Artykuł metodologiczny

Immunohistochemia skrawków parafinowych naskórka myszy przy użyciu przeciwciał fluorescencyjnych

DOI:

10.3791/552

8 stycznia 2008

W tym artykule

Podsumowanie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Opisujemy niezawodną metodę immunolokalizacji w obrębie naskórka, zmodyfikowaną zarówno dla sekcji mrożonych, jak i parafinowych, której używamy bardzo rutynowo w naszym laboratorium.

Streszczenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
W naskórku immunohistochemia jest skutecznym sposobem lokalizowania określonych białek w ich względnym przedziale ekspresji; mianowicie warstwy podstawne, nadpodstawne i warstwy rogowej naskórka. Precyzyjna lokalizacja danego białka w naskórku dostarcza wskazówek na temat jego funkcjonalnej roli w naskórku. W tym rozdziale opisujemy wiarygodną metodę immunolokalizacji w obrębie naskórka, zmodyfikowaną zarówno dla skrawków mrożonych, jak i parafinowych, którą bardzo rutynowo stosujemy w naszym laboratorium. Przekroje parafinowe na ogół zapewniają znacznie lepszą morfologię, a co za tym idzie lepsze wyniki i zdjęcia; Jednak nie wszystkie przeciwciała będą działać z ostrym utrwaleniem i leczeniem związanym z ich przetwarzaniem. W związku z tym dołączony jest również protokół podziału na zamrożone sekcje. W ramach sekcji parafinowej opisano dwa protokoły utrwalania (Bouina i paraformaldehyd); Wybór utrwalacza będzie bezpośrednio związany ze specyfikacją przeciwciał i może wymagać innej metody utrwalania.

Protokół

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kompletny protokół tekstowy dla tego eksperymentalnego podejścia jest dostępny w Protokoły Springera.

Oświadczenia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

ImmunohistochemistryParaffin SectionsMouse EpidermisFluorescent AntibodiesAntigen UnmaskingBouin FixationTissue ProcessingAntibody LabelingFluorescence MicroscopyEpidermal Layers

Powiązane artykuły