Orgaan Ischemia-Reperfusie Letsel door het simuleren van hemodynamische veranderingen in rat levertransplantatie model

Orgaanischemie-reperfusie letsel door het simuleren van hemodynamische veranderingen in rat lever transplantatie model. Ischemia-reperfusie letsel is een veel voorkomende toepassing na levertransplantatie. Patiënten met extrahepatische orgaanbetrokkenheid blijven meestal langer in het ziekenhuis, geven meer uit en hebben een slechtere prognose.

De ontwikkeling van de complicatie hangt nauw samen met de lengte van de anhepatische fase van levertransplantatie. Fundamenteel onderzoek naar de ischemie-reperfusieletsel na levertransplantatie heeft echter aangetoond dat de overlevingskans na levertransplantatie omgekeerd gerelateerd is aan de mate van letsel aan extrahaptische organen. Op basis van de definitie van de anhaptische fase simuleerden we de hemodynamische verandering in levertransplantatie die resulteerde in ischemie-reperfusieletsel van extrahaptische organen.

Van dit artikel is om een gedetailleerde beschrijving te geven van hoe een diermodel van de anhaptische fase bij ratten te bouwen, fundamenteel onderzoek naar de ischemie-reperfusieletsel na levertransplantatie. Dr. Yuan Yuan is verantwoordelijk voor alle video dieren operaties. Twee oogheelkundige tangen, recht en buigend, en interoculaire lens, IOL-tang, oftalmische schaar, één tot twee oprolmechanismen, wattenstaafjes, 3-0 chirurgische hechtingen, iodoform gaas, hechtnaalden, Biosystemen indien nodig en interoculaire lens, IOL-tang wordt gebruikt om bloedvaten te scheiden vanwege ronde koppen.

Dierlijke anesthesie machine, ontwateringsmachine, inbeddingsmachine, pathologische snijmachine, bevroren machine, weefselsnijmachine, luchtdroogoven, neurale optische microscoop, de scanner, enfluraan voor algemene anesthesie, 4% paraformaldehydeoplossing, anyhydreuze ethanol, xyleen, hoogrenderende paraffinewas, hematoxyline-eosinekleurstofoplossing, zoutzuur, ammoniak, dia, afdekglas, neutrale gom en stervende reagentia en verbruiksmaterialen. Pipetten, centrifuge, automatische biochemische analysator, alanine amino transferase, ALT kit, aspartaat, amino transferase, AST kit, creatinine kit. Na het wegen worden de ratten verdoofd met isofluraan door een dierenanesthesiemachine.

Maak na abdominale desinfectie een mediane incisie van drie centimeter onder het xiphoid-proces met behulp van een tang en een schaar. Open de buikholte, stel de lever bloot met behulp van een oprolmechanisme en mobiliseer het hepatogastrische ligament. Gebruik wattenstaafjes om de middelste kwab van de lever voorzichtig om te draaien en draai deze naar boven om de porta habitis bloot te leggen.

Identificeer het galkanaal, de poortader en de leverslagader. Duw de dunne darm naar de linker onderbuikholte met behulp van katoenen swaps en verplaats de inferieure vena cava naar de rechter nierader, isoleer de poortader, leverslagader en de inferieure vena cava boven de rechter nierader met een intraoculaire lens, IOL, tang gemarkeerd met 3-0 zijden draad elk met een slipknoop. Snijd de huid van de linker- en rechter onderste extremiteit open en stel de femurader bloot met behulp van oogheelkundige tang.

Injecteer langzaam heparine met een laag molecuulgewicht 625 IE/kg door de femurader om het hele lichaam te hepariniseren. Ligate de poortader, leverslagader en inferieure vena cava boven de rechter nierader met nummer 3-0 hechtingen, die 45 minuten duren. Vervang de dunne darm in de buikholte en bedek deze met gaas.

Inademingsanesthesie wordt tijdens deze periodes verminderd. Laat na 45 minuten de poortader, de leverslagader en de inferieure vena cava boven de rechter nierader los. Hecht de spier en de huid laag voor laag en beëindig de inhalatie-anesthesie.

Zorg voor postoperatieve analgesie met subcutane morfine van 5 mg/kg om de vier uur Observeer de rat tot hij wakker is en blijf gevoed onder een temperatuur van 25 plus of min twee graden Celsius en vochtigheid van 50 plus of min 10%Dierlijke verwarmingslampen zijn noodzakelijk. In dit diermodel werden de ratten willekeurig verdeeld in vijf groepen volgens ischemie gedurende 15 minuten, ik 15 groep, 30 minuten, ik 30 groep, 45 minuten, ik 45 groep, 60 minuten, ik 60, en een schijngroep met 10 ratten in elke groep. Hun overlevingskans van elke groep werd 14 dagen na de operatie waargenomen.

Alle ratten overleefden in de I 15, I 30 en schijngroepen. Acht overleefden 14 dagen in de I 45-groep en slechts twee overleefden in de I 60-groep. De resultaten suggereerden dat de ratten de anhepatische fase hooguit 45 minuten konden verdragen.

Tijdens het experiment werd Biosystems gebruikt om de veranderingen van hartslag en bloeddruk vast te leggen, rechter interne carotisslagaderintubatie voor en na de anhepatische fase. We ontdekten dat de hartslag en gemiddelde arteriële druk, MAP van ratten, drastisch veranderden na vasculaire ligatie. Na ligatie waren leverischemie, congestie en oedeem in de darmen, maagvariëteiten en splenomegalie duidelijk.

80 ratten werden willekeurig verdeeld in acht groepen, waaronder ischemie gedurende 45 minuten, T0, reperfusie gedurende zes uur, T6, 12 uur, T12, 24 uur, T24, 48 uur, T48, 72 uur, T72, zeven dagen, T7, in respectievelijk 14 dagen, T14. De nieren, alvleesklier, dunne darm, hart- en longweefsels werden meegenomen en bevlekt met HE nadat ratten waren geofferd. Behalve het hart werden pathologische scores gegeven op basis van respectievelijk verwijzingen.

De resultaten toonden aan dat de tijd van maximale verwonding van de extrahepatische organen varieerde. Het was zes tot 24 uur na de operatie voor de alvleesklier en 24 tot 48 uur voor de longen. Het darmkanaal en de nieren raakten het zwaarst gewond na 45 minuten ischemie.

Er was 24 uur na de operatie geen duidelijke afwijking van het darmslijmvlies en de nieren herstelden zich na 48 uur. Wat het hart betreft, met het verstrijken van de tijd na reperfusie, werden lokale myocardcelnarcose, celfragmentatie en -ontbinding, inflammatoire celinfiltratie en lokale vasodilatatie en congestie 24 tot 48 uur na de operatie in het weefsel gevonden. Serum werd verzameld en de niveaus van ALT, AST, creatinine en amylase werden gedetecteerd door een automatische biochemische analysator.

Alle indicatoren piekten op 24 tot 48 uur, in tegenstelling tot de pathologische veranderingen. Hoewel de niveaus 48 uur na de operatie in principe normaal waren, bleef de pathologische schade aanhouden. Kortom, het model bij ratten is eenvoudig en gemakkelijker te gebruiken zonder microchirurgie en biedt basis voor fundamenteel onderzoek naar de ischemie-reperfusieletsel van extrahepatische organen na leverischemie.