (IRI)을 포함합니다. 이 모델에는 수많은 실험과 장치가 필요합니다. 간 단계의 기간은 이식 후 IRI를 개발하는 시간과 밀접한 관련이 있습니다. 이 실험에서, 우리는 쥐에 있는 외간 기관 손상을 유도하기 위하여 혈역학 변경을 사용하고 최대 허용 오차 시간을 결정했습니다. 가장 심한 장기 손상까지 의 시간은 다른 장기에 대 한 변화. 이 방법은 쉽게 복제 될 수 있으며 간 이식 후 외간 장기의 IRI를 연구하는 데 사용할 수도 있습니다.

간 허혈에 쥐의 내성 이 동물 모델에서는 수술 중에 혈관이 결찰된 부위가 도 1에도시되어 있다. 쥐는 무작위로 15 분 동안 허혈을 위한 5 개의 그룹으로 분할되었다 (I15 그룹), 30 분 (I30 그룹), 45 분 (I45 그룹), 60 분 (I60), 그리고 샴 그룹, 각 그룹에 10 쥐와. 각 군의 생존율은 수술 후 14일 후에 관찰되었다. 모든 쥐는 I15 그룹, I30 그룹, 그리고 가짜 그룹에서 살아남았다. I45 그룹에서 14일 동안 8명이 살아남았고, I60 그룹에서는 단 2명만이 살아남았습니다. 이러한 결과는 쥐가 최대 45분 동안 간항제 상을 견딜 수 있음을시사한다(표 1).
쥐의 순환에 혈관 결찰의 효과 실험 도중, Biosystems는 심박수 및 혈압 (오른쪽 내부 경동맥 삽관)을 간 단계 전후에 기록...

이 논문은 간 이식 후 허혈 재관류 손상에 대한 기본 연구를 용이하게하기 위해 쥐에서 간 형 편 (간 허혈)의 동물 모델을 구축하는 방법에 대한 자세한 설명을 제공합니다.

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

쥐 간 이식 모델에서 혈역학적 변화를 시뮬레이션하 여 장기 허혈-재관류 손상. 허혈 -재관 류 손상은 간 이식 후 일반적인 응용 프로그램입니다. 간 장기 에 관여하는 환자는 병원에서 더 오래 머물고, 더 많은 지출을하며, 더 나쁜 예후를 가지고 있습니다.합병증의 발달은 간 이식의 간 단계의 길이와 밀접한 관련이 있습니다. 그러나 간 이식 후 허혈-재관류 손상에 대한 기본 연구는 간 이식 후 생존율이 외래 기관에 대한 부상 정도와 반비례한다는 것을 보여주었습니다. anhaptic 단계의 정의에 따라, 우리는 외합 기관의 허혈 재관전 손상의 결과로 간 이식에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션했습니다.이 논문은 쥐의 anhaptic 단계의 동물 모델을 구축하는 방법에 대한 자세한 설명을 제공하는 것입니다, 간 이식 후 허혈 - 재관류 부상에 대한 기본 연구. 위안 박사는 모든 비디오 동물 작전을 담당합니다. 두 개의 안과 집게, 직선 및 굽힘, 그리고 인터큘러 렌즈, IOL 집게, 안과 가위, 1 ~ 2 개의 re트랙터, 면봉, 3-0 수술 봉합사, 요오도폼 거즈, 봉합 바늘, 생물 시스템, 필요한 경우 생물 시스템, 및 간관 렌즈, IOL 포스프는 둥근 때문에 혈관을 분리하는 데 사용됩니다.동물 마취 기계, 물을 해제 기계, 임베드 머신, 병리학 슬라이서, 냉동 기계, 티슈 슬라이서, 공기 건조 오븐, 신경 광학 현미경, 스캐너, 일반 마취를위한 엔플루란, 4 % 파라 포름 알데히드 용액, 어떤 하이드로 우스 에탄올, 자일렌, 고효율 파라핀 왁스, 헤마톡시린 - 에오신 염료 용액, 헤마톡시린 - 에신 염료 용액, 헤마톡시린 - 에신 염료 액용, 암염, 암혈, 암석, 미천성, 미천성, 검소, 검소성, 검소한, 검소성, 검소한 재검, 검소한 재검 파이펫, 원심분리기, 자동 생화학 분석기, 알라닌 아미노 트랜스포마이징, ALT 키트, 아스파르타트, 아미노 트랜스포마이저, AST 키트, 크레아티닌 키트. 계량 후, 쥐는 동물 마취 기계에 의해 이소플루란으로 마취됩니다.복부 소독에 따라, 집게와 가위를 사용하여 xiphoid 프로세스 의 3 센티미터 의 중앙 분리를 합니다. 복강을 열고, 리트랙터를 사용하여 간을 노출하고 간위 인대를 동원합니다. 면 봉면을 사용하여 간 의 중간 엽을 부드럽게 뒤집고 위로 돌려 포르타 습관을 노출시하십시오.담관, 포탈 정맥 및 간 동맥을 식별합니다. 작은 내장을 면 교환을 사용하여 왼쪽 하복

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

우리는 시궁창에서 orthotopic 간 이식을위한 클래식 두 커프스 기술의 쉬운 설정 개정을 제시.

쥐에게 Orthotopic 간 이식

쥐의 Orthotopic 간 이식은 생명 의학 연구에 필수적인 실험 모델입니다. 여기 50 % 부분 이식을 사용하여 간장 동맥 재건과 orthotopic 쥐의 간 이식에 대한 수술 절차를 제시한다.

간 간선 재건과 부분 Orthotopic 간 이식의 쥐 모델에 대한 외과 절차

고립된 쥐 심장은 허혈 재관류 손상에 대한 지속적인 모델입니다. 여기에서는 허혈성 모욕의 정도를 확인하기 위해 제자리 대동맥 삽  관술, 심장의 Langendorff 관류, 시뮬레이션된 허혈-재관류 손상 및 경색 염색을 통해 쥐에서 박동하는 심장을 채취하는 과정을 설명합니다.

랑겐 돌프 - 관류 쥐 마음에 유도 및 허혈 - 재관류 손상의 평가

고유 한 쥐의 간 문부 클램프 모델은 허혈 - 재관류 손상을 완화의 약물 분자의 영향을 연구하기 위해 개발되었다. 이 모델은 직접 간 전송을 허용, 포털 정맥의 지점을 통해 허혈성 간 세그먼트 포털 공급의 직접 삽관이 포함되어 있습니다.

쥐 간 문부 클램프 모델을 사용하여 직접 분절 인트라 간 납품 방법

이 연구의 목표는 쥐 정형 소 간 이식 모델을 수정하여 인간의 간 이식을 더 잘 나타내고 수령인 생존을 개선하는 것입니다. 제시된 방법은 기증자 간동맥을 수령인 간동맥에 연결하여 간 동맥 유입을 재확립합니다.

직교 간 이식의 쥐 모형에 있는 동맥 재연결 후에 감소된 합병증

여기에서는 결과를 개선하는 데 도움이 되는 쥐 폐 이식 모델에 대한 최적화를 제시합니다. 체중에 따른 커프스 사이즈 가이드, 4차 늑간 공간을 확인하기 위한 측정 전략, 상처 봉합 및 BAL(기관지폐포 세척) 체액 및 조직 수집 방법을 제공합니다.

온난 허혈/재관류 손상의 쥐 폐 이식 모델: 결과 개선을 위한 최적화

이 프로토콜에서는 생착 중 정맥 - 정맥 바이 패스를 사용하지 않고 20 시간 동안 기증자 장기를 정적 냉장 보관 한 후 돼지 동종 간 이식 모델을 설명합니다. 이 접근법은 무간기를 최소화하고 정교한 부피 및 혈압 강하제 관리와 함께 단순화 된 수술 기술을 사용합니다.

확장 기준 기증자 모델로서의 정맥 우회술이 없는 돼지 간 이식

여기에 설명된 쥐 이소성 보조 간 이식 프로토콜은 간 동종이식 거부 반응의 메커니즘을 탐색하기 위한 실용적인 조사 도구를 제공합니다. 이 모델은 쥐의 정형소 간 이식의 수술 장애물과 동물의 스트레스를 완화하는 데 도움이 됩니다.

동종이식 거부 반응 연구를 위한 간절개술을 활용하는 이주제 보조 전체 간 쥐 이식 모델

이 기사에서는 쥐 모델에서 내장 장기의 통제되고 가역적인 과관류를 위한 표준화된 절차를 소개합니다. 목표는 높은 수준의 방법론적 확실성과 통제력으로 이러한 관류 불량 상태를 유도하는 동시에 기술적 단순성과 오류 복원력을 유지하는 것입니다.

쥐에서 정중선 개복술을 통한 가역적 내장 동맥 허혈, 정맥 울혈 및 결합 관류 장애 제어

무료 조직 전송이 널리 종양학 절제술 및 외상 후 형태와 기능을 복원하는 재건 수술에 사용됩니다. 수술하기 전에이 조직을 전처리하는 것은 결과를 향상시킬 수 있습니다. 이 문서에...

Myocutaneous 국소 빈혈 reperfusion 상해의 쥐 모델 : 현장 가로 직근 abdominis의 Myocutaneous 플랩의

학습하세요 쥐 간 이식 모형에서 혈역학적 변화를 시뮬레이션하여 무간기 동안 장기 허혈-재관류 손상을 연구하는 방법을. 이 기법은 이식 후 합병증 메커니즘 이해와 환자 예후 개선에 필수적인 기초 연구를 제공합니다.

쥐 간 이식 모형에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션하여 기관 허혈-재관류 상해

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