Test zawieszenia za ogon jest walidowaną procedurą eksperymentalną służącą do oceny skuteczności przeciwdepresyjnej leków u myszy. Myszy są zawieszane za ogony na sześć minut, a następnie ocenia się zachowania związane z próbą ucieczki. Opisujemy procedury stosowane podczas przeprowadzania testu zawieszenia za ogon.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Test zawieszenia ogona
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Test zawieszenia za ogon jest behawioralnym testem mysim, użytecznym w przesiewaniu potencjalnych leków przeciwdepresyjnych oraz ocenie innych manipulacji, które mają wpływać na zachowania związane z depresją. Myszy są zawieszane za ogony za pomocą taśmy, w pozycji uniemożliwiającej ucieczkę lub chwycenie się pobliskich powierzchni. Podczas tego testu, który trwa zazwyczaj sześć minut, kwantyfikowane są wynikające z tego zachowania ukierunkowane na ucieczkę. Test zawieszenia za ogon jest cennym narzędziem w odkrywaniu leków, służącym do wysokoprzepustowego przesiewania potencjalnych związków przeciwdepresyjnych. W niniejszej pracy opisujemy szczegóły niezbędne do przeprowadzenia tego testu, kładąc dodatkowy nacisk na potencjalne problemy, które mogą wystąpić, oraz sposób ich unikania. Proponujemy również rozwiązanie problemu wspinania się po ogonie – częstej trudności, która czyni ten test bezużytecznym u niektórych szczepów myszy, takich jak powszechnie stosowany C57BL/6. Konkretnie, zapobiegamy zachowaniom wspinania się po ogonie poprzez przekładanie ogonów myszy przez mały plastikowy cylinder przed zawieszeniem. Na koniec szczegółowo opisujemy, jak ręcznie oceniać zachowania przejawiane w tym teście.
Protokół
1. Materiały
1. Pudełko do zawieszeń
Test zawieszenia za ogon (TST) polega na zawieszeniu myszy nad ziemią za pomocą ogona. W najprostszym wydaniu procedura wymaga jedynie pręta do zawieszenia lub krawędzi półki oraz taśmy. Eksperymentator powinien jednak rozważyć zastosowanie tła zapewniającego optymalny kontrast. Ponadto zaleca się podjęcie kroków zapobiegających obserwowaniu przez myszy innych testowanych zwierząt. W naszym laboratorium stosujemy specjalnie wykonane skrzynki do zawieszania za ogon (Four-Hour Day, Baltimore MD), wykonane z tworzywa sztucznego o wymiarach (55 wysokość X 60 szerokość X 11,5 cm głęboko....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Opracowanie testu TST przez Steru et al.9 było inspirowane wcześniej opracowanym testem wymuszonego pływania10-12. Podobnie jak w teście wymuszonego pływania, w TST myszy są umieszczane w sytuacji bez wyjścia, ale umiarkowanie stresującej. Brak zachowań związanych z próbą ucieczki uznaje się za unieruchomienie. Podobnie jak test wymuszonego pływania, TST jest testem najlepiej zwalidowanym do oceny skuteczności leków przeciwdepresyjnych, ale stosuje się go również do oceny efektów manipulacj.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy deklarują brak konfliktów interesów.
Podziękowania
Niniejsze badanie zostało sfinansowane z grantów NIHM R01 MH091816 oraz R21 MH084043 przyznanych TDG.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Taśma | |||
| Stoper | |||
| Kamera wideo | |||
| Generator białego szumu (opcjonalnie) | |||
| Climbstoppers (opcjonalnie; w zależności od użytego szczepu) |
Bibliografia
- Mayorga, A. J., Lucki, I. Limitations on the use of the C57BL/6 mouse in the tail suspension test. Psychopharmacology (Berl). 155, 110-112 (2001).
- Dao, D. T. Mo....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
Przeglądaj więcej artykułów
