Wstrzyknięcie dorosłych much Drosophila: metoda dostarczania związku lub etykiety

- Przygotować stożkowe igły iniekcyjne, przeciągając cienkościenne szklane naczynia włosowate za pomocą ściągacza do igieł. Przytrzymaj igłę pod mikroskopem i złamij końcówkę, upewniając się, że otwór jest wystarczająco duży, aby przebić naskórek dorosłej muchy bez ranienia go bardziej niż to konieczne. Zmierz objętość wstrzyknięcia, ładując igłę sterylnym roztworem barwnika i buforu soli, a następnie wyrzucając go na kroplę oleju mineralnego na mikrometrze etapowym. Użyj skali na mikrometrze, aby zmierzyć średnicę wyrzucanej kropli, której można użyć do obliczenia dozowanej objętości i odpowiedniej kalibracji ustawień wtryskiwacza.

Naładować igłę roztworem do wstrzykiwań i zamontować ją na dyszy iniekcyjnej. Znieczul swoje muchy CO2 i ułóż je na podkładce przeciw muchom CO2, która utrzyma je w znieczuleniu. Gdy muchy znajdą się w odpowiedniej orientacji dla twojego eksperymentu, przystąp do wstrzykiwań. W przykładowym protokole wstrzykniemy dorosłym muszkom cząstki znakowane fluoresceiną w celu obrazowania in vivo.

- Po narysowaniu cienkościennych szklanych kapilar za pomocą ściągacza do igieł, użyj mikrometru, aby przytrzymać igłę pod mikroskopem i użyj pęsety ze stali nierdzewne