Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Wywoływanie przerostu mięśniowo-wewnętrznego, a miażdżyca u myszy: wprowadzenie dwóch prawidłowych modeli

11.7K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/51459

⸱

14 maja 2014

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Ten film pokazuje dwa modele rozwoju blaszki miażdżycowej w tętnicach mysich i podkreśla różnice w przeroscie mięśniowo-brzuszkowym i miażdżycy.

Streszczenie

Różne laboratoryjne modele gryzoni in vivo do indukcji zwężenia tętnicy zostały stworzone w celu naśladowania chorób, które obejmują tworzenie się blaszki miażdżycowej tętniczej i zwężenie, co obserwuje się na przykład w chorobie niedokrwiennej serca. Przedstawiono tutaj dwa wysoce powtarzalne modele myszy – oba powodujące zwężenie tętnicy, ale każdy z nich opiera się na innej ścieżce rozwoju. Modele reprezentują dwie najczęstsze przyczyny zwężenia tętnicy; Mianowicie pokazano jeden model mysi dla każdego przerostu mięśniowo-błonowego i miażdżycy. W celu wywołania przerostu mięśniowo-intrymalnego wykonuje się uszkodzenie aorty brzusznej za pomocą cewnika balonowego. Do rozwoju blaszki miażdżycowej stosuje się mysi model ApoE -/- w połączeniu z zachodnią dietą tłuszczową. W niniejszym manuskrypcie wymieniono i opisano różne opcje pomiaru i oceny wyników dostosowane do modelu. Wprowadzenie i porównanie tych dwóch modeli dostarcza informacji dla naukowców, którzy mogą wybrać odpowiedni model zwężenia tętnicy zgodnie z zadanym pytaniem naukowym.

Wprowadzenie

W krajach uprzemysłowionych choroba niedokrwienna serca pozostaje główną przyczyną śmiertelności1. Przyczyny zwężenia tętnicy wieńcowej są wielorakie i obejmują przerost mięśniowo-błony wieńcowej oraz miażdżycę, przy czym najczęstszą strategią leczenia pozostaje rewaskularyzacja2. Modele badawcze, które wyraźnie rozróżniają mechanistyczne szlaki przerostu błony wewnętrznej i miażdżycy, są niezbędne do zbadania procesów patobiologicznych i patofizjologicznych w rozwoju blaszki miażdżycowej. W tym filmie przedstawiono dwa różne modele myszy używane do badania rozwoju przerostu mięśniowo-intimalnej lub miażdżycy.

Postuluj....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie prace ze zwierzętami powinny być wykonywane zgodnie z odpowiednimi wytycznymi dotyczącymi opieki nad zwierzętami. Uzyskaj zgodę instytucjonalną na pracę ze zwierzętami przed rozpoczęciem protokołu.

1. Model przerostu mięśniowo-intimalnego (A)

Dla modelu przerostu błony wewnętrznej, kup myszy C57BL/6J (numer katalogowy 000664, C57BL/6J) w wieku 8 tygodni o wadze około 25 g. Myszy domowe do tych eksperymentów w konwencjonalnych warunkach; karm myszy standardową karmą dla myszy i dostarczaj wodę ad libitum.

  1. Przygotowanie myszy: Wprowadź mysz w stan znieczulenia ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Rycina 1 przedstawia różne opcje analizy oraz indukowany stan chorobowy dla obu modeli. Dla modelu hiperplazji intimy pokazano analizę reprezentatywnych przekrojów poprzecznych w barwieniu trychromem. Z tych przekrojów poprzecznych można zmierzyć i obliczyć takie wyniki jak stosunki I/M, maksymalna grubość blaszki miażdżycowej, maksymalna grubość intimy w świetle naczynia, procentowe zamknięcie światła naczynia oraz powierzchnia blaszki miażdżycowej.

W celu oceny wyników model.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Chociaż obie choroby powodują podobne objawy u pacjenta, mechanizmy leżące u podstaw rozwoju płytki nazębnej, a tym samym podejścia do leczenia, są bardzo różne2. W różnych postaciach zwężenia tętnicy objawy kliniczne u pacjentów, a także ramy czasowe rozwoju blaszki miażdżycowej zależą od podstawowego mechanizmu.

W zależności od objawów klinicznych u pacjenta należy zastosować różne metody analizy próbki5,15. Konieczne jest dostosowanie analizy do charakterystycznych zmi.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Autorzy dziękują Christiane Pahrmann za pomoc techniczną. S.S. otrzymała dofinansowanie od Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992/3-2 i SCHR992/4-2).

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Bulion tyoglikolanowy 3%Fluka70157proszek
PFA 4%Mikroskopia elektronowa Nauki#157135S20%
roztwór barwiący Sudan IIIproszkowaSigmaAldrich S4131
C57BL/6JJackson LaboratoriesStock # 0006664
mysz ApoE -/-Jackson LaboratoriesStock #002052
Western DietHarlan LaboratoriesTD.88137
maszynka do strzyżenia włosówWAHL8786-451A ARCO SE
ForeneAbbottZacisk
mikrochirurgicznyIsoflurane Fine Science Tools18055-04Micro-Serrefine -
aplikator zaciskowyCewnik
Szew prolenowy 10-0Ethicon788G
Szew prolenowy 6-0Ethicon8709H
Szew prolenowy 5-0EthiconEH7229H
RimadylPfizerCarprofen
Metacam 1,5 mg/mlBoehringer IngelheimMetamizol
Mysz 4 mm Fine Science Tools 18056-14

Bibliografia

  1. Manuel, D. G., Leung, M., Nguyen, K., Tanuseputro, P., Johansen, H. Burden of cardiovascular disease in Canada. Can J Cardiol. 19, 997-1004 (2003).
  2. ER, O. B., Ma, X., Simard, T., Pourdjabbar, A., Hibbert, B. Pathogenesis of neointima formation following vascular injury. Cardiova....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Model miażdżycycewnikowanie balonowemyszy z nokautem genu ApoEdieta bogata w tłuszcze i cholesterol (Western Diet)operacja uszkodzenia aortyanaliza histologicznabarwienie czerwienią Sudanmorfometria komputerowapomiar zwężenia światła naczynia