JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 2:57 min. • April 30th, 2023
- Na dodatnio naładowanym szkiełku mikroskopowym przyklej dwa szkiełka nakrywkowe w wystarczającej odległości między nimi, aby stworzyć przestrzeń do zamontowania mózgów Drosophila. Pod mikroskopem stereoskopowym odpipetuj mózgi w pożywce montażowej w tej przestrzeni. Ujemny ładunek tkanki pomoże mózgom przylegać do dodatniego ładunku na powierzchni szkiełka.
Usuń nadmiar podłoża mocującego, aby umożliwić precyzyjne ustawienie mózgów na szkiełku w układzie siatki z płatami czułkowymi skierowanymi do góry, a następnie połącz dwa szkiełka nakrywkowe, przyklejając trzeci szkiełko nakrywkowe, aby zakryć mózgi.
Aby wypełnić ubytek, umieść pożywkę montażową po jednej kropli na raz w krawędzi ubytku i pozwól mu rozprzestrzenić się ruchem kapilarnym, aby nie przeszkadzało mózgowi.
Uszczelnij ubytek lakierem do paznokci i przechowuj w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza w ciemności, aby zachować fluorescencję poplamionych tkanek.
W przykładowym protokole zamontujemy mózgi Drosophila do konfokalnego obrazowania neuronów wybarwionych immunologicznie.
- Aby zamontować mózgi, zbuduj zjeżdżalnię mostową. Umieść dwie pokrywy dolne w odległości około jednego centymetra od siebie na dodatnio nał
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych