In dit artikel geven we een algemeen protocol voor het meten van de replicatieve levensduur van gist moeder cellen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Het meten van replicatieve levensduur in de gist
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Veroudering is een degeneratieve proces wordt gekenmerkt door een progressieve verslechtering van de cellulaire componenten en organellen resulterend in sterfte. De gist
Protocol
Deel 1: Bereid stammen en platen voor replicatieve levensduur analyse
Deze paragraaf beschrijft de bereiding van het vaste YEPD platen voor gebruik in de replicatieve levensduur experiment en de voorbereiding van de gistcellen voor de levensduur analyse.
- Met behulp van geschikte steriele techniek, voor te bereiden YEPD agar platen (1% gistextract, 2% Bacto-pepton, 2% agar, 2% glucose) die zullen worden gebruikt voor het kweken van gistcellen en voor replicatieve levensduur analyse. U moet zich voorbereiden op zijn minst twee platen voor om de 4-5 stammen worden geanalyseerd in de levensduur experiment. De platen moeten bereid minimaal 2 dagen voor ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door een subsidie aan MK en BKK van de Ellison Medical Foundation. MK is een Ellison Medical Foundation New Scholar in Aging. We willen graag Soumya Kotireddy bedanken voor hulp tijdens het filmen.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen | |
|---|---|---|---|---|
| Agar | Reagens | Fisher Scientific | DF0145-17-0 (214530) | |
| Bacto-Peptone | Reagens | Fisher Scientific | DF0118-17-0 (211677) | |
| Gistextract | Reagens | Fisher Scientific | DF0886-17-0 (288620) | |
| Glucose |
Referenties
- Kaeberlein, M., Burtner, C. R., Kennedy, B. K. Recent developments in yeast aging. PLoS Genet. 3, (2007).
- Kaeberlein, M. Handbook of models for human aging. Conn, P. M. , Elsevier Press. Boston. 109-120 (2006).
- Smith, E. D.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
