Artykuł metodologiczny

Środki ostrożności i procedury operacyjne w laboratorium (a) BSL-4: 1. Procedury wejścia i wyjścia z kombinezonu laboratoryjnego poziomu bezpieczeństwa biologicznego 4

35.7K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/52317

⸱

3 października 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Integrated Research Facility at Frederick, National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID), National Institutes of Health (NIH), 2Environmental Health and Safety, Biological and Chemical Safety Program, University of Texas Medical Branch

W tym artykule

Podsumowanie

Chociaż badacze są ogólnie zaznajomieni z procedurami i środkami ostrożności wymaganymi do eksperymentów na poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1 lub 2 (BSL-1/2), mogą nie być zaznajomieni z procedurami eksperymentalnymi w laboratoriach kombinezonów BSL-4. Ten artykuł zawiera szczegółową wizualną demonstrację systemów laboratoryjnych kombinezonu BSL-4 sprawdzania, procedur wejścia, przemieszczania i wychodzenia z laboratorium.

Streszczenie

Poziom bezpieczeństwa biologicznego 4 (BSL-4) Laboratoria są specjalnie zaprojektowane do badania patogenów o wysokich konsekwencjach, dla których nie istnieją ani profilaktyka infekcji, ani opcje leczenia. Cechami charakterystycznymi tych laboratoriów są: specjalnie zaprojektowane hermetyczne drzwi, dedykowane systemy nawiewu i wywiewu powietrza, środowisko podciśnieniowe oraz obowiązkowe stosowanie skafandrów nadciśnieniowych ("kosmicznych"). Ryzyko dla specjalistów laboratoryjnych pracujących z wysoce zjadliwymi czynnikami jest zminimalizowane dzięki rygorystycznemu szkoleniu i przestrzeganiu rygorystycznych protokołów bezpieczeństwa i standardowych procedur operacyjnych. Naukowcy wykonują większość swojej pracy w laboratoriach BSL-2 i przechodzą do laboratoriów kombinezonów BSL-4, gdy wymagana jest praca z patogenem o wysokich konsekwencjach. Współpracownicy i naukowcy rozważający projekty BSL-4 powinni być świadomi wyzwań związanych z badaniami BSL-4, zarówno pod względem eksperymentalnych ograniczeń technicznych w przestrzeni laboratoryjnej BSL-4, jak i wydłużonego czasu trwania takich eksperymentów. Zadania takie jak wchodzenie i wychodzenie z laboratoriów kombinezonów BSL-4 są znacznie bardziej złożone i czasochłonne w porównaniu z laboratoriami BSL-2 i BSL-3. Celem tego konkretnego artykułu jest odniesienie się do podstawowych problemów związanych z bezpieczeństwem biologicznym i opisanie procedur wejścia i wyjścia z laboratorium BSL-4 w Zintegrowanym Ośrodku Badawczym NIH/NIAID w Fort Detrick. Takie procedury obejmują sprawdzanie zewnętrznych systemów, które wspierają laboratorium BSL-4, oraz inspekcję i zakładanie skafandrów nadciśnieniowych, wchodzenie do laboratorium, przechodzenie przez drzwi odporne na ciśnienie powietrza i podłączanie do węży doprowadzających powietrze. Omówimy również poruszanie się i wychodzenie z laboratoriów skafandrów BSL-4, w tym korzystanie z prysznica chemicznego oraz zdejmowanie i przechowywanie skafandrów nadciśnieniowych.

Wprowadzenie

Naukowe zainteresowanie egzotycznymi patogenami o poważnych konsekwencjach stale wzrasta w ostatnich latach. Szczególnym zainteresowaniem cieszą się patogeny uważane za pojawiające się lub ponownie pojawiające się czynniki, które są potencjalną bronią biologiczną. Pod względem priorytetu badań i ryzyka patogeny te są klasyfikowane przez Centers for Disease Control and Prevention (CDC) jako czynniki bioterrorystyczne kategorii A-C 1. Ponadto patogeny o wysokich konsekwencjach są klasyfikowane jako wybrane czynniki [i toksyny] w odniesieniu do przepisów dotyczących importu, eksportu i dostępu. W Stanach Zjednoczonych zasady i procedury bezpieczeństwa biologicznego, których należy przestrzegać w przypadku pracy ze specjalnymi patogenami, które wymagają hermetyzacji BSL-2, BSL-3 lub BSL-4, są opisane w Bezpieczeństwie biologicznym w laboratoriach mikrobiologicznych i biomedycznych (BMBL) 2. Patogeny, które są postrzegane jako stanowiące największe zagrożenie dla zdrowia ludzi i/lub zwierząt, są uważane za patogeny BSL-4. W związku z tym badania BSL-4 wymagają szczególnej ostrożności, wysoce specjalistycznego szkolenia oraz solidnej i redundantnej infrastruktury obiektowej 3. Aby zwiększyć ogólną świadomość wyzwań związanych z badaniami BSL-4, konieczne jest zrozumienie wymagań dotyczących operacji w budynkach o wysokim stopniu bezpieczeństwa, zarządzania systemami i rutynowych testów walidacyjnych kontroli inżynieryjnych. Naszym celem jest pogłębienie tej wiedzy poprzez wizualne przedstawienie podwyższonych standardów działania i bezpieczeństwa biologicznego oraz wynikającej z tego zwiększonej trudności praktycznych badań nad zabezpieczeniem BSL-4.

Obiekty, w których znajdują się laboratoria z kombinezonem BSL-4, muszą spełniać rygorystyczne wymagania, w tym, ale nie ograniczając się do dedykowanych systemów wentylacji nierecyrkulacyjnej, rygorystycznego systemu i procesów utylizacji odpadów 4,5 oraz systemów automatyki budynkowej (BAS) 2,6,7. Laboratoryjne powietrze nawiewane jest filtrowane jednorazowo, a powietrze wywiewane jest podwójnie filtrowane przez wysokowydajne filtry cząstek stałych (HEPA), które są corocznie poddawane recertyfikacji. Ponadto BMBL nakłada surowe wymagania dotyczące dekontaminacji odpadów stałych oraz zbierania i odkażania wszystkich ścieków przed ich uwolnieniem do ogólnego systemu odpadów. W system wbudowanych jest wiele redundancji, aby zapobiec uwalnianiu jakiegokolwiek rodzaju patogenu BSL-4. BAS zdalnie monitoruje operacje obiektu i może wskazać obszar problemowy. Systemy wsparcia obiektu są codziennie sprawdzane przez personel w celu zapewnienia optymalnego działania i powiadamiania o problemach w czasie rzeczywistym. Wszystkie systemy są testowane cyklicznie pod kątem zgodności z wymaganiami CDC/Division of Select Agents and Toxins dotyczącymi działania obiektu.

Oprócz tych standardów dla obiektu fizycznego, personel laboratoryjny pracujący z wybranymi agentami i toksynami musi poddać się ocenie ryzyka bezpieczeństwa () przez Departament Sprawiedliwości przed rozpoczęciem pracy z wybranymi agentami lub w ich pobliżu. Ponadto personel pracujący z wybranymi czynnikami poziomu 1 (np. wirus Ebola, Bacillus anthracis) musi być zarejestrowany w Programie Niezawodności Personelu (PRP), który stale ocenia zdrowie fizyczne i psychiczne poszczególnych badaczy 8. Badania przesiewowe mają na celu sprawdzenie, czy osoby są fizycznie zdolne do wykonywania pracy w zabezpieczeniu BSL-4 w bezpieczny sposób. Badania przesiewowe w zakresie zdrowia psychicznego oceniają ogólne samopoczucie, dobrostan i odporność psychiczną oraz świadomość bezpieczeństwa personelu. W NIAID naukowcy współpracujący z wybranymi agentami przechodzą dodatkową kontrolę, w ramach której każda osoba przechodzi kontrolę przeszłości Access National Agency Check and Inquiry (ANACI), która bada kwalifikacje edukacyjne i zawodowe, historię kryminalną, historię finansową i ryzyko zagranicznych wpływów.

W porównaniu do wejścia do laboratorium BSL-2, maksymalne wejście do bezpiecznego pomieszczenia wymaga znacznie większych nakładów środków, czasu i szkolenia. Po zatwierdzeniu przez i zarejestrowaniu się w Wydziale Wybranych Czynników i Toksyn, personel musi przejść rygorystyczne szkolenie praktyczne przed uzyskaniem dostępu do laboratoriów kombinezonów BSL-4. Personel laboratorium przechodzi szkolenie w zakresie obsługi obiektu, w tym codzienne kontrole funkcji krytycznych oraz procedury wejścia/wyjścia 9. Personel jest również przeszkolony w zakresie bezpieczeństwa biologicznego i pielęgnacji w laboratorium oraz korzystania z kombinezonów dodatnich ciśnieniowych. Białe kombinezony wykonane z tkaniny poliestrowej z powłoką z polichlorku winylu są używane w Zintegrowanym Ośrodku Badawczym NIH/NIAID w Fort Detrick. Obiekty, które używają innych typów/marek komercyjnych skafandrów nadciśnieniowych, mogą wymagać innych procedur operacyjnych przy wchodzeniu i wychodzeniu z laboratorium BSL-4 niż te opisane tutaj. Badacze w placówkach korzystających z tego artykułu powinni uwzględnić te różnice przed szkoleniem. Szkolenie w zakresie kombinezonów w Zintegrowanym Ośrodku Badawczym NIH/NIAID w Fort Detrick obejmuje odpowiednie procedury zakładania kombinezonu, upewnienia się, że kombinezon działa prawidłowo, naprawy i konserwacji kombinezonów (w laboratorium i poza nim) oraz poruszania się w laboratorium. Po zakończeniu tego szkolenia pracownik laboratorium może rozpocząć pracę w laboratoriach kombinezonów BSL-4. Początkowo inny doświadczony członek personelu jest indywidualnym mentorem nowo przeszkolonego członka personelu podczas pierwszych pięciu wizyt w laboratoriach kombinezonów BSL-4. Aby pracować samodzielnie w Zintegrowanym Ośrodku Badawczym NIH/NIAID w Fort Detrick, nowo przeszkolony członek personelu odbywa co najmniej 40 nadzorowanych wizyt w laboratoriach kombinezonów BSL-4 z co najmniej 100 godzinami praktycznego czasu pracy w laboratoriach.

Protokół

1. Codzienna zewnętrzna lista kontrolna

  1. Sprawdź systemy bezpieczeństwa. Sprawdź systemy powietrza do oddychania, systemy cofania powietrza hamującego, systemy odkażania ścieków (EDS), system natrysku chemicznego, kierunkowy przepływ powietrza i funkcjonalność autoklawu (rysunek 1).

2. Procedury wstępu do laboratorium

  1. Procedury wejścia do korytarza buforowego przez personel laboratorium
    1. Wprowadź imię i nazwisko pracownika, czas wejścia, lokalizację laboratorium i badane patogeny w dzienniku wejść/wyjścia personelu. Wskaż lokalizację laboratorium na tablicy magnetycznej.
    2. Aby upewnić się, że systemy laboratoriów kombinezonu BSL-4 działają prawidłowo, sprawdź, czy systemy zewnętrzne zostały sprawdzone, a laboratoria zostały dopuszczone do wpisu na codzienną listę kontrolną bezpieczeństwa systemów zewnętrznych (rysunek 1).
    3. Aby upewnić się, że ciśnienie w pomieszczeniu laboratoryjnym mieści się w nastawach podciśnienia, które utrzymuje prawidłowy kierunkowy przepływ powietrza, sprawdź monitor systemu automatyki budynkowej (BAS) na zewnątrz zewnętrznego wejścia do szatni. Jeśli ciśnienie w pomieszczeniu nie mieści się w normalnym zakresie, należy powiadomić personel zajmujący się bezpieczeństwem biologicznym lub obiektem i opóźnić wejście do laboratorium do czasu, aż ciśnienie powróci do normalnego zakresu.
    4. Zapewnić dostępność autoklawu do sterylizacji odpadów biologicznych i/lub prania po zakończeniu prac eksperymentalnych.
    5. Zaopatrz się w fartuchy, skarpetki i ręczniki z magazynu zawierającego zapasy placówki, znajdującego się w pobliżu Dziennika Wejść/Wyjścia Personelu.
  2. Procedury wejścia do szatni zewnętrznej przez personel laboratorium:
    1. Spełnij wymagania bezpieczeństwa, które regulują i dokumentują dostęp do laboratorium biologicznego. Wejdź do zewnętrznej przebieralni.
    2. Zdejmij całą odzież uliczną, bieliznę, biżuterię i zegarki, załóż fartuch i udaj się do pokoju z garniturami.
  3. Kontrola kombinezonu ochronnego pod wpływem nadciśnienia i testowanie integralności przez personel laboratoryjny w pomieszczeniu ze skafandrami:
    1. Po uzyskaniu kombinezonu ochronnego nadciśnieniowego o odpowiednim rozmiarze należy przeprowadzić oględziny kombinezonu w poszukiwaniu, rozdarć, punktów przebicia, rozdarć szwów lub słabych punktów. Dokładnie sprawdź rękawice zewnętrzne kombinezonu, ponieważ rękawice są najbardziej prawdopodobnym miejscem uszkodzenia.
    2. Rękawice należy zmieniać co najmniej co 7 dni kalendarzowych lub w przypadku stwierdzenia uszkodzenia rękawic.
      1. Aby wymienić rękawice zewnętrzne, usuń taśmę klejącą z istniejącej rękawicy garniturowej, zwiń O-ring na rękaw i zdejmij starą rękawicę garniturową.
      2. Załóż nową rękawicę na mankiet kombinezonu i upewnij się, że rękawica zakrywa cały mankiet, a kciuk jest we właściwej pozycji. Umieść O-ring na rękawicy, umieść O-ring w rowku na mankiecie i użyj taśmy klejącej, aby zabezpieczyć zewnętrzną rękawicę kombinezonu.
      3. Złóż mankiet rękawicy na taśmie klejącej i pierścieniu uszczelniającym o przekroju okrągłym, uszczelnij rękawicę ostatnim kawałkiem taśmy klejącej i ponownie sprawdź nowo założoną rękawicę.
    3. Nałóż cienką warstwę smaru do zamka błyskawicznego na zamek błyskawiczny co najmniej raz w tygodniu.
    4. Zakryj każdy z zaworów wydechowych, znajdujących się wewnątrz kombinezonu za osłoną głowy i po lewej stronie pleców, taśmą klejącą lub aluminiową nasadką do prób ciśnieniowych, a następnie zapnij kombinezon na zamek błyskawiczny.
    5. Podłącz szybkozłączkę/nasadkę łączącą na końcu każdego przewodu oddechowego do złącza węża w kombinezonie. Napompuj kombinezon, aż ręce i nogi będą mocne i ustaw kombinezon w pozycji pionowej. Odłączyć dopływ powietrza.
    6. Kombinezon nie powinien być pod nadmiernym ciśnieniem, ponieważ nadmierne ciśnienie może spowodować poważne uszkodzenie kombinezonu. Dokładnie sprawdź kombinezon pod kątem oznak wycieku powietrza przez około 5 minut i sprawdź wzrokowo kombinezon pod kątem oznak deflacji. Upewnij się, że kombinezon nie jest pod nadmiernym ciśnieniem, ponieważ nadmierne ciśnienie może spowodować poważne uszkodzenie kombinezonu.
    7. Jeśli kombinezon straci twardość, sprawdź, czy kombinezon nie przecieka, ponownie pompując kombinezon. Słuchaj i czuj przecieki w kombinezonie. W razie potrzeby spryskaj wszystkie powierzchnie kombinezonu ochronnego roztworem mydła. Niektóre typowe obszary przecieków to szwy kombinezonu, obszar zamka błyskawicznego oraz połączenie materiału daszka z materiałem kombinezonu. Monitoruj tworzenie się pęcherzyków wskazujących na wyciek, zwracając szczególną uwagę na szwy i daszek. Sprawdź, czy zawory wydechowe są całkowicie uszczelnione.
    8. Napraw tymczasowo małe wycieki tkaniny za pomocą taśmy klejącej. Wykonaj trwałe naprawy, używając materiału z zestawu naprawczego kombinezonu. Jeśli kombinezonu nie można łatwo naprawić, odkaż go środkiem dezynfekującym na bazie alkoholu i wyjmij z pomieszczenia z garniturem. Jeśli kombinezon nie nadaje się do naprawy, wycofaj kombinezon z użytku i sspalaj.
    9. Po zakończeniu testu integralności rozepnij kombinezon i zdejmij osłony z zaworów wydechowych. Niezdjęcie osłon wydechu spowoduje zatkanie filtracji i poważne uszkodzenie kombinezonu. Wprowadź informacje o testach i naprawach w dzienniku testów integralności kombinezonu nadciśnieniowego.
  4. Zakładanie skafandra nadciśnieniowego w pomieszczeniu z kombinezonami i wchodzenie do laboratoriów kombinezonów BSL-4:
    1. Przyklej skarpetki do nóg peelingów. Załóż wewnętrzne rękawice nitrylowe i przyklej je taśmą klejącą do mankietów peelingu. Załóż drugą parę rękawic nitrylowych (nie zaklejonych taśmą) na rękawice wewnętrzne. W razie potrzeby wyczyść wewnętrzną osłonę twarzy środkiem do czyszczenia szkła, aby zwiększyć widoczność.
    2. Załóż kombinezon nadciśnieniowy, upewniając się, że kombinezon jest całkowicie zapięty na zamek błyskawiczny i podłącz kombinezon do przewodu powietrza do oddychania. Wejdź do laboratoriów kombinezonu BSL-4, gdy monitory BAS są wolne od alarmów.
    3. Aby wejść do laboratoriów kombinezonów BSL-4, odłącz się od przewodu powietrza do oddychania w pomieszczeniu kombinezonu i naciśnij przycisk prośby o dostęp do kabiny prysznica chemicznego.
    4. Po aktywacji drzwi odpornych na ciśnienie powietrza (APR) uszczelka wokół drzwi opróżnia się, a magnes drzwi odłącza się. Drzwi APR w kabinie prysznica chemicznego są zazębione, co oznacza, że jedne drzwi APR muszą być zamknięte, gdy drugie są otwarte, aby utrzymać szczelność przez cały czas. Aby przejść przez kabinę prysznica chemicznego, zamknij drzwi APR do pomieszczenia z garniturami, poczekaj, aż pęcherz ponownie się napompuje i całkowicie uszczelni ościeżnicę, a następnie aktywuj drugie drzwi APR prowadzące do laboratorium.
    5. Po wejściu do laboratoriów skafandra BSL-4 podłącz kombinezon do dostępnego przewodu powietrza do oddychania.
    6. Zanim przejdziesz dalej, zamknij drzwi APR prowadzące do laboratorium i upewnij się, że prysznic chemiczny jest automatycznie aktywowany w celu dezynfekcji obszaru prysznica chemicznego i kombinezonu. Po zdezynfekowaniu drzwi APR w kabinie prysznicowej z chemikaliami można ponownie otworzyć z pomieszczenia na garnitur. Jeśli cykl się nie rozpocznie, skontaktuj się z personelem zarządzającym obiektem.
    7. Jeśli kombinezon nie ma integralnych butów, załóż parę ochraniaczy na buty, które znajdują się na półkach obok drzwi wyjściowych, drzwi do prysznica chemicznego APR. Aby uniknąć dodatkowego ryzyka/zagrożeń, sprawdź, czy ochraniacze na buty są dopasowane i dobrze dopasowane.

3. Ruch w laboratoriach kombinezonów BSL-4

  1. Poruszaj się swobodnie po laboratoriach, odłączając i ponownie podłączając przewody powietrzne w wszystkich laboratoriach. Pozostań podłączony do przewodu powietrznego, aby utrzymać nadciśnienie podczas próby schylania się lub podnoszenia przedmiotów blisko ziemi.
    UWAGA: Takie ruchy po odłączeniu od przewodu powietrznego spowodują wydmuchiwanie powietrza do oddychania z wnętrza skafandra i wytworzenie podciśnienia, które może pozwolić powietrzu laboratoryjnemu na przedostanie się do wszelkich wyłomów w skafandrze.
  2. Obserwuj monitory we wszystkich laboratoriach pod kątem różnych alarmów i aktualnego stanu pakietu.

4. Procedury wyjścia z laboratorium BSL-4 Suit Laboratories

  1. Odkażaj ręce w rękawiczkach w detergentach, środkach dezynfekujących, środkach czyszczących, w plastikowych zbiornikach do maczania przy zlewie lub w wewnętrznych korytarzach. Jeśli nie ma zbiornika do namaczania, spryskaj dokładnie ręce w rękawiczkach środkiem dezynfekującym.
  2. Sprawdź spód ochraniaczy na buty lub buty pod kątem widocznego materiału. Jeśli ochraniacze na buty są czyste, zdejmij je i umieść na półkach przylegających do drzwi APR prysznica chemicznego. Zamknij wszystkie drzwi wewnętrzne laboratorium, odłącz od przewodu powietrza do oddychania i przejdź do prysznica chemicznego.
  3. Jeśli kalosze są brudne, umyj je dokładnie w zlewie z detergentem dezynfekującym.

5. BSL-4 Procedury chemicznego prysznica

  1. Wejdź do prysznica chemicznego, naciskając przycisk żądania dostępu, aby otworzyć drzwi APR i zamknąć drzwi. Podłącz kombinezon do przewodu powietrza do oddychania wewnątrz prysznica.
  2. Po zamknięciu drzwi APR cykl prysznica chemicznego aktywuje się automatycznie, aby uwolnić odpowiednią mieszaninę detergentu i środka dezynfekującego, aby prawidłowo zdezynfekować kombinezon i obszar prysznica chemicznego. Jeśli cykl nie rozpocznie się automatycznie, pociągnij za uchwyt zlewowy. Szoruj kombinezon przez około 1 minutę, wepchnij uchwyt zraszacza z powrotem na miejsce, aby zapobiec całkowitemu opróżnieniu zbiorników z chemicznym środkiem dezynfekującym. Ręczny cykl prysznica nie jest dostępny.
  3. Sprawdź, czy rękawice i stopy nie przeciekają, umieszczając dłonie i stopy w rękawiczkach w plastikowej pojemniku zawierającej detergent i środek dezynfekujący, środek czyszczący, przechowywany pod prysznicem chemicznym. Poszukaj płynów lub wilgoci pod rękawicą zewnętrzną i sprawdź, czy na rękawicy zewnętrznej nie ma rozdarć, rozdarć lub słabych części. Jeśli zostanie stwierdzona nieszczelność w jednej z rękawic zewnętrznych, poczekaj, aż cykl prysznica zostanie zakończony, zdejmij rękawicę zewnętrzną i najbardziej zewnętrzną rękawicę wewnętrzną, a rękawicę zewnętrzną pozostaw w plastikowej pojemniku.
  4. Wyszoruj kombinezon i zintegrowane buty kombinezonu za pomocą szczotki do szorowania z długą rączką lub rąk, aby rozprowadzić chemiczny środek dezynfekujący na wszystkie powierzchnie kombinezonu. Dokładnie spłucz kombinezon detergentu dezynfekującego środka czyszczącego podczas obiegu wody pod prysznicem.
  5. Odłącz przewód powietrza do oddychania, wcześniej wystawiony na działanie powietrza laboratoryjnego, zarówno podczas obiegu chemicznego, jak i wodnego, aby zdezynfekować połączenie w skafandrze. Wypłucz przyłącze przewodu powietrza dowolnego detergentu dezynfekującego środka czyszczącego. Bez odłączenia detergent dezynfekujący nie może w inny sposób wyczyścić połączenia przewodu powietrza.
  6. Otwórz drzwi prowadzące do pokoju z garniturami i zamknij je po wyjściu.
  7. W przypadku sytuacji awaryjnej, takiej jak skaleczenie lub pożar niezagrażające życiu, należy postępować zgodnie z tą samą procedurą opisaną w punkcie 5.2.

6. Procedury w pomieszczeniu garniturowym po wyjściu z chemicznego prysznica

  1. Osusz zewnętrzną część kombinezonu dużym ręcznikiem. Rozepnij kombinezon nadciśnieniowy, zdejmij jedną rękę z zewnętrznej rękawicy kombinezonu i dokładnie sprawdź zewnętrzną stronę zewnętrznej rękawicy nitrylowej pod kątem wilgoci.
  2. Jeśli wilgoć przedostała się przez rękawicę zewnętrzną, zdejmij rękawicę zewnętrzną i zewnętrzną rękawicę nitrylową i wyrzuć do kosza na odpady stanowiące zagrożenie biologiczne. Zdejmij drugą rękę i powtórz kontrolę.
  3. Zdejmij kombinezon i kontynuuj suszenie zewnętrznej części kombinezonu, aby zapobiec uszkodzeniom spowodowanym zgnilizną na sucho. Spryskaj wnętrze osłony twarzy środkiem do czyszczenia szkła i wytrzyj do sucha. Zawieś kombinezon do wyschnięcia. Usuń taśmę klejącą i wewnętrzne rękawice nitrylowe z fartuchów i wyrzuć te przedmioty do wyznaczonego kosza na odpady stanowiące zagrożenie biologiczne.
  4. Udokumentuj wszelkie wycieki lub naprawy skafandra w dzienniku kombinezonu i zgłoś je kierownictwu obiektu.
  5. Udaj się do wewnętrznej przebieralni, usuń brudne fartuchy i skarpetki, a następnie umieść je w wyznaczonym koszu na pranie. Kontynuuj i wejdź do osobistego prysznica.

7. Procedury wyjścia z prysznica osobistego i zewnętrznej przebieralni

  1. Włącz prysznic i dokładnie umyj włosy i ciało przez minimum 3 minuty wodą z mydłem. Wyjdź z osobistego prysznica i udaj się do zewnętrznej przebieralni.
  2. Wysusz i załóż ubrania uliczne, wyjdź z zewnętrznej przebieralni, umieść zużyte ręczniki w wyznaczonym koszu na pranie i przejdź do korytarza buforowego.
  3. Należy wskazać czas wyjścia w dzienniku wejść/wyjść personelu oraz wskazać wyjście z laboratorium na tablicy lokalizacyjnej.

Wyniki

Personel przeszedł staranne i dokładne szkolenie w zakresie tych technik, aby zapewnić bezpieczne i spójne praktyki wewnątrz laboratorium BSL-4. Poprzez sprawdzanie, czy placówka działa prawidłowo, zgodnie z codzienną listą kontrolną (Rysunek 1), jesteśmy w stanie zapewnić, że wszystkie niezbędne kontrole administracyjne i techniczne są wdrożone i funkcjonują, aby utrzymać bezpieczne i prawidłowo działające środowisko. Kombinezon z nadciśnieniową ochroną zapewnia dodatkową warstwę ochrony dla członka personelu. Prawidłowa konserwacja i użytkowanie tych kombinezonów są integralną częścią ochrony osobistej pracowników. Dzięki ścisłemu przestrzeganiu tych procedur nie odnotowano żadnych zakażeń laboratoryjnych w Zintegrowanym Ośrodku Badawczym NIH/NIAID w Fort Detrick.

Tabela z listą kontrolną bezpieczeństwa BSL-4 dla zewnętrznej inspekcji systemu; autoklaw, monitorowanie systemu powietrznego, status alarmów.
Rysunek 1: Codzienna wizualna lista kontrolna systemów wsparcia i zapasowych dla BSL-4. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Dyskusja

Przedstawiliśmy procedury wejścia i wyjścia BSL-4 stosowane w zintegrowanym ośrodku badawczym NIH/NIAID w Fort Detrick do pracy z wysoce niebezpiecznymi patogenami (grupa ryzyka 4). Jednym z celów wizualizacji procedur wejścia i wyjścia BSL-4 jest podkreślenie znaczenia bezpieczeństwa personelu laboratoryjnego podczas pracy z takimi patogenami w celu uniknięcia zakażeń nabytych w laboratorium. Podciśnienie, laboratoria BSL-4 utrzymują kierunkowy przepływ powietrza do wewnątrz, aby zapewnić, że patogeny zostaną zatrzymane w laboratorium. Kombinezony nadciśnieniowe z dedykowanymi systemami powietrza do oddychania noszone przez personel laboratorium ograniczają kontakt patogenów unoszących się drogą powietrzną z personelem laboratorium. Po opuszczeniu laboratorium BSL-4 przez personel laboratoryjny następuje prysznic chemiczny, który dezynfekuje powierzchnię potencjalnie skażonego kombinezonu, a tym samym zapobiega potencjalnemu skażeniu pozostałej części budynku i osoby przebierającej się w kombinezon.

Ponieważ integralność skafandra nadciśnieniowego jest jedną z kilku ważnych głównych barier zapobiegających potencjalnemu narażeniu na patogeny, personel jest zobowiązany do sprawdzenia, czy kombinezon nie przecieka przed wejściem i po wyjściu z laboratoriów BSL-4. Jeśli dojdzie do wycieku, personel identyfikuje lokalizację wycieku i powiadamia kierownictwo obiektu. Praktyki te zapewniają szybką reakcję na wszelkie narażenie na patogeny o poważnych konsekwencjach. Chociaż dokładamy wszelkich starań, aby wyeliminować ryzyko dla personelu laboratoryjnego, naruszenie kombinezonu może nastąpić w wyniku użycia szkła, ostrych narzędzi, agresji zwierząt lub ciągłego użytkowania.

Chociaż przedstawione tutaj procedury są zasadniczo zgodne ze specyfikacjami BMBL określonymi przez CDC 2, procedury te są specyficzne dla IRF-Frederick. Każdy obiekt BSL-4 ma inne specyfikacje projektowe budynku, które wpływają na dokładne metody pracy laboratorium. Alternatywne procedury wchodzenia i wychodzenia z laboratoriów BSL-4 zależą częściowo od projektu i działania tych laboratoriów. Ponadto przepisy rządowe w różnych krajach mogą mieć również wpływ na procedury laboratoryjne BSL-4 w każdym kraju. Niemniej jednak ogólne zrozumienie procedur BSL-4 i systemów monitorowania budynków, które wspierają bezpieczeństwo personelu laboratoryjnego, pomoże administratorom służby zdrowia, którzy rozważają zaprojektowanie podobnych budynków, oraz zewnętrznym współpracownikom zaangażowanym w badania patogenów wysokiego ryzyka.

Wydajność wzrośnie, ponieważ coraz więcej pracowników laboratoryjnych jest szkolonych w zakresie procedur wejścia i wyjścia z laboratorium BSL-4 oraz przeprowadzania eksperymentów w warunkach BSL-4. Jednak przy projektowaniu protokołów z zewnętrznymi współpracownikami należy przeznaczyć wystarczająco dużo czasu na wykonanie nawet podstawowych operacji laboratoryjnych, a oczekiwania dotyczące ram czasowych dostarczania wyników muszą być dostosowane poprzez akceptację trudności związanych z pracą w laboratoriach BSL-4. Uogólnione założenie jest takie, że każdy eksperyment przeprowadzony w BSL-2 (np. 2 godziny) będzie wymagał dwa razy więcej czasu na wykonanie w BSL-4 (np. 4 godziny).

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Treść tej publikacji niekoniecznie odzwierciedla poglądy lub politykę Departamentu Zdrowia i Opieki Społecznej USA lub instytucji i firm powiązanych z autorami. KJ, MRH i LB wykonywali tę pracę jako pracownicy Battelle Government Services, Inc.; JHK jako pracownik Tunnell Government Services, Inc.; oraz MGL jako pracownik Lovelace Respiratory Research Institute, Inc. Tunnell Government Services i Lovelace Respiratory Research Institute są podwykonawcami Battelle Memorial Institute w ramach głównej umowy z NIAID, na podstawie umowy nr 1. HHSN272200700016I.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Micro-Chem PlusNarodowe Laboratoria Chemiczne255
WindexGrainger3U560
Aluminiowa nasadka do prób ciśnieniowych SperianHoneywell SperianCC0199649
SperianHoneywell SperianCC0199621
Sperian Protection Suit Integrity Test Test LogNANAUtworzony przez indywidualne laboratorium
Kombinezon nadciśnieniowy SperianProdukty bezpieczeństwa HoneywellBSL 4-2
Woda z mydłemNANAStworzone przez indywidualne laboratorium
Rękawice do skafandrów zewnętrznych (puszki)Fisher19-019-601
Rękawice do skafandra zewnętrznego (MAPA)Fisher2MYU1
Rękawice do kombinezonów nitrylowychFisher19-050-592
Zip LubeAmazonB000GKBEJA
ScrubsCintas60975/60976
SkarpetyCintas944
Taśma klejącaPack-N-Tape51131069695
RęcznikiCintas2720
O-ringiMagazyn O-ringówAS568-343
Ochraniacze na butyAmazon
Plastikowe zbiorniki do zanurzaniaFisher14-831-113
Dziennik wejść i wyjśćNANAStworzone przez indywidualne laboratorium
Puder dla niemowlątAmazon44230
EtanolFisherBP2818500
Zestaw naprawczy skafandra B0034KZE22

Bibliografia

  1. of Allergy and Infectious Diseases. NIAID Category A, B, and C Priority Pathogens. National Institute of Allergy and Infectious Diseases. , National Institute. Bethesda, MD, . http://www.niaid.nih.gov/topics/biodefenserelated/biodefense/pages/cata.aspx (2013).
  2. Chosewood, L. C., Wilson, D. E. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. , 5th, U.S. Dept. of Health and Human Services, Public Health Service, Centers for Disease Control and Prevention, National Institutes of Health. Washington, D.C. http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5 (2009).
  3. Shurtleff, A. C., et al. The impact of regulations, safety considerations and physical limitations on research progress at maximum biocontainment. Viruses. 4, 3932-3951 (2012).
  4. Walker, J., Stern, L. A Guide to the Biosolids Risk Assessments for the EPA Part 503 rule. , US Environmental Protection Agency, Office of Wastewater Management. Washington D.C. http://water.epa.gov/scitech/wastetech/biosolids/503rule_index.cfm (1995).
  5. Salkin, I. F., Krisiunas, E., Turnberg, W. L. Medical and infectious waste management. Appl. Biosaf. 5 (2), 54-69 (2000).
  6. de Kok-Mercado, F., Kutlak, F., Jahrling, P. B. The NIAID integrated research facility at Fort Detrick. Appl. Biosaf. 16 (2), 58-66 (2011).
  7. Jahrling, P. B., et al. The NIAID Integrated Research Facility at Frederick, Maryland: a unique international resource to facilitate medical countermeasure development for BSL-4 pathogens. Pathog. Dis. , (2014).
  8. Skvorc, C., Wilson, D. E. Developing a behavioral health screening program for BSL-4 laboratory workers at the National Institutes of Health. Biosecur. Bioterror. 9, 23-29 (2011).
  9. Le Duc, J. W., et al. Framework for leadership and training of Biosafety Level 4 laboratory workers. Emerg. Infect. Dis. 14 (11), 1685-1688 (2008).

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Kombinezon nadci nieniowyzak adanie kombinezonuzdejmowanie kombinezonuprysznic chemicznydrzwi odporne na ci nienie powietrzaprocedury bezpiecze stwa biologicznegowej cie do laboratoriumwyj cie z laboratoriumprotoko y bezpiecze stwa

Powiązane artykuły