JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 3:32 min. • April 30th, 2023
- Umieść szkiełko nakrywkowe z wypreparowanymi komorami na jajka na stoliku mikroskopu. Zlokalizuj komorę jajową o odpowiednim etapie rozwoju i orientacji do mikroiniekcji. Komory jajowe w średnim i późnym stadium mają duże widoczne żółtko oocytu, a te w prawidłowej orientacji mają oś przednio-tylną prostopadłą do kierunku wstrzyknięcia.
Komórki nerwowe Drosophila to grupa 15 komórek wewnątrz komory jajowej odpowiedzialnych za deponowanie składników odżywczych i biomolekuł pochodzących od matki w rozwijającym się oocycie. Ustaw system mikrowtryskiwaczy na odpowiednie ciśnienie wtrysku i kompensacji, aby zapewnić stałą objętość wtrysku i przepływ na zewnątrz. Ostrożnie umieścić wcześniej załadowaną igłę kapilarną w polu viewtak aby komórki i igła znajdowały się w tej samej płaszczyźnie ogniskowej.
Upewnij się, że w końcówce kapilary nie jest uwięzione powietrze i że roztwór ma ciągły przepływ. Następnie wyreguluj położenie Z obiektywu, aby skupić się na błonie oddzielającej komórki pęcherzykowe od komórek pielęgniarskich, włóż igłę do komórki pielęgniarskiej i wykonaj wstrzyknięcie.
Poniższy protokół demonstruje mikrowstrzykiwanie komórek pielęgniarskich Drosophila za pomocą fluores
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych