Een murine model van cutane wondgenezing die kunnen worden gebruikt om therapeutische samenstellingen te beoordelen fysiologische en pathofysiologische instellingen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Wondgenezing en reparatie zijn de meest complexe biologische processen die zich in het menselijk leven. Na verwonding, verschillende biologische routes geactiveerd worden. Verstoorde wondheling, die voorkomt bij diabetici bijvoorbeeld kan leiden tot ernstige ongunstige resultaten zoals amputatie. Er is dus een toenemende impuls aan nieuwe middelen die wondheling bevorderen. Het testen van deze is beperkt tot grote diermodellen zoals varkens, die vaak onpraktisch. Muizen vertegenwoordigen de ideale preclinical model aangezien ze zuinig en vatbaar voor genetische manipulatie, die zorgt voor mechanistische onderzoek. Echter, wondgenezing in een muis is fundamenteel verschillend van die van de mens als het voornamelijk via contractie. Onze muizenmodel ondervangt dit doordat een spalk rond de wond. Door spalken de wond, is het herstelproces dan afhankelijk epithelisatie, cellulaire proliferatie en angiogenese, die nauw de spiegelbiologische processen van menselijke wondgenezing. Terwijl die consistentie en verzorging, dit muizenmodel niet om ingewikkelde chirurgische technieken en maakt de robuuste testen van veelbelovende middelen die kunnen bijvoorbeeld angiogenese bevorderen of ontstekingsremmende. Bovendien, elke muis fungeert als eigen controle als twee wonden worden bereid, zodat de toepassing van zowel de testverbinding en controle voertuig op hetzelfde dier. Concluderend demonstreren we een praktische, eenvoudig te leren en robuuste uitvoering van wondgenezing, vergelijkbaar met die van mensen.
Inleiding
Verstoorde wondgenezing is verantwoordelijk voor aanzienlijke morbiditeit en mortaliteit, dit geldt met name voor patiënten van diabetes mellitus 1,2. Bij mensen wondgenezing een continuüm van processen, waarbij er een aanzienlijke overlapping 3. Onmiddellijk na verwonding, inflammatoire processen worden geïnitieerd. Ontstekingscellen vrij factoren die de processen van celproliferatie, migratie en angiogenese stimuleren. Na re-epithelialisatie en nieuwvorming weefsel er een fase van remodeling dat zowel apoptose en reorganisatie van matrix eiwitten zoals collageen meebrengt.
De complexiteit van de wondheling kan mome....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
1. Voorbereiding van Spalken en afsluitend verband
- Schetsen 10 mm cirkels op 0,5 mm dik siliconen lakens en gebruik een schaar of een biopsie punch aan siliconen schijven maken.
- Centre een 5 mm punch biopsie in het midden van de 10 mm cirkel en druk stevig een gat om een "donut" vorm-achtige schijf die wordt gebruikt als een spalk maken.
- Schetsen 10 mm cirkels op een transparante afsluitend verband, zoals Opsite en gebruik een schaar om circulaire verbanden te creëren.
2. Proefdieren
- Verkrijgen Dier Ethische Commissie goedkeuring voor alle experimenten die zullen worden uitgevoerd.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Wondsluitingstelsel curve wordt bepaald door de gemiddelde diameter van de wond en het uitdrukken van de resultaten als een percentage, dat wil zeggen 100 - (Dag 0 diameter / dag X diameter). In dit experiment een therapeutische verbinding (of voertuig controle) werd dagelijks aangebracht op de wond. De therapeutische verbinding sterk versneld wonden (figuur 3). Het is belangrijk op te merken dat de spalken moet worden gehandhaafd gedurende de duur van het experiment, het verwijderen van spalke.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Dit is een experimenteel muizenmodel van cutane wondgenezing. Een belangrijk kenmerk van dit model is het gebruik van siliconen spalken voorkomen wondcontractie zodat re-epithelialisatie en nieuwvorming weefsel optreden, zodat het op het proces dat plaatsvindt in mensen. Dit model is veelzijdig en kan worden gebruikt om wondheling in zowel fysiologische en pathofysiologische (bijvoorbeeld diabetes mellitus) waarden te beoordelen. Het model kan ook worden gebruikt om potentiële wondgenezing of angiogenese therap.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
De auteurs willen graag om de financiering te erkennen dat zij steun van de National Health en Medical Research Council (NHMRC) van Australië (Project Grant ID: 632512). Louise Dunn werd ondersteund door een NHMRC Early Career Fellowship en Christina Bursill door een National Heart Foundation Career Development Fellowship.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Press-to-seal siliconen afdichtingsfolie 0,5 mm dik | Invitrogen | P18178 | Snijden in "donuts" met een externe diameter van 1 cm, interne diameter van 0,5 cm |
| Biopsie punch 5 mm | Steifel | BC-B1-0500 | Om het te verwijderen gebied van de wond af te bakenen |
| Vannas schaar 8,5 cm gebogen | World Precision Instruments | 501232 | Voor wond incisie en excisie |
| Dumonte #7b pincet, 11 cm | World Precision Instruments | 501302 | Om de huid vast te grijpen bij het maken van een incisie en het excideren van de huid |
| Graefe pincet, gekarteld 10 cm | World Precision Instruments | 14142 | Om te helpen de siliconensplint aan de huid te bevestigen |
| Naaldhouder, gladde kaken, gebogen, 12,5 cm | World Precision Instruments | 14132 | |
| Malis pincet, glad, recht, 12 cm | Codman and Shurtleff, Inc (J&J) | 80-1500 | Om de siliconenringen aan de huid te naaien |
| Linial, 0,5 mm indeling | n/a | ||
| Callipers 0,25 mm indeling | Duckworth and Kent | 9-653 | Om de wondoppervlakte te meten |
| Opsite FlexiFix transparante zelfklevende film. 10 cm x 1 m | Smith & Nephew | 66030570 | |
| Rimadyl (Carprofen) | Pfizer | 462986 |
Referenties
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
- Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).
- ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
