1. Kultura prowadzona<ol><li> Próbka PCR pozytywna z Salmonella spp.<ol style='list-style-type:decimal;'><li>Selektywna kultura w medium<ol style='list-style-type:decimal;'><li>Dodaj 100 μL hodowli wstępnej do 5 mL pożywki z Selenitem Cystine w probówce. Inkubować w temperaturze 36 °C przez 18–24 godziny w inkubatorze.</li></ol></li><li>Rozdzielanie kultury na talerzu<ol style='list-style-type:decimal;'><li>Zbierz jedną pętlę hodowli za pomocą mikropętli i rozłóż ją na płytkę XLD lub chromogeniczną płytkę agarową Salmonelli . Inkubuj w temperaturze 36 °C przez 18-24 godziny w inkubatorze.</li></ol></li></ol></li></ol>

<figure class='table'><table class='ck-table-resized'><colgroup><col style='width:25%;'><col style='width:25%;'><col style='width:25%;'><col style='width:25%;'></colgroup><tbody><tr><td>Medium selenitowa cystyna</td><td>LandBridge</td><td>CM225</td><td> </td></tr><tr><td>XLD</td><td>LandBridge</td><td>CM219</td><td> </td></tr><tr><td>Chromogeniczny agar Salmonella</td><td>CHROMagar</td><td>SA130</td><td> </td></tr><tr><td>Mikropętla</td><td>Weierkang</td><td>W511</td><td> </td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>Jinghong</td><td>DNP-9082</td><td> </td></tr></tbody></table></figure>

selektywne wzbogacanie i identyfikacja salmonella spp. z użyciem ksylozy, deoksycholatu lizyny i chromogenicznego agaru

Źródło: <a href='https://app.jove.com/v/58200/a-high-throughput-platform-for-screening-salmonella-sppshigella'>Yang, Z. i inni. Platforma o wysokiej przepustowości do badania Salmonella spp./Shigella spp. J. Vis. Exp. (2018)</a>Ten film demonstruje selektywne wzbogacanie i identyfikację Salmonelli przy użyciu ksylozy deoksycholatu (XLD) oraz chromogenicznego agaru. Bulion seleninowy wspiera wzrost Salmonelli , natomiast agar XLD odsłania kolonie o centrum czarnego poprzez produkcję siarkowodoru. Chromogeniczny agar potwierdza tożsamość poprzez tworzenie pigmentów podporządkowanych enzymami, umożliwiając identyfikację na poziomie gatunkowym.

Selektywne wzbogacanie i identyfikacja Salmonella spp. z użyciem ksylozy, deoksycholatu lizyny i chromogenicznego agaru

Source: Yang, Z., et al. A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates the ...

Zaszczepić hodowlę zawierającą zarówno Salmonellę , jak i inne gatunki niż Salmonella do medium z selenitową cystiną i inkubować.Selenit hamuje wzrost bakterii wrażliwych na selen, zakłócając ich procesy metaboliczne.Jednak bakterie tolerujące selen, w tym Salmonella, mogą metabolizować selenit i rosnąć.Rozmazuj hodowlę na agar lizynowy ksylozy lub XLD i inkubuj.Salmonella redukuje tiosiarczan sodu w agarze XLD do siarkowodoru, który reaguje z jonami żelaza w ośrodku, tworząc siarczek żelaza, tworząc kolonie z czarnymi środkami.Natomiast gatunki nienależące do Salmonelli , które nie produkują siarkowodoru, tworzą kolonie bez czarnych centrów, co pozwala na wizualne odróżnienie od Salmonella.Wybierz kolonię o czarnym środku i nanieś ją na chromogeniczny agar Salmonella , aby zwiększyć specyficzność.Chromogeniczny agar zawiera substraty enzymów specyficzne dla Salmonelli powiązane z chromoforami.Enzymy salmonelli rozszczepiają te substraty, uwalniając chromofory i tworząc kolonie o pigmentacji.Wybierz te kolonie do dalszej analizy.Dodaj 100 mikrolitrów kultury wstępnej wzbogacenia do pięciu mililitrów kryształowego medium selenitu. Następnie wysiabuj hodowlę w temperaturze 36 stopni Celsjusza przez 18 do 24 godzin. Następnie zbierz jedną pętlę hodowli i rozłóż ją na talerzu.Następnie inkubuj płytkę w temperaturze 36 stopni Celsjusza przez 18 do 24 godzin. Po wysiadaniu wybierz podejrzane kolonie i przenieś je na talerz. Inkubuj płytkę w temperaturze 36 stopni Celsjusza przez 18 do 24 godzin.

selective-enrichment-identification-salmonella-spp-using-xylose

Research

JoVE Encyclopedia of Experiments

Microbiology

Mikrobiologia

Bacterial Growth and Techniques

Wzrost bakterii i techniki badawcze

Cultivation and Growth Techniques

Techniki uprawy i wzrostu

Selective Enrichment and Identification of Salmonella spp. Using Xylose Lysine Deoxycholate and Chromogenic Agar

648 Views. Zaszczepić hodowlę zawierającą zarówno Salmonellę , jak i inne gatunki niż Salmonella do medium z selenitową cystiną i inkubować.Selenit hamuje wzrost bakterii wrażliwych na selen, zakłócając ich procesy metaboliczne.Jednak bakterie tolerujące selen, w tym Salmonella, mogą metabolizować selenit i rosnąć.Rozmazuj hodowlę na agar lizynowy ksylozy lub XLD i inkubuj.Salmonella redukuje tiosiarczan sodu w agarze XLD do sia...

Selektywne wzbogacanie i identyfikacja Salmonella spp. z użyciem ksylozy, deoksycholatu lizyny i chromogenicznego agaru

W tym artykule

Streszczenie

Protokół

Materiały

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Powiązane artykuły

Nazwa	Firma	Numer katalogowy
Medium selenitowa cystyna	LandBridge	CM225
XLD	LandBridge	CM219
Chromogeniczny agar Salmonella	CHROMagar	SA130
Mikropętla	Weierkang	W511
Inkubator	Jinghong	DNP-9082