Method Article

Ocena kolonizacji korzeni siewek pomidorów przez patogenną bakterię na podstawie liczenia komórek żywotnych

February 26th, 2026

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Matthysse, A. G. Przyleganie bakterii do powierzchni roślin mierzone w laboratorium. J. Vis. Exp., (2018)

Ten film pokazuje protokół pomiaru kolonizacji korzeni siewek pomidora przez bakterie patogenne typu dzikiego i niedoborowego celulozy. Liczebne ilości gęsto przylegających bakterii wykazują większą przyczepność i tworzenie mikrokolonii przez szczep typu dzikiego, co podkreśla rolę celulozy w stabilnej kolonizacji korzeni.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Pomiar adhezji przy użyciu liczebnych komórek żywotnych

  1. Określ liczbę żywotnych bakterii związanych z roślinami uprawianymi w piasku
    1. Wyjmij roślinę z pojemnika i zeszlifuj. Aby usunąć rośliny z pojemników, najpierw usuń materiał uszczelniający z górnej i dolnej części pojemnika. Umieść pojemnik na kawałku sterylnego papieru i delikatnie usuń cały piasek lub ziemię, a następnie zasadź jako duży, zwężany cylinder, delikatnie uderzając pojemnikiem o powierzchnię, aby poluzować materiał.

1. W razie potrzeby użyj szpatułki lub pręta, aby poluzować materiał wokół krawędzi wchodzących przez dno pojemnika.

  1. Gdy cylinder piasku lub ziemi zawierający roślinę jest wolny na papierze, podziel go na pół, aby odsłonić korzeń rośliny. Jeśli chcesz, pobierz próbki piasku z okolic krawędzi pojemnika, a także z korzenia. Może to być przydatne do określenia rozprzestrzeniania się (oraz gromadzenia i wzrostu) bakterii.
  2. Zmierz długość korzenia. Podnieś korzeń i usuń piasek oraz bakterie luźno przylegające do korzenia (materiału ryzosfery), zanurzając korzeń w odmierzonej ilości wody lub buforu i delikatnie potrząsając. Określ żywotną liczbę komórek bakterii w powstałej zawiesini, nakładając na odpowiedni nośnik, taki jak agar Luria. Oznacza to liczbę bakterii luźno związanych z korzeniem.
  3. Usuń gęsto związane bakterie za pomocą sonikacji i określ ich liczbę.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
NasionaDowolnyNie maZanotuj numer partii nasion i odmianę
PiasekSea sand Fisher ScientificS25 
PiasekSigma-AldrichS9887 
KonetaineryStuewe & Sons, Inc.Ray-Leachowe stożkowe zastawyDostępnych jest wiele różnych rozmiarów, dostosowanych do rodzaju rośliny, którą chcesz uprawiać
Sonikator kąpielowyKażda firma z zaopatrzeniem naukowymNie ma 
ParafilmKażda firma z zaopatrzeniem naukowymNie ma 

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Root ColonizationTomato SeedlingsPathogenic BacteriaViable Cell CountsSerial DilutionsAgar PlatingSonication TreatmentBacterial AdhesionCellulose DeficiencySand Culture

Related Articles