Ten film pokazuje protokół pomiaru kolonizacji korzeni siewek pomidora przez bakterie patogenne typu dzikiego i niedoborowego celulozy. Liczebne ilości gęsto przylegających bakterii wykazują większą przyczepność i tworzenie mikrokolonii przez szczep typu dzikiego, co podkreśla rolę celulozy w stabilnej kolonizacji korzeni.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Ocena kolonizacji korzeni siewek pomidorów przez patogenną bakterię na podstawie liczenia komórek żywotnych
211 wyświetleń
⸱
26 lutego 2026
W tym artykule
Streszczenie
Protokół
1. Pomiar adhezji przy użyciu liczebnych komórek żywotnych
- Określ liczbę żywotnych bakterii związanych z roślinami uprawianymi w piasku
- Wyjmij roślinę z pojemnika i zeszlifuj. Aby usunąć rośliny z pojemników, najpierw usuń materiał uszczelniający z górnej i dolnej części pojemnika. Umieść pojemnik na kawałku sterylnego papieru i delikatnie usuń cały piasek lub ziemię, a następnie zasadź jako duży, zwężany cylinder, delikatnie uderzając pojemnikiem o powierzchnię, aby poluzować materiał.
1. W razie potrzeby użyj szpatułki lub pręta, aby poluzować materiał wokół krawędzi wchodzących przez dno pojemnika.
- Gdy cylinder piasku lub ziemi zawierający roślinę jest wolny na papierze, podziel go na pół, aby odsłonić korzeń rośliny. Jeśli chcesz, pobierz próbki piasku z okolic krawędzi pojemnika, a także z korzenia. Może to być przydatne do określenia rozprzestrzeniania się (oraz gromadzenia i wzrostu) bakterii.
- Zmierz długość korzenia. Podnieś korzeń i usuń piasek oraz bakterie luźno przylegające do korzenia (materiału ryzosfery), zanurzając korzeń w odmierzonej ilości wody lub buforu i delikatnie potrząsając. Określ żywotną liczbę komórek bakterii w powstałej zawiesini, nakładając na odpowiedni nośnik, taki jak agar Luria. Oznacza to liczbę bakterii luźno związanych z korzeniem.
- Usuń gęsto związane bakterie za pomocą sonikacji i określ ich liczbę.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Nasiona | Dowolny | Nie ma | Zanotuj numer partii nasion i odmianę |
| Piasek | Sea sand Fisher Scientific | S25 | |
| Piasek | Sigma-Aldrich | S9887 | |
| Konetainery | Stuewe & Sons, Inc. | Ray-Leachowe stożkowe zastawy | Dostępnych jest wiele różnych rozmiarów, dostosowanych do rodzaju rośliny, którą chcesz uprawiać |
| Sonikator kąpielowy | Każda firma z zaopatrzeniem naukowym | Nie ma | |
| Parafilm | Każda firma z zaopatrzeniem naukowym | Nie ma |
