Name: Cutane leishmaniasis in het dorsale huid van Hamsters: een bruikbaar model voor de screening van antileishmaniale Drugs (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 36 s
Description: Leer een geoptimaliseerd hamstermodel voor cutane leishmaniasis via intradermale inoculatie van Leishmania promastigoten. Deze methode verbetert letselkarakterisatie en behandelingsapplicatie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie werd ondersteund door subsidies van het Comite voor Onderzoek van de Universiteit van Antioquia (Codi), De Colombiaanse Instituut voor de Ontwikkeling van Wetenschap en Technologie - COLCIENCIAS en het Centrum voor de Ontwikkeling van producten tegen tropische ziekten - CIDEPRO.

<ol><li>WHO. Control of the leishmaniasis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Report+of+a+Meeting+of+the+WHO+Expert+Committee+on+the+Control+of+Leishmaniasis+WHO%22">Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO</a>. 949, (2010).</li>
<li>Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+limiting+dilution+assay+for+quantifying+Leishmania+major+in+tissues+of+infected+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice.</a> Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).</li>
<li>Reynolds, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Kodak+Ektachem+dry+layer+technology+for+clinical+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Upsala.+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry.</a> Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).</li>
<li>Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cutaneous+leishmaniasis%3A+disease+patterns+in+intact+and+nude+mice+of+various+genotypes+and+examination+of+some+differences+between+normal+and+infected+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Australian+J.+Exp.+Biol.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages.</a> Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).</li>
<li>Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis+lesions+and+relationship+of+numbers+of+amastigotes+to+lesion+area+antimony-treated+and+untreated+hamsters%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters.</a> J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).</li>
<li>Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+toxicity+of+pentavalentantimonials+%28Glucantime+and+Pentostam%29+in+an+American+cutaneous+leishmaniasis+animal+model%3A+luminometry+application%5BTitle%5D)+AND+%22Biom%C3%A9dica%22%5BJournal%5D)">Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application.</a> Biomédica. 24, 393-402 (2004).</li>
<li>Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimonial+treatment+of+hamsters+infected+with+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis%3A+assessment+of+parasitological+cure+with+different+therapeutic+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Trans.+R.+Soc.+Trop.+Med.+Hyg%22%5BJournal%5D)">Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules.</a> Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).</li>
<li>Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+for+leishmaniasis+and+for+testing+anti-leishmanial+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Trop.+Med.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines.</a> Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inflammatory+response+promotes+cutaneous+metastasis+in+hamsters+infected+with+Leishmania+%28Viannia%29+panamensis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis.</a> J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+Albendazole+as+an+alternative+treatment+of+cutaneous+Leishmaniasis+in+the+hamster+model%5BTitle%5D)+AND+%22Memorias+Instituto+Oswaldo%22%5BJournal%5D)">Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model.</a> Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515(1998).</li>
<li>Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+is+a+major+determinant+of+the+clinical+evolution+and+immune+response+in+hamsters+infected+with+Leishmania+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp.</a> Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).</li>
<li>Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+site+of+cutaneous+infection+influences+the+immunological+response+and+clinical+outcome+of+hamsters+infected+with+Leishmania+panamensis%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis.</a> Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).</li>
<li>Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+enhances+the+innate+immune+response+in+experimental+cutaneous+leishmaniasis+through+hormone-modulated+nitric+oxide+production%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Leukoc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production.</a> J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).</li>
<li>Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duplex+real-time+reverse+transcriptase+PCR+to+determine+cytokine+mRNA+expression+in+a+hamster+model+of+New+World+cutaneous+leishmaniasis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Immunol%22%5BJournal%5D)">Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis.</a> BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).</li>
</ol>

Geen belangenconflicten verklaard.

Cutane leishmaniasis is endemisch in de tropen en Neotropen. Het wordt vaak genoemd als een groep van ziekten als gevolg van de gevarieerde spectrum van klinische verschijnselen, die variëren van kleine cutane noduli en het bruto slijmvliesweefsel vernietiging. De meeste beschikbare geneesmiddelen duur zijn, vereisen lange behandelingen en worden steeds effectief is, noopt de ontdekking van nieuwe geneesmiddelen. De muismodel wordt algemeen gebruikt, maar heeft enkele nadelen. Zo bijvoorbeel...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het serum </td><td> Type </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td></tr><tr><td> Ketamine </td><td> Reagens </td><td> Holliday-Scott SA </td><td></td></tr><tr><td> Xilacine </td><td> Reagens </td><td> Synthese </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td> Reagens </td><td> GIBCO </td><td> 14190-136 </td></tr><tr><td> Digitale schuifmaat </td><td> Uitrusting </td><td> Visser </td><td> 15-077-958 </td></tr><tr><td> Giemsa </td><td> Reagens </td><td> SIGMA </td><td> GS1L-1L </td></tr><tr><td> Formaline </td><td> Reagens </td><td> Nova lab </td><td> 11273 </td></tr><tr><td> Paraffine </td><td> Reagens </td><td> Pechiney Plastic Verpakkingen </td><td> PM-996 </td></tr><tr><td> Haemotoxilin </td><td> Reagens </td><td> Nova lab </td><td&gt; 10870103 </td></tr><tr><td> Eosine </td><td></td><td> Nova lab </td><td> 10870203 </td></tr><tr><td> Kodak Ektachem droge chemie </td><td> Uitrusting </td><td> Kodak Ektachem </td><td> DT-60 </td></tr><tr><td> meglumine antimoniate </td><td> Reagens </td><td> Aventis </td><td></td></tr><tr><td> Microscopie </td><td> Uitrusting </td><td> Nikon </td><td> YS2-T </td></tr></tbody></table>

cutane leishmaniasis in het dorsale huid van hamsters: een bruikbaar model voor de screening van antileishmaniale drugs

Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs

Traditioneel worden hamsters experimenteel geïnfecteerd in de snuit of de voetzool. Maar in deze sites niet een zweer altijd optreedt, meting van de laesie grootte is een harde procedure en dieren tonen moeite om te eten, ademen en bewegen vanwege de laesie. Om de hamster model cutane leishmaniasis, jonge volwassen mannelijke en vrouwelijke goudhamsters optimaliseren (Mesocricetus auratus) werden geïnjecteerd aan de dorsale huid met 1 tot 1,5 x l0 7 promastigoten van Leishmania soorten en progressie latere lesies werden geëvalueerd tot 16 weken na infectie. De gouden hamster is gekozen omdat het wordt beschouwd als een adequate bio-model om geneesmiddelen te evalueren tegen Leishmania zoals ze zijn gevoelig voor infectie door verschillende soorten. Cutane infectie van hamsters resulteert in een chronische, maar gecontroleerde laesies, en een klinische evolutie met borden vergelijkbaar met die waargenomen bij de mens. Daarom is de oprichting of de mate van infectie door het meten van de laesie volgens het gebied van verharding en zweren mogelijk is. Deze aanpak heeft zijn veelzijdigheid en eenvoudig beheer bewezen tijdens de inoculatie, follow-up en karakterisering van typische laesies (ulcera), toepassing van behandelingen door middel van verschillende manieren en het verkrijgen van klinische monsters na verschillende behandelingen. Door het gebruik van deze methode de kwaliteit van het dierlijk leven ten aanzien van bewegen, op zoek naar voedsel en water, spel en sociale activiteiten isalso behouden.

Optimalisatie van de experimentele hamster model voor cutane leishmaniasis door intradermale injectie van<em&gt; Leishmania</em&gt; Promastigoten aan de dorsale huid. Deze aanpak is nuttig tijdens inenting, follow-up, karakterisering van de laesies, toepassing van behandelingen en het verkrijgen van klinische monsters. Locomotion, op zoek naar voedsel en water, zijn spel en sociale activiteiten behouden.

Cutane leishmaniasis in het dorsale huid van Hamsters: een bruikbaar model voor de screening van antileishmaniale Drugs

Traditioneel worden hamsters experimenteel geïnoculeerd in de snuit of het voetzoolkussentje. Echter ontstaat er op deze locaties niet altijd een zweer, waardoor de meting van...

Om het hamstermodel voor cutane leishmaniasis te optimaliseren, beschrijven we hier een aanpak waarbij gebruik wordt gemaakt van een intradermale inoculatie van promastigoten in de dorsale huid. Deze aanpak heeft haar veelzijdigheid en eenvoudige beheersbaarheid bewezen bij de inoculatie, de follow-up en karakterisering van typische laesies, de toepassing van behandelingen via verschillende wegen, het verkrijgen van paraclinische monsters en het verzamelen van gegevens over verschillende veelbelovende verbindingen, zonder dat dit een significante verslechtering van de levenskwaliteit van het model betekent.Wat betreft voortbeweging, het zoeken naar voedsel en water en sociale activiteit met voorzichtige, zekere en gestage bewegingen, moet het dier bij de basis van de nek met de vingers worden vastgehouden, waarbij gebruik wordt gemaakt van de grote hoeveelheid huid die de hamster heeft. De handpalm wordt gebruikt om het dier een ondersteunend oppervlak te bieden waarin het zich comfortabel voelt. Zodra het dier ontspannen is, kan de huid van de nek en de wangzakken met de wijsvinger en duim worden uitgerekt, terwijl met de overige vingers de huid van de zak stevig tegen de palm wordt vastgehouden, zodat het dier volledig is geïmmobiliseerd.Een kenmerkend aspect bij het vrouwtje is de visualisatie van de Mi Mary-lijn, die vanaf de eerste levensweek duidelijk zichtbaar is. Een ander kenmerk is de korte anogenitale afstand. Voor wat betreft de geslachtsbepaling bij het mannetje kan de eekhoornsak (squirrel sac) met daarin de testikels worden waargenomen.Daarnaast en als gevolg hiervan is er een grotere afstand tussen de anus en de huid. Het dier wordt vastgepakt door de basis van de nek stevig vast te houden en het in een klem of doos te plaatsen die op een weegschaal is geconditioneerd, welke vooraf is gekalibreerd na enkele seconden. Wanneer het dier rustig is in deze ruimte, wordt het gewicht afgelezen en onmiddellijk in het juiste formaat geregistreerd.De meest gebruikte methoden voor de identificatie van hamsters zijn het kleuren van een huidareaal met picrinezuur en het doorsteken van het oor voor het kleuren. Bij gebruik van picrinezuur verloopt de procedure als volgt: houd het dier vast zoals eerder beschreven en breng met een in picrinezuur gedrenkt wattenstaafje het gebied aan dat gemarkeerd moet worden — gewoonlijk de linker- of rechter voor- of achterpoot — met een hoeveelheid die voldoende is om te garanderen dat de markering tot het einde van de test standhoudt. Voor deze identificatiemethode wordt aanbevolen om het dier onder sedatie of anesthesie te hebben.Hoewel het niet strikt noodzakelijk is, wordt de U-tag geselecteerd en gedesinfecteerd met alcohol. Daarna wordt het te perforeren gebied gekozen, waarbij de regio met bloedvaten wordt vermeden. Vervolgens wordt het oor doorboord met een oorpunch voor knaagdieren; de procedure moet snel, maar op een stevige en veilige manier worden uitgevoerd.Er moeten twee tot drie dieren in een kooi verblijven. Er kunnen tot twee gaatjes per jaar worden gemaakt. Om het anestheticum bij het dier toe te dienen, dient het dier zoals in het begin beschreven te worden vastgehouden, op een manier die beweging van de hamster voorkomt.In rugligging wordt het abdominale gebied waar het drug zal worden toegediend gedesinfecteerd met 70% alcohol en gedroogd met een schoon wattenstaafje. Er wordt gebruikgemaakt van de intraperitoneale route, waarbij het dier licht richting de kop is gekanteld zodat viscerale verplaatsing optreedt. De naald wordt volledig en enigszins parallel aan de ruggengraat ingebracht.Er wordt een initiële aspiratie uitgevoerd om te bevestigen dat er geen organen zijn gepuncteerd, waarna het middel wordt aangebracht om het huidgebied van het dier te scheren dat geïnoculeerd moet worden. In een verbeterde positie wordt een punt gemarkeerd op twee centimeter van de basis van de staart. Met behulp van een schaar wordt al het haar verwijderd, waarbij voorzichtig een gebied van ongeveer twee vierkante centimeter wordt vrijgemaakt om letsel te voorkomen in een biologische veiligheidskabinet, en terwijl de hamster is geanestheseerd, worden met een injectiespuit van 1 ml 100 µL van de bekende hoeveelheid in de logaritmische fase toegediend.De leishmania-muis wordt klaargezet. De naald moet als voorzorgsmaatregel om ongelukken te voorkomen stevig op de spuit worden bevestigd. Watten met een steriele zoutoplossing worden gebruikt om het geschoren gebied van het dier in één richting te reinigen.Vervolgens wordt de huid van de hamster doorboord met het schuine uiteinde van de naald naar boven gericht, waarbij men erop let dat de naald langzaam en geleidelijk de subdermis binnendringt. Het inoculum wordt geïnjecteerd om een subdermale papule te vormen; om de naald te verwijderen, wordt deze licht gedraaid en eruit getrokken. Al het gebruikte materiaal wordt weggegooid.In overeenstemming met de biosecurity-normen voor het monitoren van huidlaesies veroorzaakt door leishmania, wordt aanbevolen om het dier aanvankelijk in een val te immobiliseren om het proces te vergemakkelijken voor een nauwkeurige meting van een laesie. Er wordt palpatie van het geinoculeerde huidgebied uitgevoerd om de induratie en het gevormde zweergebied af te bakenen; met behulp van een digitale schuifmaat wordt de breedte van de zweer gemeten en de meting in millimeters vastgelegd in een voor klinische monitoring ontworpen formaat. Op dezelfde wijze wordt de lengte van de zweer gemeten, welke eveneens geregistreerd moet worden na de subdermale inoculatie.Er is een wachttijd van vier tot vijf weken om typische laesies te verkrijgen die vergelijkbaar zijn met die welke worden gepresenteerd. Bij mensen. Het dier wordt geïmmobiliseerd in een speciaal frame waarmee de rug, waar de laesie zich bevindt, kan worden blootgesteld.Met een pipet wordt de verbinding op de wond aangebracht en wordt de vloeistof aan de lucht gedroogd voordat het dier terug in de kooi wordt geplaatst. Terwijl het dier stevig is vastgezet zoals hierboven geïllustreerd, wordt de meest vaardige hand gebruikt om het gebied in één richting te desinfecteren met alcohol en watten. Vervolgens wordt dezelfde hand gebruikt om de spuit te hanteren die het te gebruiken geneesmiddel bevat in een maximaal volume van 200 µL.Het geneesmiddel wordt geïnjecteerd via de musculus semitendinosus of de musculus semimembranosus van de achterhand. Indien het middel gedurende meerdere dagen moet worden toegediend, dient men af te wisselen van ledemaat om ongemak en weefselbeschadiging bij het dier te voorkomen. Met een minder bekwame hand wordt het dier vastgezet zoals eerder aangegeven. De andere hand wordt gebruikt om de maagsonde te manipuleren.14 garage die is verbonden met een spuit van één milliliter om comfortabel een hoeveelheid van niet meer dan 200 microliters toe te dienen. De hamster is stevig vastgezet met een immobilisatieapparaat waarbij het te behandelen gebied is blootgelegd, welke wordt gereinigd met steriel watten en een zoutoplossing met één enkele veeg in één richting met een spuit van één milliliter, de schuine zijde naar beneden en een volume van niet meer dan 100 microliters, een enkele subdermale benadering via een vertex van de laesies wordt uitgevoerd en geleidelijk wordt het geneesmiddel afgezet, waarbij het gehele gebied van de laesie wordt bedekt voorafgaand aan de euthanasie. De dieren worden geanestheseerd zoals eerder beschreven voor het euthanasieproces.De hamster wordt in een afgesloten acrylkamer geplaatst die is verbonden met een cilinder of een netwerk van koolstofdioxide. Het ventiel wordt gedurende enkele minuten langzaam geopend om de geëuthanaseerde hamsters te bemonsteren, die zijn vastgezet op een dissectievlak. Glasplaatjes zijn nodig voor afdrukken van de huid en interne organen.15 milliliter falcon-buisjes met 10%formaline voor histopathologische monsters; het materiaal omvat dissectieset, schaar, pincet, scalpel, houder en mesjes. Tot slot wordt de aanwezigheid van leishmania in monsters van huidlaesies of littekens, lever, milt, nier en poplitale lymfeklieren direct vastgesteld door het onderzoeken van met giemsa gekleurde uitstrijkjes en histopathologisch onderzoek van deze weefsels. Een biopsiepreparaat wordt gefixeerd in 10%formaline en ingebed in paraffine.Vijf micron dikke coupes van het gefixeerde weefsel werden gekleurd met hematoxyline en eosine en onder een optische microscoop onderzocht met een 1000x olie-immersieobjectief. Hierbij werd gekeken naar de microarchitectuur, de kenmerken van het cellulair infiltraat en de aanwezigheid of afwezigheid van parasieten. Er zijn fotomicrografieën gemaakt en digitale beelden vastgelegd.Alle materialen moeten worden afgevoerd volgens de biosafety-voorschriften voor de verwijdering van biologisch afval. De gouden hamster Mi is bijzonder nuttig gebleken voor het bestuderen van cutane laesies veroorzaakt door zowel Oude- als Nieuwe-Wereld-Leishmania-soorten. Inoculatie met promastigoten kan cutane laesies veroorzaken tussen één en twee maanden na inoculatie.De hamster vertoont een voorspelbaar ziekteverloop na experimentele infectie, gekenmerkt door de ontwikkeling van laesies die vergelijkbaar zijn met die bij mensen. Vanwege het chronische karakter van cutane laesies in het hamstermodel is monitoring van therapeutische interventies over langere perioden mogelijk. Traditioneel worden hamsters experimenteel geïnoculeerd in de snuit of de voetkussentjes, maar op deze locaties ontstaan niet altijd knobbels. Bovendien is het meten van de grootte van de laesies moeilijk en ondervinden de hamsters problemen bij het eten, ademhalen en bewegen.Samenvattend laat deze aanpak zien dat de klinisch-pathologische kenmerken van cutane leishmaniasis, geïnduceerd in de rughuid van hamsters, opmerkelijk veel lijken op de menselijke ziekte, maar sterk verschillen van het veelgebruikte mariene model. De experimentele infectie in de rughuid van hamsters vormt daarom een nuttig model om het potentieel van verbindingen die kandidaten zijn voor nieuwe geneesmiddelen tegen leishmaniasis te valideren.

cutaneous-leishmaniasis-dorsal-skin-hamsters-useful-model-for

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Een in vivo beeldvormingssysteem wordt gebruikt om kwantitatieve metingen te genereren van muisinfecties met de Trypanosomatide protozoa Leishmania. Dit is een niet-invasieve en niet-lethale methode voor het detecteren van parasieten die luciferase tot expressie brengen in diverse weefsels gedurende het verloop van een chronische Leishmania spp. infectie.

In vivo imaging van transgene Leishmania parasieten in een Live Host

Een parasiet-rescue en transformatie test met geïnfecteerde cellen...

Een Parasiet Rescue and Transformation Assay voor antileishmania Screening tegen intracellulaire<em&gt; Leishmania donovani</em&gt; Amastigoten in THP1 Human acute monocytische leukemiecellijn

Dit artikel beschrijft een gedetailleerde methode voor de dynamische meting en kwantificering van bloedstroomsnelheid binnen individuele bloedvaten van de muizenlevervaten met behulp van intravitale microscopie-beeldvorming in combinatie met een specifieke methodologie voor beeldverwerving en analyse.

Intravitale Microscopie Imaging van de lever volgende<em&gt; Leishmania</em&gt; Infectie: een beoordeling van de lever Hemodynamica

Hier presenteren we een samengesteld protocol om de cutane infectie van muizen met Leishmania amazonensiste evalueren. Dit is een betrouwbare methode voor het bestuderen van parasietvirulentie, waardoor een systemische weergave van de gewervelde gastheer respons op de infectie.

In Vivo Infectie met Leishmania amazonensis om parasiet virultie in muizen te evalueren

Hier beschrijven we de methodologie die wordt gebruikt voor het genereren van L. panamensis - en L. donovani-stammen die het gen voor eGFP tot expressie brengen als een stabiel geïntegreerd transgen met behulp van het pLEXSY-systeem. Getransfecteerde parasieten werden gekloond door verdunning te beperken en klonen met de hoogste fluorescentie-intensiteit in beide soorten werden geselecteerd voor verder gebruik in medicijnscreeningtests.

Ontwikkeling van Leishmania-soortenstammen met constitutieve expressie van eGFP

Hier presenteren we een longitudinale evaluatie van goudhamsters die intraperitoneaal (IP) of via intragingivaal (IG) zijn geïnfecteerd met L. infantum-Luc door middel van bioluminescente beeldvorming en door PCR. Hamsters werden 1 dag na infectie (1 dpi), 1 week na infectie (8 dpi) en 3 weken na infectie (22 dpi) geëvalueerd en geëuthanaseerd op de 50edpi en 8 maanden na infectie.

In vivo Beeldvorming van met Leishmania infantum geïnfecteerde hamsters door gingiva-inoculatie van axenische amastigoten die luciferase tot expressie brengen

Murine beenmergtransplantatie is een veel gebruikte techniek om immunologische mechanismen voor graft-versus-host ziekte bij mensen bestuderen. De mogelijkheid om T-cel mensenhandel patronen te...

Inductie van Graft-versus-host ziekte en<em&gt; In Vivo</em&gt; T-cel monitoren door gebruik van een MHC-matched muizenmodel

Een nieuwe methode gerichte evolutie eigen aan de thermostabiliteit van techniek is ontwikkeld en dus gevalideerd voor bacteriolytische enzymen. Na een ronde van willekeurige mutagenese, een geëvolueerd bacteriolytische enzym PlyC 29C3, weergegeven groter is dan tweemaal de restactiviteit in vergelijking met het wild-type eiwit na incubatie verhoogde temperatuur.

Een nieuwe screeningsmethode voor de gerichte evolutie van thermostabiele Bacteriolytic Enzymen

Virus-geïnduceerde gene silencing is een nuttig hulpmiddel voor het identificeren van genen betrokken bij nonhost resistentie van planten. We demonstreren het gebruik van bacteriële pathogenen tot expressie GFPuv het identificeren gen zwijgen planten vatbaar voor nonhost pathogenen. Deze benadering is eenvoudig, snel en faciliteert grootschalige screening en soortgelijk protocol kan worden toegepast op het bestuderen van verschillende andere planten-microbe interacties.

VIGS-Mediated Forward Genetics Screening voor de identificatie van genen betrokken bij Nonhost Resistance

Dit protocol beschrijft de visualisatie van de ontwikkeling van biofilms na blootstelling aan gastfactoren met behulp van een glijkamermodel. Dit model maakt directe visualisatie van de ontwikkeling van biofilms mogelijk, evenals analyse van biofilmparameters met behulp van computersoftwareprogramma's.

Het visualiseren van de effecten van het sputum op biofilm ontwikkeling met behulp van een chambered dekglaasje Model

Leer een geoptimaliseerd hamstermodel voor cutane leishmaniasis via intradermale inoculatie van Leishmania promastigoten. Deze methode verbetert letselkarakterisatie en behandelingsapplicatie.

Cutane leishmaniasis in het dorsale huid van Hamsters: een bruikbaar model voor de screening van antileishmaniale Drugs

Meer video's verkennen