Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Częściowy heterotopowy model przeszczepu kończyn tylnych u szczurów

2.9K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/62586

⸱

9 czerwca 2021

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Ten artykuł przedstawia częściowy protokół heterotopowego przeszczepu płata kostno-skórnego u szczurów i jego potencjalne wyniki w obserwacji średnioterminowej.

Streszczenie

Unaczynione allotransplantacje kompozytowe (VCA) stanowią najbardziej zaawansowaną opcję rekonstrukcji dla pacjentów bez autologicznych możliwości chirurgicznych po złożonym ubytku tkankowym. Przeszczepy twarzy i ręki zmieniły życie zniekształconych pacjentów, dając im nowy estetyczny i funkcjonalny narząd społeczny. Pomimo obiecujących wyników, VCA jest nadal niedostatecznie efektywny z powodu współistniejących chorób immunosupresyjnych i powikłań infekcyjnych przez całe życie. Szczur jest idealnym modelem zwierzęcym do badań in vivo badających szlaki immunologiczne i mechanizmy odrzucania przeszczepu. Szczury są również szeroko stosowane w nowatorskich technikach konserwacji przeszczepów tkanek kompozytowych, w tym w badaniach perfuzji i kriokonserwacji. Modele stosowane do VCA u szczurów muszą być powtarzalne, niezawodne i wydajne, a ich zachorowalność i śmiertelność pooperacyjna muszą być niskie. Heterotopowe zabiegi transplantacji kończyn spełniają te kryteria i są łatwiejsze do wykonania niż ortotopowe przeszczepy kończyn. Opanowanie modeli mikrochirurgicznych gryzoni wymaga solidnego doświadczenia w mikrochirurgii i opiece nad zwierzętami. W niniejszym artykule przedstawiono wiarygodny i powtarzalny model częściowego heterotopowego przeszczepu płata kostno-mięśniowo-skórnego u szczurów, wyniki pooperacyjne oraz sposoby zapobiegania potencjalnym powikłaniom.

Wprowadzenie

W ciągu ostatnich dwóch dekad VCA ewoluowało jako rewolucyjne leczenie dla pacjentów, którzy cierpią na poważne zniekształcenia, w tym face1, amputacje kończyn górnych2, penile3, oraz inne złożone wady tkanek4,5. Jednak konsekwencje immunosupresji trwającej całe życie nadal utrudniają szersze zastosowanie tych złożonych operacji rekonstrukcyjnych. Badania podstawowe mają kluczowe znaczenie dla poprawy strategii przeciwdziałania odrzuceniu. Wydłużenie czasu przechowywania VCA jest również niezbędne do poprawy logistyki przeszczepów i zwięks....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie zwierzęta były traktowane w sposób humanitarny, zgodnie z wytycznymi NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. Wszystkie protokoły dotyczące zwierząt zostały zatwierdzone przez Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC-protokół 2017N000184) oraz Animal Care and Use Review Office (ACURO). Do wszystkich eksperymentów wykorzystano inbredowe samce szczurów szczepu Lewis (250-400 g).

1. Operacja

  1. Zanieść szczury linii Lewis w narkozę za pomocą inhalacji izofluranem. Indukcję znieczulenia przeprowadzić przy użyciu 5% izofluranu w komorze indukcyjnej, a następnie podtrzymać znieczulenie inhalacyjne stężeni....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W tej badaniu przeprowadzonym przez jednego operatora wykonano 30 syngeneicznych heterotopowych częściowych przeszczepów kończyn. Sukces zdefiniowano w 21. dniu po operacji jako brak odrzutu VCA lub powikłań wymagających eutanazji. Prawidłowy rozwój przeszczepu przedstawiono na Rysunku 3. Średni czas pobrania części kończyny i wszczepienia przeszczepu biorcy wynosił odpowiednio 35 i 105 min; średni czas niedokrwienia wynosił 105 min. Podczas obserwacji wystąpiły dwa rodzaje powikłań (

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Ortotopowe modele transplantacji kończyn u gryzoni opisano w piśmiennictwie 16,17,18; Wymagają jednak naprawy nerwów, ponownego przyczepienia mięśni i doskonałej osteosyntezy kości udowej, co może być bardzo trudnym krokiem. Modele te są również związane z wyższą zachorowalnością i śmiertelnością u gryzoni14, zwłaszcza w krótkoterminowej obserwacji, ponieważ przywrócenie normalnej funkcji przeszczepionej .......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie ujawnili żadnych informacji.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez Biuro Asystenta Sekretarza Obrony ds. Zdrowia poprzez Kongresowo Kierowany Program Badań Medycznych pod numerem nagrody W81XWH-17-1-0680. Opinie, interpretacje, wnioski i zalecenia są opiniami autorów i niekoniecznie są zatwierdzone przez Departament Obrony.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
24 GA angiocewnikBD Insyte Autoguard381412
szew 4-0 monofilamentowy niewchłanialny szewEthicon1667Służy do szycia E-collar z tyłu szyi
Szew 4-0 Powlekany Vicryl Plus AntibacterialEthiconVCP496
Kleszczyki do tkanek Adson, 11 cm, 1 x 2 zęby z platformą wiążącąASSIASSI.
Sznury bipolarneASSI228000C
Poliamid Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8cAROSurgicalT04A10N07-13Służy do wykonywania zespoleń mikronaczyniowych
Buprenorphine HClPharmaceutical, Inc42023-179-01
Kleszcze rozszerzająceNarzędzia do precyzyjnej nauki (FST)18131-12
Nożyczki preparacyjne 15 cm, okrągła rękojeść o średnicy 8 mm, proste, smukłe, stożkowe ostrze 7 mm, wzór LipshultzASSIASSI.
Podwójne mikrozaciski 5,5 x 1,5 mmNarzędzia do nauki precyzyjnej (FST)18040-22
Obroża elżbietańskaKleszcze Braintree ScientificEC-R1
o długości 13,5 cm, płaska rękojeść, szerokość 9 mm Proste końcówki o średnicy 0,1 mm (x2)ASSIASSI. JFL31
Halsey Micro NeedleHolder Narzędzia do precyzyjnej nauki (FST)12500-12
Heparyna Lock Roztwór do spłukiwania, USP, 100 jednostek/mlBD PosiFlush306424
IsofluranePatterson Veterinary14043-704-06
Jubilerzy Kleszcze bipolarne nieprzywierające 11 cm, końcówka z prostym szpiczastym końcem, średnica końcówki 0,25 mmASSIASSI.
Lone Star Elastyczne podporyCooperSurgical3314-8GSłuży do cofania więzadła pachwinowego do rozwarstwiania naczyń udowych
Retraktory samozabezpieczające Lone StarCooperSurgical3301G
Hemostatyki mikrokomarówNarzędzia do nauki precyzyjnej (FST)13010-12Służy do dystalnego
chowania pachwinowej poduszeczki tłuszczowejUchwyt igły, 15 cm okrągła rękojeść, średnica 8 mm, bardzo finezyjna zakrzywiona szczęka o średnicy końcówki 0,2 mm, bezblokady ASSIASSI. B1582
Szew nylonowy Monolfilament 8-0, 6,5 mm 3/8cEthilon2808GSłuży do podwiązywania gałęzi pobocznych na naczyniach udowych
Obcęgi kostne offsetoweNarzędzia do precyzyjnego uczenia się (FST)16101-10
S& T Zaciski naczyniowe 5,5 x 1,5 mmNarzędzia do precyzyjnej nauki (FST)00398-02
Nożyczki WaltonNarzędzia do nauki precyzyjnej (FST)14077-09
ATK26426SAS15RVLBPNS11223

Bibliografia

  1. Lanteiri, L., et al. Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes. American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).
  2. Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Przeszczep heterotopowynaczyniowo-kompozytowy przeszczep allogenicznyszczurzy model transplantacyjnytechniki mikrochirurgicznezachowanie kończynyodrzucanie przeszczepumikroanastomoza naczyniowastatyczne przechowywanie w zimnieperfuzja kończyny