Name: 온전한 췌장을 가진 마우스 맥관 구조를 통한 관류를 통한 포도당 자극 인슐린 분비 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T12:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 41 s
Description: 학습하세요 온전한 췌장 관류 기술을 이용한 포도당 자극 인슐린 분비 측정법을 통해 생리학적 조건에서 췌장 베타세포 기능을 정확히 분석하는 방법을. 이 기술은 당뇨병 치료제 평가에 활용됩니다.

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<ol><li>Rosenberg, L., Wang, R., Paraskevas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+changes+resulting+from+islet+isolation+lead+to+islet+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Structural and functional changes resulting from islet isolation lead to islet cell death.</a> Surgery. 126 (2), 393-398 (1999).</li>
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<li>Bottino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+of+human+islets+to+isolation+stress+and+the+effect+of+antioxidant+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Response of human islets to isolation stress and the effect of antioxidant treatment.</a> Diabetes. 53 (10), 2559-2568 (2004).</li>
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<li>Jansson, L., Carlsson, P. -O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft+vascular+function+after+transplantation+of+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Graft vascular function after transplantation of pancreatic islets.</a> Diabetologia. 45 (6), 749-763 (2002).</li>
<li>Leibiger, I. B., Berggren, P. -O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraocular+in+vivo+imaging+of+pancreatic+islet+cell+physiology%2Fpathology%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Metab%22%5BJournal%5D)">Intraocular in vivo imaging of pancreatic islet cell physiology/pathology.</a> Mol Metab. 6 (9), 1002-1009 (2017).</li>
<li>Weir, G. C., Atkins, R. F., Martin, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucagon+secretion+from+the+perfused+rat+pancreas+following+acute+and+chronic+streptozotocin%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolism%22%5BJournal%5D)">Glucagon secretion from the perfused rat pancreas following acute and chronic streptozotocin.</a> Metabolism. 25 (11 Suppl), 1519-1521 (1976).</li>
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<li>Weir, G. C., Leahy, J. L., Braunstein, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+insulin+and+glucagon+release+from+the+perfused+pancreas%2C+intact+isolated+islets%2C+and+dispersed+islet+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Res%22%5BJournal%5D)">Characteristics of insulin and glucagon release from the perfused pancreas, intact isolated islets, and dispersed islet cells.</a> Horm Res. 24 (1), 62-72 (1986).</li>
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<li>Heiser, A., Ulrichs, K., Müller-Ruchholtz, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+porcine+pancreatic+islets%3A+low+trypsin+activity+during+the+isolation+procedure+guarantees+reproducible+high+islet+yields%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Lab+Anal%22%5BJournal%5D)">Isolation of porcine pancreatic islets: low trypsin activity during the isolation procedure guarantees reproducible high islet yields.</a> J Clin Lab Anal. 8 (6), 407-411 (1994).</li>
<li>Basir, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+outcome+of+pig+islet+isolation+by+Pefabloc+inhibition+of+trypsin%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Improved outcome of pig islet isolation by Pefabloc inhibition of trypsin.</a> Transplant Proc. 29 (4), 1939-1941 (1997).</li>
<li>White, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+study+of+the+activation+of+endogenous+pancreatic+exocrine+enzymes+during+automated+porcine+islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">A preliminary study of the activation of endogenous pancreatic exocrine enzymes during automated porcine islet isolation.</a> Cell Transplant. 8 (3), 265-276 (1999).</li>
<li>Lakey, J. R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serine-protease+inhibition+during+islet+isolation+increases+islet+yield+from+human+pancreases+with+prolonged+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Serine-protease inhibition during islet isolation increases islet yield from human pancreases with prolonged ischemia.</a> Transplantation. 72 (4), 565-570 (2001).</li>
<li>Rose, N. L., Palcic, M. M., Helms, L. M. H., Lakey, J. R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Pefabloc+as+a+serine+protease+inhibitor+during+human-islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Pefabloc as a serine protease inhibitor during human-islet isolation.</a> Transplantation. 75 (4), 462-466 (2003).</li>
<li>Cross, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagenase+penetrates+human+pancreatic+islets+following+standard+intraductal+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Collagenase penetrates human pancreatic islets following standard intraductal administration.</a> Transplantation. 86 (7), 907-911 (2008).</li>
<li>Balamurugan, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harmful+delayed+effects+of+exogenous+isolation+enzymes+on+isolated+human+islets%3A+relevance+to+clinical+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Harmful delayed effects of exogenous isolation enzymes on isolated human islets: relevance to clinical transplantation.</a> Am J Transplant. 5 (11), 2671-2681 (2005).</li>
<li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+analysis+of+islet+cells+in+vitro%2C+in+situ%2C+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Functional analysis of islet cells in vitro, in situ, and in vivo.</a> Semin Cell Dev Biol. 103, 14-19 (2020).</li>
<li>Marciniak, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+pancreas+tissue+slices+for+in+situ+studies+of+islet+of+Langerhans+and+acinar+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Using pancreas tissue slices for in situ studies of islet of Langerhans and acinar cell biology.</a> Nat Protoc. 9 (12), 2809-2822 (2014).</li>
<li>Cohrs, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bridging+the+gap%3A+pancreas+tissue+slices+from+organ+and+tissue+donors+for+the+study+of+diabetes+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Bridging the gap: pancreas tissue slices from organ and tissue donors for the study of diabetes pathogenesis.</a> Diabetes. 73 (1), 11-22 (2024).</li>
<li>Panzer, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreas+tissue+slices+from+organ+donors+enable+in+situ+analysis+of+type+1+diabetes+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Pancreas tissue slices from organ donors enable in situ analysis of type 1 diabetes pathogenesis.</a> JCI Insight. 5 (8), e134525(2020).</li>
<li>Wargent, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+insulin+secretion+using+pancreas+perfusion+in+the+rodent%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Measurement of insulin secretion using pancreas perfusion in the rodent.</a> Methods Mol Biol. 2076, 281-297 (2020).</li>
<li>Tamayo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte+control+of+blood+flow+in+intraocular+islet+grafts+impacts+glucose+homeostasis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Pericyte control of blood flow in intraocular islet grafts impacts glucose homeostasis in mice.</a> Diabetes. 71 (8), 1679-1693 (2022).</li>
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<li>Ma, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+insulin+secretion+between+the+rat+and+mouse%3A+role+of+cAMP%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Differences in insulin secretion between the rat and mouse: role of cAMP.</a> Eur J Endocrinol. 132 (3), 370-376 (1995).</li>
<li>Aynsley-Green, A., Biebuyck, J. F., Alberti, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthesia+and+insulin+secretion%3A+the+effects+of+diethyl+ether%2C+halothane%2C+pentobarbitone+sodium+and+ketamine+hydrochloride+on+intravenous+glucose+tolerance+and+insulin+secretion+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Anaesthesia and insulin secretion: the effects of diethyl ether, halothane, pentobarbitone sodium and ketamine hydrochloride on intravenous glucose tolerance and insulin secretion in the rat.</a> Diabetologia. 9 (4), 274-281 (1973).</li>
<li>Chen, H., Li, L., Xia, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+alters+the+blood+glucose+response+to+ketamine+in+streptozotocin-diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Diabetes alters the blood glucose response to ketamine in streptozotocin-diabetic rats.</a> Int J Clin Exp Med. 8 (7), 11347-11351 (2015).</li>
<li>Lehmann, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+ketamine+sedation+on+glucose+clearance%2C+insulin+secretion+and+counterregulatory+hormone+production+in+baboons+%28Papio+hamadryas%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Effects of ketamine sedation on glucose clearance, insulin secretion and counterregulatory hormone production in baboons (Papio hamadryas).</a> J Med Primatol. 26 (6), 312-321 (1997).</li>
<li>Sharif, S. I., Abouazra, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+intravenous+ketamine+administration+on+blood+glucose+levels+in+conscious+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pharm+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effect of intravenous ketamine administration on blood glucose levels in conscious rabbits.</a> Am J Pharm Toxicol. 4 (2), 38-45 (2009).</li>
<li>Komatsu, M., Takei, M., Ishii, H., Sato, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose-stimulated+insulin+secretion%3A+a+newer+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22J+Diabetes+Investig%22%5BJournal%5D)">Glucose-stimulated insulin secretion: a newer perspective.</a> J Diabetes Investig. 4 (6), 511-516 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>섬유막 산소 공급기</td><td>하버드 장치</td><td>73-3757</td><td>산소가 관류액에 들어갈 수 있도록 합니다.</td></tr><tr><td>가열 패드</td><td>브레인트리 사이언티픽</td><td>39옴</td><td></td></tr><tr><td>케타민/자일라진</td><td>패터슨 수의학</td><td>78908598</td><td></td></tr><tr><td>마그네틱 보드</td><td>브레인트리 사이언티픽</td><td>39옴</td><td></td></tr><tr><td>고무 밴드가 있는 자석</td><td>브레인트리 사이언티픽</td><td>39옴</td><td></td></tr><tr><td>현미경 검사 법</td><td>해당 사항 없음</td><td>해당 사항 없음</td><td>특정 회사 없음</td></tr><tr><td>산소 탱크</td><td>해당 사항 없음</td><td>해당 사항 없음</td><td>특정 회사 없음</td></tr><tr><td>PCR 튜브</td><td>써모피셔/인비트로젠</td><td>AM12225</td><td>관류액 수집에 사용</td></tr><tr><td>PE-30 튜브</td><td>브레인트리 사이언티픽</td><td>PE30</td><td></td></tr><tr><td>PE-50 튜브</td><td>브레인트리 사이언티픽</td><td>PE50 시리즈</td><td></td></tr><tr><td>연동 펌프</td><td>해당 사항 없음</td><td>해당 사항 없음</td><td>특정 회사 없음</td></tr><tr><td>수술 도구</td><td>해당 사항 없음</td><td>해당 사항 없음</td><td>특정 회사 없음</td></tr><tr><td>봉합 사</td><td>해당 사항 없음</td><td>해당 사항 없음</td><td>특정 회사 없음</td></tr></tbody></table>

온전한 췌장을 가진 마우스 맥관 구조를 통한 관류를 통한 포도당 자극 인슐린 분비

Glucose-Stimulated Insulin Secretion via Perfusion through the Mice Vasculature with an Intact Pancreas

ELISA 후 결과는 관류액 포도당 수치에 따라 어느 정도까지 마우스 췌장에서 인슐린 분비를 입증해야 합니다. 생쥐에서 이 절차의 참신함으로 인해 결과와 성공 여부를 분석하는 것은 관류된 생쥐 췌장에 대한 다른 여러 시도와의 비교에 달려 있습니다. 높은 포도당 농도에 대한 이상 인슐린 반응은 인간 피험자 및 섬 주전 융합 방법으로 평가된 바와 같이 생리학적인 것으로 간주됩니다. 제시된 결과는 쥐의 이전 췌장 관류와 유사합니다22. 3개의 독립적인 실험에서 평균 인슐린 수치는 고포도당(16.8mM)에 의해 유도된 특징적인 1단계 인슐린 분비를 보여주며, 포도당 농도가 낮아지면 분비가 억제되고 분비 촉진제(IBMX)에 대한 반응으로 분비가 증가합니다. 사용된 마우스는 수컷과 암컷 모두 1세 이상이었습니다(그림 3). 다른 특성을 가진 쥐의 관류 췌장을 검사하는 추가 연구가 수행되...

Current methods for glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) in rodents involve ex vivo perifusion or static incubation of pancreatic islets and ...

glucose-stimulated-insulin-secretion-via-perfusion-through-mice

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

랑게르한스의 고립 된 마우스 독도를 이용하여 체외 β-세포 기능을 시금 당뇨병의 병태 생리 및 치료의 연구에 중요한 구성 요소입니다. 많은 다운 스트림 응용 프로그램을 사용할 수 있지만,이 프로토콜은 특히 β-세포의 기능을 결정하는 중요한 매개 변수로 세포 내 순환 아데노신 monophosphate (캠프)의 측정에 대해 설명합니다.

마우스 췌장 섬의 분리 및 세포 내 cAMP를 결정하는 방법

인슐린 유도 혈관 근육 관류를 조절 하 고 증가 microvascular 표면적 (microvascular 모집) 용 질 exchange에 사용할 수 있는 혈액과 조직 interstitium 사이. 결합된 intravital 현미경 검사 법 및 대비 향상 된 초음파 동시에 큰 배와는 미세 혈관에서 인슐린의 활동을 평가 하 여 vivo에서.

Intravital 현미경 검사 법 및 대비 향상 된 초음파 마우스 Hindlimb의 인슐린 유도 된 혈관과 근육 관류 결합

이 프로토콜은 murine islet isolation과 decellularized scaffold상의 seeding을 증명합니다. Scaffold-supported 랑게질을 streptozotocin (STZ) 유도 당뇨병 생쥐의 부고환 지방 패드에 이식 하였다. 아일 레트는 이식 부위에서 생존하고 고혈당 상태를 역전시켰다.

당뇨병 쥐의 부고환 지방 세포에 이식 된 지지체 지지대 지지대

복 부의 단단한 장기 이식 중 췌 장 이식 가혹한 국 소 빈 혈 reperfusion 상해 관련 된 이식 손상, 결국 초기 이식 손실에 지도 개발 하는 경향이 있다. 이 프로토콜 murine 췌 장 이식이 초기, 해로운 손해 분석 적합 비 봉합 팔목 기술을 사용 하 여 모델을 설명 합니다.

췌 장 이식 수정된 팔목 기술을 사용 하 여 마우스 모델

이 프로토콜은 길 항 근, 메트로CCL5, 마이크로 삼 투 펌프 뇌 주입 시스템을 사용 하 여 쥐의 뇌에 전달 하 여 시상 하 부에 chemokine (C C 모티브) ligand 5 (CCL5)의 역할을 연구 합니다. 이 일시적인 억제 CCL5 활동의 중단 hypothalamic 인슐린 신호, 포도 당 옹 졸 및 주변 조직의 인슐린 감도.

쥐의 뇌에 지속적인 약물 주입 시스템 주변 포도 당 옹 졸 Hypothalamic 인슐린 신호를 공부

현재 문서 생성 및 다이어트 유발 된 인슐린 저항 및 비만 모델 높은 지방 다이어트를 먹이 쥐의 대사 특성에 설명합니다. 그것은 더 상세한 프로토콜 경구 포도 당 내성 검사 및 포도 당 물질 대사에서 vivo에서의 전신 변경 모니터링 인슐린 내성 검사 수행을 갖추고 있습니다.

높은 지방 다이어트를 먹이 쥐 경구 포도 당 내성 검사 (OGTT)과 인슐린 내성 검사 (ITT)를 사용 하 여 포도 당 대사 Vivo에서 의 연구

췌 장 섬 이식 타입-1 당뇨병에 normoglycemia를 달성 하는 방법입니다. 이 문서는 당뇨병 쥐의 정상적인 포도 당 수준을 유지 하는 intraportal 경로 통해 이식 기술에 초점을 맞추고.

Intraportal 이식 마우스 모델에서 췌 장 독도의

췌장의 생체 내 고해상도 이미징은 췌장 내 생체 내 이미징 창으로 촉진되었다.

췌장 인트라바이탈 이미징 창이 있는 뮤린 모델에서 췌장의 생체 내 세포 수준 시각화안정화

고혈당 클램프는 더 높은 혈당 농도를 유지하면서 인슐린 방출을 측정하는 데 사용됩니다. 저혈당 클램프는 역조절 반응에 의해 유도된 포도당 생성을 측정하기 위한 것입니다. 두 방법 모두 동일한 수술 절차를 사용합니다. 여기에서는 전신 포도당 대사를 평가하기 위한 클램프 기술을 제시합니다.

의식이 있는 쥐의 고혈당 클램프 및 저혈당 클램프

간 인슐린 청소는 포도당 항상성을 조절하는 데 중요합니다. 이 기사는 마우스의 현장 간 인슐린 제거율을 직접 평가하기 위한 사용자 친화적인 간 관류 절차에 대해 설명합니다.

In Situ Liver Perfusion을 통한 마우스의 인슐린 제거율 평가

학습하세요 온전한 췌장 관류 기술을 이용한 포도당 자극 인슐린 분비 측정법을 통해 생리학적 조건에서 췌장 베타세포 기능을 정확히 분석하는 방법을. 이 기술은 당뇨병 치료제 평가에 활용됩니다.

온전한 췌장을 가진 마우스 맥관 구조를 통한 관류를 통한 포도당 자극 인슐린 분비

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