Name: Glucose-gestimuleerde insulinesecretie via perfusie door het vaatstelsel van muizen met een intacte alvleesklier (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T12:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 41 s
Description: Leer glucose-gestimuleerde insulinesecretie via perfusie door het vaatstelsel van muizen met een intacte alvleesklier. Deze methode behoudt het microklimaat voor nauwkeuriger onderzoek naar pancreasfunctie en diabetesbehandelingen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Rosenberg, L., Wang, R., Paraskevas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+changes+resulting+from+islet+isolation+lead+to+islet+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Structural and functional changes resulting from islet isolation lead to islet cell death.</a> Surgery. 126 (2), 393-398 (1999).</li>
<li>Paraskevas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+occurs+in+freshly+isolated+human+islets+under+standard+culture+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Apoptosis occurs in freshly isolated human islets under standard culture conditions.</a> Transplant Proc. 29 (1-2), 750-752 (1997).</li>
<li>Bottino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+of+human+islets+to+isolation+stress+and+the+effect+of+antioxidant+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Response of human islets to isolation stress and the effect of antioxidant treatment.</a> Diabetes. 53 (10), 2559-2568 (2004).</li>
<li>Burganova, G., Bridges, C., Thorn, P., Landsman, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vascular+cells+in+pancreatic+beta-cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">The role of vascular cells in pancreatic beta-cell function.</a> Front Endocrinol. 12, 667170(2021).</li>
<li>Jansson, L., Carlsson, P. -O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft+vascular+function+after+transplantation+of+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Graft vascular function after transplantation of pancreatic islets.</a> Diabetologia. 45 (6), 749-763 (2002).</li>
<li>Leibiger, I. B., Berggren, P. -O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraocular+in+vivo+imaging+of+pancreatic+islet+cell+physiology%2Fpathology%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Metab%22%5BJournal%5D)">Intraocular in vivo imaging of pancreatic islet cell physiology/pathology.</a> Mol Metab. 6 (9), 1002-1009 (2017).</li>
<li>Weir, G. C., Atkins, R. F., Martin, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucagon+secretion+from+the+perfused+rat+pancreas+following+acute+and+chronic+streptozotocin%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolism%22%5BJournal%5D)">Glucagon secretion from the perfused rat pancreas following acute and chronic streptozotocin.</a> Metabolism. 25 (11 Suppl), 1519-1521 (1976).</li>
<li>Pisania, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+analysis+of+cell+composition+and+purity+of+human+pancreatic+islet+preparations%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Quantitative analysis of cell composition and purity of human pancreatic islet preparations.</a> Lab Invest. 90 (11), 1661-1675 (2010).</li>
<li>Weir, G. C., Leahy, J. L., Braunstein, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+insulin+and+glucagon+release+from+the+perfused+pancreas%2C+intact+isolated+islets%2C+and+dispersed+islet+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Res%22%5BJournal%5D)">Characteristics of insulin and glucagon release from the perfused pancreas, intact isolated islets, and dispersed islet cells.</a> Horm Res. 24 (1), 62-72 (1986).</li>
<li>Fathi, I., Goto, M. Collagenases in Pancreatic Islet Isolation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFathi%2C+I+%22Transplantation%2C+Bioengineering%2C+and+Regeneration+of+the+Endocrine+Pancreas%22">Transplantation, Bioengineering, and Regeneration of the Endocrine Pancreas</a>. , Elsevier Academic Press. (2019).</li>
<li>Heiser, A., Ulrichs, K., Müller-Ruchholtz, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+porcine+pancreatic+islets%3A+low+trypsin+activity+during+the+isolation+procedure+guarantees+reproducible+high+islet+yields%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Lab+Anal%22%5BJournal%5D)">Isolation of porcine pancreatic islets: low trypsin activity during the isolation procedure guarantees reproducible high islet yields.</a> J Clin Lab Anal. 8 (6), 407-411 (1994).</li>
<li>Basir, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+outcome+of+pig+islet+isolation+by+Pefabloc+inhibition+of+trypsin%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Improved outcome of pig islet isolation by Pefabloc inhibition of trypsin.</a> Transplant Proc. 29 (4), 1939-1941 (1997).</li>
<li>White, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+study+of+the+activation+of+endogenous+pancreatic+exocrine+enzymes+during+automated+porcine+islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">A preliminary study of the activation of endogenous pancreatic exocrine enzymes during automated porcine islet isolation.</a> Cell Transplant. 8 (3), 265-276 (1999).</li>
<li>Lakey, J. R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serine-protease+inhibition+during+islet+isolation+increases+islet+yield+from+human+pancreases+with+prolonged+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Serine-protease inhibition during islet isolation increases islet yield from human pancreases with prolonged ischemia.</a> Transplantation. 72 (4), 565-570 (2001).</li>
<li>Rose, N. L., Palcic, M. M., Helms, L. M. H., Lakey, J. R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Pefabloc+as+a+serine+protease+inhibitor+during+human-islet+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Pefabloc as a serine protease inhibitor during human-islet isolation.</a> Transplantation. 75 (4), 462-466 (2003).</li>
<li>Cross, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagenase+penetrates+human+pancreatic+islets+following+standard+intraductal+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Collagenase penetrates human pancreatic islets following standard intraductal administration.</a> Transplantation. 86 (7), 907-911 (2008).</li>
<li>Balamurugan, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harmful+delayed+effects+of+exogenous+isolation+enzymes+on+isolated+human+islets%3A+relevance+to+clinical+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Harmful delayed effects of exogenous isolation enzymes on isolated human islets: relevance to clinical transplantation.</a> Am J Transplant. 5 (11), 2671-2681 (2005).</li>
<li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+analysis+of+islet+cells+in+vitro%2C+in+situ%2C+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Functional analysis of islet cells in vitro, in situ, and in vivo.</a> Semin Cell Dev Biol. 103, 14-19 (2020).</li>
<li>Marciniak, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+pancreas+tissue+slices+for+in+situ+studies+of+islet+of+Langerhans+and+acinar+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Using pancreas tissue slices for in situ studies of islet of Langerhans and acinar cell biology.</a> Nat Protoc. 9 (12), 2809-2822 (2014).</li>
<li>Cohrs, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bridging+the+gap%3A+pancreas+tissue+slices+from+organ+and+tissue+donors+for+the+study+of+diabetes+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Bridging the gap: pancreas tissue slices from organ and tissue donors for the study of diabetes pathogenesis.</a> Diabetes. 73 (1), 11-22 (2024).</li>
<li>Panzer, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreas+tissue+slices+from+organ+donors+enable+in+situ+analysis+of+type+1+diabetes+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Pancreas tissue slices from organ donors enable in situ analysis of type 1 diabetes pathogenesis.</a> JCI Insight. 5 (8), e134525(2020).</li>
<li>Wargent, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+insulin+secretion+using+pancreas+perfusion+in+the+rodent%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Measurement of insulin secretion using pancreas perfusion in the rodent.</a> Methods Mol Biol. 2076, 281-297 (2020).</li>
<li>Tamayo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte+control+of+blood+flow+in+intraocular+islet+grafts+impacts+glucose+homeostasis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Pericyte control of blood flow in intraocular islet grafts impacts glucose homeostasis in mice.</a> Diabetes. 71 (8), 1679-1693 (2022).</li>
<li>Yuan, L., Li, Y., Li, G., Song, Y., Gong, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ang%281-7%29+treatment+attenuates+%CE%B2-cell+dysfunction+by+improving+pancreatic+microcirculation+in+a+rat+model+of+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endocrinol+Invest%22%5BJournal%5D)">Ang(1-7) treatment attenuates β-cell dysfunction by improving pancreatic microcirculation in a rat model of type 2 diabetes.</a> J Endocrinol Invest. 36 (11), 931-937 (2013).</li>
<li>Carlsson, P. -O., Berne, C., Jansson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin+II+and+the+endocrine+pancreas%3A+effects+on+islet+blood+flow+and+insulin+secretion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Angiotensin II and the endocrine pancreas: effects on islet blood flow and insulin secretion in rats.</a> Diabetologia. 41 (2), 127-133 (1998).</li>
<li>Penhos, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+pancreas-small+gut+preparation+for+the+study+of+intestinal+factor%28s%29+and+insulin+release%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">A rat pancreas-small gut preparation for the study of intestinal factor(s) and insulin release.</a> Diabetes. 18 (11), 733-738 (1969).</li>
<li>Ma, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+insulin+secretion+between+the+rat+and+mouse%3A+role+of+cAMP%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Differences in insulin secretion between the rat and mouse: role of cAMP.</a> Eur J Endocrinol. 132 (3), 370-376 (1995).</li>
<li>Aynsley-Green, A., Biebuyck, J. F., Alberti, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthesia+and+insulin+secretion%3A+the+effects+of+diethyl+ether%2C+halothane%2C+pentobarbitone+sodium+and+ketamine+hydrochloride+on+intravenous+glucose+tolerance+and+insulin+secretion+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Anaesthesia and insulin secretion: the effects of diethyl ether, halothane, pentobarbitone sodium and ketamine hydrochloride on intravenous glucose tolerance and insulin secretion in the rat.</a> Diabetologia. 9 (4), 274-281 (1973).</li>
<li>Chen, H., Li, L., Xia, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+alters+the+blood+glucose+response+to+ketamine+in+streptozotocin-diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Diabetes alters the blood glucose response to ketamine in streptozotocin-diabetic rats.</a> Int J Clin Exp Med. 8 (7), 11347-11351 (2015).</li>
<li>Lehmann, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+ketamine+sedation+on+glucose+clearance%2C+insulin+secretion+and+counterregulatory+hormone+production+in+baboons+%28Papio+hamadryas%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Effects of ketamine sedation on glucose clearance, insulin secretion and counterregulatory hormone production in baboons (Papio hamadryas).</a> J Med Primatol. 26 (6), 312-321 (1997).</li>
<li>Sharif, S. I., Abouazra, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+intravenous+ketamine+administration+on+blood+glucose+levels+in+conscious+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pharm+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effect of intravenous ketamine administration on blood glucose levels in conscious rabbits.</a> Am J Pharm Toxicol. 4 (2), 38-45 (2009).</li>
<li>Komatsu, M., Takei, M., Ishii, H., Sato, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose-stimulated+insulin+secretion%3A+a+newer+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22J+Diabetes+Investig%22%5BJournal%5D)">Glucose-stimulated insulin secretion: a newer perspective.</a> J Diabetes Investig. 4 (6), 511-516 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Fiber membrane oxygenator</td><td>Harvard Apparatus</td><td>73-3757</td><td>Laat zuurstof toe om het perfusaatop te gaan nemen</td></tr><tr><td>Verwarmingskussen</td><td>Braintree scientific</td><td>39OM</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine/xylazine</td><td>Patterson Veterinary</td><td>78908598</td><td></td></tr><tr><td>Magneetbord</td><td>Braintree scientific</td><td>39OM</td><td></td></tr><tr><td>Magneten met elastiekjes</td><td>Braintree scientific</td><td>39OM</td><td></td></tr><tr><td>Microscopie</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Geen specifiek bedrijf</td></tr><tr><td>Zuurstoftank</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Geen specifiek bedrijf</td></tr><tr><td>PCR-buizen</td><td>ThermoFisher/Invitrogen</td><td>AM12225</td><td>Gebaat voor perfusaatopname</td></tr><tr><td>PE-30 buis</td><td>Braintree scientific</td><td>PE30</td><td></td></tr><tr><td>PE-50 buis</td><td>Braintree scientific</td><td>PE50</td><td></td></tr><tr><td>Peristaltiekpomp</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Geen specifiek bedrijf</td></tr><tr><td>Chirurgische gereedschappen</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Geen specifiek bedrijf</td></tr><tr><td>Hechtdraad</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Geen specifiek bedrijf</td></tr></tbody></table>

glucose-gestimuleerde insulinesecretie via perfusie door het vaatstelsel van muizen met een intacte alvleesklier

Glucose-Stimulated Insulin Secretion via Perfusion through the Mice Vasculature with an Intact Pancreas

Glucose-gestimuleerde insulinesecretie via perfusie door het vaatstelsel van muizen met een intacte alvleesklier

Current methods for glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) in rodents involve ex vivo perifusion or static incubation of pancreatic islets and ...

glucose-stimulated-insulin-secretion-via-perfusion-through-mice

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Het testen in vitro β-celfunctie met geïsoleerde eilandjes van Langerhans muis is een belangrijke component in de studie van diabetes pathofysiologie en therapie. Terwijl veel downstream applicaties beschikbaar zijn, dit protocol beschrijft specifiek de meting van intracellulaire cyclische adenosine monofosfaat (cAMP) als een essentiële parameter bepalen van β-cel functie.

Een methode voor muis eilandjes van Langerhans Isolatie en intracellulaire cAMP Bepaling

Insuline-geïnduceerde vasodilatatie regelt spier perfusie en verhoogt de Microvasculaire oppervlakte (microvasculaire werving) beschikbaar voor opgeloste uitwisseling tussen bloed en weefsel interstitium. Gecombineerde intravital microscopie en contrast-enhanced Ultrasonografie is bedoeld om te beoordelen gelijktijdig insuline de actie op de grotere schepen en de microcirculatie in vivo.

Gecombineerde Intravital microscopie en Contrast-enhanced Ultrasonografie van het stuk van de muis om te bestuderen van de insuline-geïnduceerde vasodilatatie en spier perfusie

Dit protocol demonstreert het isoleren van muizen eiland en zaait op een decellularized steiger. Steigergesteunde eilandjes werden getransplanteerd in het epididymale vetpaneel van streptozotocine (STZ) geïnduceerde diabetische muizen. Islets overleefden op de transplantatieplaats en reverseerde de hyperglycemische conditie.

Steiger-gesteunde transplantatie van eilanden in het epididymale vetpaneel van diabetische muizen

Onder buik solide orgaantransplantatie zijn alvleesklier transplantaties gevoelig voor het ontwikkelen van ernstige ischemie reperfusie letsel-geassocieerde transplantaat schade, leidt uiteindelijk tot vroege prothese verlies. Dit protocol beschrijft een model van lymfkliertest pancreas transplantatie met behulp van een niet-hechtdraad manchet techniek, bij uitstek geschikt voor het analyseren van deze vroege, schadelijke schadevergoeding.

Muismodel voor Pancreas transplantatie met behulp van een gemodificeerde manchet techniek

Dit protocol bestudeert de rol van chemokine (C-C motief) ligand 5 (CCL5) in de hypothalamus door het leveren van een antagonist, MetCCL5, in de hersenen van de muis met behulp van een micro-osmotische hersenen infusie pompsysteem. Deze tijdelijke remming van CCL5 activiteit onderbroken hypothalame insuline signalering, wat leidt tot glucose-intolerantie en perifere systemische insulinegevoeligheid.

Bestuderen van het signaal van de hypothalamische insuline naar perifere Glucose-intolerantie met een continue Drug infusie-systeem in de hersenen van de muis

Het huidige artikel beschrijft het genereren en metabole karakterisering van vetrijke dieet-gevoed muizen als een model van dieet-geïnduceerde insulineresistentie en overgewicht. Het beschikt verder over gedetailleerde protocollen voor het uitvoeren van de orale glucose tolerantie test en de insuline tolerantie test, toezicht op de gehele lichaam wijzigingen van het glucose metabolisme in vivo.

Studie van In Vivo Glucose metabolisme in High-fat dieet-gevoed muizen met behulp van orale Glucose tolerantie Test (OGTT) en insuline tolerantie Test (ITT)

Alvleesklier islet transplantatie is een manier om normoglycemia bij type 1 diabetes. Dit artikel richt zich op de transplantatie-techniek via de intraportal route om normale glucoseniveaus in diabetesmuizen te handhaven.

Intraportal transplantatie van de alvleesklier eilandjes in Mouse Model

In vivo beeldvorming met hoge resolutie van de alvleesklier werd vergemakkelijkt met het pancreas intravital imaging venster.

Gestabiliseerde longitudinale in vivo cellulaire visualisatie van de alvleesklier in een murien model met een pancreas intravital imaging venster

Een hyperglykemische klem wordt gebruikt voor het meten van de insulineafgifte bij een aangehouden hogere bloedglucoseconcentratie. Een hypoglykemische klem is voor het meten van de glucoseproductie die wordt geïnduceerd door tegenregulerende reacties. Beide methoden maken gebruik van dezelfde chirurgische ingreep. Hier presenteren we een klemtechniek om het systemische glucosemetabolisme te beoordelen.

Hyperglykemische klem en hypoglykemische klem bij bewuste muizen

Insulineklaring in de lever is van cruciaal belang voor het reguleren van de glucosehomeostase. Dit artikel beschrijft een gebruiksvriendelijke leverperfusieprocedure voor het direct evalueren van de insulineklaringssnelheid in de lever in situ bij muizen.

Beoordeling van insulineklaring bij muizen via in situ leverperfusie

Leer glucose-gestimuleerde insulinesecretie via perfusie door het vaatstelsel van muizen met een intacte alvleesklier. Deze methode behoudt het microklimaat voor nauwkeuriger onderzoek naar pancreasfunctie en diabetesbehandelingen.

Glucose-gestimuleerde insulinesecretie via perfusie door het vaatstelsel van muizen met een intacte alvleesklier

Meer video's verkennen