JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 2:23 min. • April 30th, 2023
- Aby wyizolować jajniki od żywych much Drosophila, zacznij od przeniesienia znieczulonej samicy do jednej z trzech studzienek preparacyjnych wypełnionych wstępnie podgrzanym podłożem do preparowania owadów. Pożywka pomoże utrzymać integralność i żywotność tkanek.
Pod mikroskopem preparacyjnym oddziel brzuch od klatki piersiowej. Następnie przenieś brzuch do nowej studzienki. Aby wyizolować jajniki, przytrzymaj brzuch na tylnym końcu i ostrożnie zeskrob narządy rozrodcze. Na koniec przenieś jajniki do świeżej studzienki. Po tym kroku możesz użyć całego jajnika lub dalej rozbić go na jego struktury składowe.
Każdy jajnik Drosophila składa się z kilku jajników, składających się z łańcucha komór jajowych o rosnącym poziomie dojrzałości. Aby uwolnić jajniki, przypnij jajnik do nieprzezroczystego tylnego końca i ostrożnie drażnij osłonkę ochronną z okolic jajnika, aż jajniki zostaną prawidłowo oddzielone.
W przykładowym protokole pokażemy sekcję jajników Drosophila w celu ich zastosowania w mikroskopii tkanek żywych i stałych.
- Po posortowaniu pięciu znieczulonych samic much zgodnie z protokołem tekstowym, pod mikroskopem preparacyjnym użyj dwóch par kleszczy, aby odciąć klatkę piersiową od brzucha. Następnie ostrożnie przenieś brzuchy do drugiego dołka naczynia. Używając jednej pary kleszczy do przytrzymania brzucha na tylnym końcu, użyj drugiej pary kleszczy, aby powoli wypchnąć jajniki.
Następnie użyj kleszczy, aby przytrzymać pojedynczy jajnik za nieprzezroczysty tylny koniec i ostrożnie przenieś go do trzeciego dołka naczynia w celu drażnienia lub utrwalenia. Ostrożnie drażnij osłonkę ochronną z okolic jajników, używając kleszczy do przytrzymania tylnego końca i lekko przesuwając igłę drażniącą od tylnego do przedniego końca.